進(jìn)口ELISA試劑盒幾個(gè)世紀(jì)以來(lái),人們一直使用含金藥物來(lái)治療一些病癥如類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎。此外,這些含金藥物可能對(duì)抗癌和抗HIV有效。這些含金藥物起作用時(shí)會(huì)發(fā)生一種機(jī)理,因?yàn)榻痣x子會(huì)迫使脫離鋅指的鋅離子與結(jié)合蛋白結(jié)構(gòu)域的核酸成環(huán)。美國(guó)研究人員已經(jīng)用離子遷移質(zhì)譜表征了這種“金手指”并確定了的金結(jié)合位點(diǎn)。
盡管金屬離子有多種潛在的結(jié)合位點(diǎn),但每種金屬蛋白通常喜歡單一構(gòu)象。以前在構(gòu)象異構(gòu)體混合物中特異性結(jié)合位點(diǎn)的位置不可能確定。 現(xiàn)在Farrell和他的團(tuán)隊(duì)仔細(xì)檢查了兩個(gè)金手指并用一種特殊分析方法TWIM-MS(travelling-wave ion mobility mass spectrometry)對(duì)其進(jìn)行了表征。根據(jù)表征結(jié)果分析可知,取代Sp轉(zhuǎn)錄因子鋅指3中的鋅僅導(dǎo)致產(chǎn)生一種金手指,研究人員認(rèn)為這種金手指具有線性Cys-Au-His鍵;以HIV核衣殼蛋白為例,核衣殼蛋白在病毒復(fù)制中起關(guān)鍵作用,將金置于蛋白質(zhì)(NCp7-F2)的鋅指2中,進(jìn)口ELISA試劑盒導(dǎo)致產(chǎn)生了三種不同的帶有線性ys-Au -Cys圖案的金手指,顯然其中之一占主導(dǎo)地位。
研究人員的成功源于使用了TWIM-MS(travelling-wave ion mobility mass spectrometry)的分析方法。這種分析方法的原理是:待分析的分子被電離,離子通過(guò)氣體中的電場(chǎng)加速,與氣體分子的碰撞會(huì)導(dǎo)致離子速度減慢,大體積分子的速度比小型緊湊型分子的速度更慢,因?yàn)樾⌒途o湊型分子碰撞更頻繁,這使得區(qū)分和分離異構(gòu)體成為可能,因?yàn)楸M管異構(gòu)體具有相同的質(zhì)量,但它們不同的幾何形狀導(dǎo)致不同的遷移率,一旦根據(jù)其遷移率分離,那么現(xiàn)在各個(gè)離子就可以通過(guò)碰撞誘導(dǎo)解離(CID)成碎片,并通過(guò)質(zhì)譜再次測(cè)量碎片。這種分析方法可以用來(lái)表征與金結(jié)合的較短肽。
Farrell說(shuō):“通過(guò)TWIM-MS,我們能夠確定金修飾的鋅指NCp7-F2和Sp-F3的具體結(jié)合位點(diǎn)和模式,因此離子遷移率質(zhì)譜提供了關(guān)于鋅指蛋白中鋅交換引起的幾何變化的重要信息,以及這些反應(yīng)的選擇性和反應(yīng)性,進(jìn)口ELISA試劑盒這可能有利于尋找新的金屬基抗病毒和抗腫瘤藥物。”