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.多殺巴斯德菌PCR檢測試劑盒品牌試劑盒檢測特異性為00%
2. 檢測試劑盒重現性為00%
3. 靈敏度可達到03/ml
4. 有效期為6個月產品名稱:多殺巴斯德菌PCR檢測試劑盒品牌
英文名稱:Pasteurella multocidaPCR
規(guī)格:詳見說明書
類別:PCR檢測試劑盒
運輸:低溫、避光、快遞免費送貨上門。
用途:生化實驗,合成實驗等試驗。
運輸及保存:低溫運輸,-20℃保存, 保存期限為 6 個月。
自備試劑:樣品 RNA。
使用方法:
一、多殺巴斯德菌PCR檢測試劑盒品牌樣品 RNA 的制備
、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意:可以選用本公司的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆轉錄)反應合成 cDNA
. 按下表配制 RT 反應體系(20 μL 體系)
2. 70℃保溫 5 分鐘變性模板后立即冰浴。
3. 嚴格按順序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),
反應終體積為 20μL。
4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應。
5. 70℃保溫 0 分鐘以終止反應,然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為 PCR 模板使用,丌需要純化。
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 5-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至0kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.~umol或0~00pmol,以低引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。?RNase-free 水英文名(EN):6-Methyluracil (HPLC,97%)CAS No.:626-48-2規(guī)格(SP):00G類別(Key):通用試劑
RNase-free 水英文名(EN):5-Fluorouracil,≥99%CAS No.:5-2-8規(guī)格(SP):G類別(Key):通用試劑
RNA洗脫液英文名(EN):L-(?)-Glucose,≥99%CAS No.:92-60-8規(guī)格(SP):250MG類別(Key):通用試劑
RNA洗脫液英文名(EN):L-(+)-Lyxose,99%CAS No.:949-78-6規(guī)格(SP):G類別(Key):通用試劑
RNA溶解液 英文名(EN):β-D-Ribofuranose -acetate 2,3,5-trib...CAS No.:6974-32-9規(guī)格(SP):G類別(Key):通用試劑
RNase-free CTAB溶液,20%英文名(EN):2,3,5-Tri-O-benzyl-β-D-arabinofuranos...CAS No.:60933-68-8規(guī)格(SP):5G類別(Key):通用試劑
RNase-free DTT溶液,M英文名(EN):,2,3,5-Tetra-O-acetyl-β-D-ribofurano...CAS No.:3035-6-5規(guī)格(SP):5G類別(Key):通用試劑
RNase-free EDTA溶液,0.5 M,pH 8.0英文名(EN):2-Deoxy-D-galactose,98%CAS No.:949-89-9規(guī)格(SP):G類別(Key):通用試劑
RNase-free 75%乙醇英文名(EN):Diacetone-D-Mannitol,98%CAS No.:707-77-3規(guī)格(SP):5G類別(Key):通用試劑
RNase-free 鹽酸胍溶液,8M英文名(EN):Diacetone-D-galactose,97%CAS No.:790544規(guī)格(SP):5G類別(Key):通用試劑
RNase-free 異硫氰酸胍溶液,5M英文名(EN):beta-D-Galactose Pentaacetate,98%CAS No.:463-60-4規(guī)格(SP):5G類別(Key):通用試劑
RNase-free 氯化鋰溶液,0M英文名(EN):D-Glucal,96%CAS No.:3265-84-4規(guī)格(SP):G類別(Key):通用試劑
RNase-free PVP K30溶液,20%英文名(EN):Monoacetone glucose,≥98%CAS No.:8549-40-規(guī)格(SP):5G類別(Key):通用試劑
RNase-free Sarkosyl溶液,0%英文名(EN):,2:3,5-Di-O-isopropylidene-alpha-D-xy...CAS No.:2088-04-3規(guī)格(SP):5G類別(Key):通用試劑
RNase-free SDS溶液,0%英文名(EN):D-Galactal,95%CAS No.:293-75-9規(guī)格(SP):500MG類別(Key):通用試劑
RNase-free 乙酸鈉,3M,pH 5.2英文名(EN):β-D-(+)-Glucose pentaacetate,98%CAS No.:604-69-3規(guī)格(SP):25G類別(Key):通用試劑
RNase-free Tris HCl,M,pH 6.5英文名(EN):α-D(+)-Glucose pentaacetate,99%CAS No.:604-68-2規(guī)格(SP):25G類別(Key):通用試劑
RNase-free Tris HCl,M,pH 7.0英文名(EN):D-(+)-Glucose monohydrate,≥99.5%CAS No.:443-43-7規(guī)格(SP):250G類別(Key):通用試劑
多殺巴斯德菌PCR檢測試劑盒品牌通用型豬輪狀病毒(Porcine rotavirus)基因檢測試劑盒 進口/國產 規(guī)格:20次
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通用型牛新孢子蟲病(Neospora caninum)基因檢測試劑盒 進口/國產 規(guī)格:20次
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細胞牛病毒性腹瀉病毒(Bovine Viral Diarrhoea Virus;BVDV)定性基因檢測試劑盒 進口/國產 規(guī)格:20次
組織牛病毒性腹瀉病毒(Bovine Viral Diarrhoea Virus;BVDV)定性基因檢測試劑盒 進口/國產 規(guī)格:20次
注意事項:
①多殺巴斯德菌PCR檢測試劑盒品牌加入試劑的順序應*,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
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