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抗體抗原修復(fù)應(yīng)注意的問題

時(shí)間:2015-3-13閱讀:547
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抗體抗原修復(fù)應(yīng)注意的問題

    抗體操作中還應(yīng)注意如下問題:,熱處理后應(yīng)注意自然冷卻。2.熱處理時(shí)要防止切片干燥。3,應(yīng)根據(jù)不同的抗體選擇合適的抗原修復(fù)方法。4,同一批抗原的檢測所用溫度和時(shí)間確保一致。5,注意形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)的改變(一般經(jīng)高溫修復(fù)后胞漿會明顯被破壞,對細(xì)胞核的影響較大,會出現(xiàn)核破裂與蘇木到淡染等現(xiàn)象;而經(jīng)酶水解的切片,其細(xì)胞漿破壞視消化時(shí)間長短而異,但核破壞較輕)。6,如果在常用的緩沖液中無法實(shí)現(xiàn)抗原修復(fù),或經(jīng)修復(fù)后的抗原定位發(fā)生改變,可改用一些不常用的緩沖液,或加一些螯合劑,如EDTA等可改善某些抗原的修復(fù)。

    用于免疫酶組織化學(xué)抗原修復(fù)的消化酶很多,所選酶的種類、使用的濃度、pH、消化時(shí)間及溫度等均要視組織固定的不同,所檢測抗原的性質(zhì)與組織類型的不同而異,應(yīng)通過預(yù)實(shí)驗(yàn)摸索確定。使用酶消化的原則:和蛋白酶K一般用于細(xì)胞內(nèi)抗原,如Keratin,CEAGFAP等。則主要用于細(xì)胞間質(zhì)抗原的檢測。抗體fibronectin,Laminin與各型膠原等。一般來說,消化時(shí)間和組織切片固定的長短呈正比。在用酶消化與熱修復(fù)后均不能獲得結(jié)果的前提下使用抗原修復(fù)與酶消化結(jié)合的方法,有時(shí)會取得較為滿意的結(jié)果。一般常用蛋白酶K和微波相結(jié)合,但應(yīng)注意,無論何種性質(zhì)的抗原檢測均可能會在核內(nèi)出現(xiàn)假陽性反應(yīng)。因此必須要做對照。

YSRIBIO5835    Anti-Phospho-Smad (Ser206) /FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad-抗體IgG    Multi-class antibodies    規(guī)格:     0.2ml
YSRIBIO5836    Anti-Phospho-Smad/5 (Ser463/465)/FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad-/5抗體IgG    Multi-class antibodies    規(guī)格:     0.2ml
YSRIBIO5837    Anti-Smad2/3 /FITC  熒光素標(biāo)記Smad 2/3抗體IgG    Multi-class antibodies    規(guī)格:     0.2ml
YSRIBIO5838    Anti-phospho-Smad2(p-Ser465) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠、牛,馬,犬,雞磷酸化Smad2抗體IgG    Multi-class antibodies    規(guī)格:     0.2ml
YSRIBIO5839    Anti-Phospho-Smad2 (Ser465/467)/FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD2抗體IgG    Multi-class antibodies    規(guī)格:     0.2ml
YSRIBIO5840    Anti-Phospho-Smad2 (Ser245/250/255)/FITC  熒光素標(biāo)記磷酸化細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD2抗體IgG    Multi-class antibodies    規(guī)格:     0.2ml
YSRIBIO584    Anti-Phospho-Smad3 (Ser423/425) /FITC   熒光素標(biāo)記磷酸化細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD3抗體IgG    Multi-class antibodies    規(guī)格:     0.2ml
YSRIBIO5842    Anti-Smad4/FITC  熒光素標(biāo)記Smad4抗體IgG    Multi-class antibodies    規(guī)格:     0.2ml

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