ELISA試劑盒技術(shù)實(shí)驗(yàn)步驟：

. 細(xì)胞在含有0%FBS的DMEM培養(yǎng)基中生長。

2. 細(xì)胞以一定密度接種到24孔細(xì)胞培養(yǎng)板中，生長24小時后，單層細(xì)胞融合度應(yīng)達(dá)到70-80%。

3. 不要更換培養(yǎng)基。用新的ml槍頭輕輕的在單層培養(yǎng)細(xì)胞間劃痕，劃痕橫穿過孔，槍頭盡量與板孔的底部垂直，不要傾斜。這樣產(chǎn)生的gap的距離才與槍頭末端的外直徑相等。Gap的距離可以選用不同型號的槍頭調(diào)節(jié)。劃痕在同一方向成一條直線。

4. 在垂直與*條劃痕的方向制作另一條劃痕，每孔劃痕成十字交叉型。

5. 劃痕后，用培養(yǎng)基輕輕的清洗板孔2次，以去除脫落細(xì)胞。

6. 每孔添加新鮮培養(yǎng)基。

7. (培養(yǎng)基中含有某些成分，如抑制/促進(jìn)細(xì)胞遷移和/或增殖的化學(xué)物質(zhì))。

8. 細(xì)胞生長48小時(或根據(jù)時間需要)。

9. xPBS清洗細(xì)胞兩次，然后使用3.7%多聚甲醛固定30分鐘。

0. 0.%的結(jié)晶紫(2%乙醇溶解)染色30分鐘。

. 染色的單層細(xì)胞選取不同的視野，顯微鏡拍照。ELISA試劑盒gap的距離可通過Photoshop或ImagJ軟件測量.為了降低實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可變性，建議每孔選擇多個視野觀察，每組做多個重復(fù)。

20mg 十七碳酸甲酯 含量測定 常溫，避光 694-20050
20mg 槐角苷 含量測定 常溫，避光 695-20050
20mg 芒柄花素 鑒別 常溫，避光 703-200602
0.2ml (-)-薄荷酮 GC法含量測定 常溫，避光 705-200602
0.2ml 胡薄荷酮 含量測定 常溫，避光 706-20004
20mg ,5-O-二咖啡酰奎寧酸 含量測定 常溫，避光 77-20050
20mg 3，29-二苯甲?；闃侨嗜?常溫，避光 724-
20mg 柳穿魚葉苷 含量測定 常溫，避光 728-2000
20mg 6-羥基-7-甲氧基香豆素 含量測定 常溫，避光 74-20050
20mg 當(dāng)藥苷 含量測定 常溫，避光 742-20050
ml 正丁醇 含量測定 常溫，避光 743-20050
0mg -羥基-3，4，5-*氧基山酮 含量測定 常溫，避光 744-20050
ml 醋酸乙酯 含量測定 常溫，避光 746-20050
ELISA試劑盒20mg 20(S)-原人參二醇 含量測定 常溫，避光 747-20050
20mg 20(S)-人參皂苷Rh2 含量測定 常溫，避光 748-20050
00mg 左旋樟腦 GC法含量測定 常溫，避光 749-20060
0.2ml 薏苡仁油 鑒別 常溫，避光 750-20060