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當前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>PCR檢測試劑盒>>熒光-PCR法>> 新疆出血熱病毒(XHFV)核酸檢測試劑盒供應(yīng)商
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產(chǎn)品型號
品 牌
廠商性質(zhì)代理商
所 在 地上海市
更新時間:2019-04-17 12:38:53瀏覽次數(shù):625次
聯(lián)系我時,請告知來自 環(huán)保在線大豆內(nèi)源基因Lectin核酸檢測試劑盒供應(yīng)商
性能指標:點擊了解更多熒光-PCR法。
.試劑盒檢測特異性為00%
2. 檢測試劑盒重現(xiàn)性為00%
3. 靈敏度可達到03/ml
4. 有效期為6個月?產(chǎn)品名稱:新疆出血熱病毒(XHFV)核酸檢測試劑盒供應(yīng)商
規(guī)格:48T/盒
類別:熒光-PCR法
運輸:低溫、避光、快遞免費送貨上門。
用途:生化實驗,合成實驗等試驗。
運輸及保存:低溫運輸,-20℃保存, 保存期限為 6 個月。
自備試劑:樣品 RNA。
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使用方法:
一、樣品 RNA 的制備
、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意:可以選用本公司的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆轉(zhuǎn)錄)反應(yīng)合成 cDNA
. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系(20 μL 體系)
2. 70℃保溫 5 分鐘變性模板后立即冰浴。
3. 嚴格按順序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),
反應(yīng)終體積為 20μL。
4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應(yīng)。
5. 70℃保溫 0 分鐘以終止反應(yīng),然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為 PCR 模板使用,丌需要純化。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 5-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至0kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.~umol或0~00pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。?(S)--N-Boc-2-基哌 00mL Bis-Tris Propane,0.2M,pH8.0 常溫保存
BOC-N-基-L-丙氨 00mL Bis-Tris Propane,0.2M,pH8.5 常溫保存
硼氫化鋰 00mL Bis-Tris Propane,0.2M,pH9.0 常溫保存
鄰硝苯?!?00mL Bis-Tris Transfer Buffer 常溫保存
代草氨乙酯 250mL Blocking Reagent with Triton X-00 & Fetal Calf Serum 常溫保存
(R)--N-Boc-2-基哌 250mL Blocking Reagent with Triton X-00 & Sheep Serum 常溫保存
3,6-二氯啶羧 500mL Blotto in PBS 常溫保存
D-二苯甲酰酒石 500mL Blotto in PBS with azide 常溫保存
3-氟-4-基 500mL Blotto in TBS 常溫保存
2,5-二氫呋喃 500mL Blotto in TBS with azide 常溫保存
特戊酰基乙乙酯 500mL Blotto-Antifoam in PBS 常溫保存
間基甲?!?00mL Blotto-Antifoam in PBS with azide 常溫保存
間氟苯甲酰 500mL Blotto-Antifoam in TBS 常溫保存
4-乙氧基-,,-三氟-3-丁烯-2 500mL Blotto-Antifoam in TBS with azide 常溫保存
N-芐基 500mL Blotto-Tween in PBS 常溫保存
新疆出血熱病毒(XHFV)核酸檢測試劑盒供應(yīng)商LBP(lipolysaccharide binding protein) 人脂多糖結(jié)合蛋白 CAS: 747-77-5 規(guī)格: 50mg
GSH-Px(Glutathione peroxidase) 人過氧化酶 CAS: 80-08-0 規(guī)格: 25mg
GSH(glutathione) 人 CAS: 2354-50-6 規(guī)格: 200mg
7-KS(7-ketosteroids) 人7-酮類固醇 CAS: 54-22-0 規(guī)格: 250mg
7-OHCS(7-Hydroxycorticosteroids) 人7羥皮質(zhì)類固醇 CAS: 8507-89-6 規(guī)格: 200mg
cath-K(Cathepsin K) 人組織蛋白酶K CAS: 38-4-7 規(guī)格: 500mg
BMPs(bone morphogenetic proteins) 人骨形成蛋白 CAS: 520-45-6 規(guī)格: 200mg
RBP-4(Retinol binding protein 4) 人結(jié)合蛋白4 CAS: 規(guī)格: 00mg
PLP(proteolipid protein) 人蛋白脂質(zhì)蛋白抗體 CAS: 8-23-2 規(guī)格: 200mg
VMA(vanillylmandelic acid) 人垂草扁桃 CAS: 56-94-0 規(guī)格: 250mg
GKRP(glucokinase regulatory protein) 人葡萄糖激酶調(diào)節(jié)蛋白 CAS: 64-73-3 規(guī)格: 200mg
HA(hemagglutinin) 人血凝素 CAS: 86398-53-0 規(guī)格: 200mg
ADRP(adipose differentiation-related protein) 人脂肪分化相關(guān)蛋白 CAS: 264624-38-6 規(guī)格: 20mg
CALD(Caldesmon) 人鈣調(diào)結(jié)合蛋白 CAS: 54-7-6 規(guī)格: 00mg
CaN(calcineurin) 人鈣調(diào)磷酶 CAS: 2355-45-9 規(guī)格: 50mg
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)*,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
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