使用方法:
一、樣品 RNA 的制備
、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意：可以選用本公司的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二：RT（逆轉(zhuǎn)錄）反應(yīng)合成 cDNA
. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系（20 μL 體系）
2. 70℃保溫 5 分鐘變性模板后立即冰浴。
3. 嚴(yán)格按順序加入 6μL RT Buffer（含 dNTP）和 2μL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶（含 RI），
反應(yīng)終體積為 20μL。
4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應(yīng)。
5. 70℃保溫 0 分鐘以終止反應(yīng)，然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為 PCR 模板使用，丌需要純化。
?產(chǎn)品名稱：無綠藻通用PCR檢測試劑盒價格
英文名稱：Prototheca spp.PCR
規(guī)格：詳見說明書
類別:PCR檢測試劑盒
運(yùn)輸：低溫、避光、快遞免費(fèi)送貨上門。
用途：生化實驗，合成實驗等試驗。
運(yùn)輸及保存:低溫運(yùn)輸,-20℃保存, 保存期限為 6 個月。
自備試劑：樣品 RNA。

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性能指標(biāo)：點(diǎn)擊了解更多PCR檢測試劑盒。
.試劑盒檢測特異性為00%
2. 檢測試劑盒重現(xiàn)性為00%
3. 靈敏度可達(dá)到03/ml
4. 有效期為6個月
注意事項：
①加入試劑的順序應(yīng)*，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 5-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至0kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.～umol或0～00pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
?抗干擾TaqDNA 聚合酶英文名(EN)：Dimethyl phthalate,≥99%CAS No.：3--3規(guī)格(SP)：00G類別(Key)：通用試劑

Long-Taq DNA聚合酶英文名(EN)：Diethy phthalate,≥99%CAS No.：84-66-2規(guī)格(SP)：00ML類別(Key)：通用試劑

Tth DNA聚合酶英文名(EN)：Butyltriphenylphosphonium bromide,99%CAS No.：779-5-7規(guī)格(SP)：25G類別(Key)：表面活性劑

Red-Tth DNA聚合酶英文名(EN)：Dibutyl phthalate,99%CAS No.：84-74-2規(guī)格(SP)：00ML類別(Key)：通用試劑

熱啟動Tth DNA聚合酶英文名(EN)：Ethyltriphenylphosphonium bromide,99%CAS No.：530-32-規(guī)格(SP)：25G類別(Key)：表面活性劑

Pfu DNA聚合酶英文名(EN)：Ethyltriphenylphosphonium iodide,≥95%CAS No.：4736-60-規(guī)格(SP)：25G類別(Key)：表面活性劑

Red-Pfu DNA聚合酶英文名(EN)：Ethyl phenylacetate,≥99%CAS No.：0-97-3規(guī)格(SP)：00G類別(Key)：通用試劑

Phusion DNA聚合酶英文名(EN)：Methyl hexanoate,≥99%CAS No.：06-70-7規(guī)格(SP)：00G類別(Key)：通用試劑

KOD DNA聚合酶英文名(EN)：Ethyl hexanoate,≥98%CAS No.：23-66-0規(guī)格(SP)：00G類別(Key)：通用試劑

Red-KOD DNA聚合酶英文名(EN)：Triethyl phosphate,≥99.8%CAS No.：78-40-0規(guī)格(SP)：00ML類別(Key)：通用試劑

Tfl DNA聚合酶英文名(EN)：Ethyl heptanoate,≥98%CAS No.：06-30-9規(guī)格(SP)：00G類別(Key)：通用試劑

E.coli DNA聚合酶 Ι英文名(EN)：Ethyl octanoate,≥98%CAS No.：06-32-規(guī)格(SP)：00G類別(Key)：通用試劑

Klenow 片段 (3´→ 5´ exo-)英文名(EN)：Ethyl lactate,≥98%CAS No.：97-64-3規(guī)格(SP)：00G類別(Key)：通用試劑

Klenow 片段英文名(EN)：Methyl salicylate,≥98%CAS No.：9-36-8規(guī)格(SP)：00G類別(Key)：通用試劑

φ29 DNA聚合酶英文名(EN)：Ethyl palmitate,≥95%CAS No.：628-97-7規(guī)格(SP)：00G類別(Key)：通用試劑

T4 DNA 聚合酶 英文名(EN)：Trimethyl phosphonoacetate,98%CAS No.：5927-8-4規(guī)格(SP)：25G類別(Key)：通用試劑

T7 DNA 聚合酶(未修飾)英文名(EN)：Tetraethyl orthosilicate,98%CAS No.：28767規(guī)格(SP)：00ML類別(Key)：通用試劑

Vent DNA 聚合酶英文名(EN)：Propyl acetate,≥98%CAS No.：09-60-4規(guī)格(SP)：00G類別(Key)：通用試劑
無綠藻通用PCR檢測試劑盒價格肉毒桿菌(A/B型)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)0.ml美國Jackson公司分裝

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