一.利用干擾實驗即可辨別進口ELISA試劑盒是否檢測目的抗原,方法如下:
() 將針對試劑盒特異性的重組蛋白抗原和試劑盒中的檢測抗體配置成antibody: antigen≈:2的混合孵育液
(2) 37℃孵育5分鐘后,代替原試劑盒中的檢測抗體
(3) 后續(xù)操作按照試劑盒說明書進行,加檢測抗體、酶復(fù)合物和底物
(4) 實驗完畢后,檢測其標(biāo)準(zhǔn)曲線,如果標(biāo)準(zhǔn)曲線良好則說明加入的目的抗原和試劑盒抗體不匹配,試劑盒檢測抗體針對的是非目的抗原,該試劑盒為偽劣假造ELISA試劑盒。
(5) 如果標(biāo)準(zhǔn)曲線無線性,則說明試劑盒檢測抗體已被目的抗原中和或干擾,影響了其實際試劑盒抗體的檢測作用,則該試劑盒檢測抗體針對的是目的抗原。
二. 如果購買了兩盒同一公司的進口ELISA試劑盒A和B,利用交叉實驗即可辨別進口ELISA試劑盒是否造假,方法如下:
() 取出購買的試劑盒A的包被板兩條。
(2) 一條包被板加試劑盒A的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線。
(3) 另一條包被板加試劑盒B的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線。
(4) 后續(xù)操作按照試劑盒說明書進行,加檢測抗體、酶復(fù)合物和底物。
(5) 實驗完畢后,檢測兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線,如果兩條
標(biāo)準(zhǔn)曲線一致則說明兩個ELISA試劑盒檢測的同一個指標(biāo)而非A和B,即該試劑盒為偽劣假造ELISA試劑盒。
(6) 如果兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線不一致則說明兩個進口ELISA試劑盒檢測的不同指標(biāo),試劑盒A只能檢測A,不能檢測B,即該試劑盒為正常的進口ELISA試劑盒。