您好, 歡迎來到環(huán)保在線! 登錄| 免費(fèi)注冊(cè)| 產(chǎn)品展廳| 收藏商鋪|
行業(yè)產(chǎn)品
當(dāng)前位置:南京生物試劑網(wǎng)>>技術(shù)文章>>森貝伽教你如何消除組織培養(yǎng)的污染
當(dāng)重要的培養(yǎng)細(xì)胞污染時(shí),研究者可能試圖消除或控制污染。
首先,確定污染物是細(xì)菌、真菌、支原體或酵母,把污染細(xì)胞與其它細(xì)胞系隔離開,用實(shí)驗(yàn)室消毒劑消毒培養(yǎng)器皿和超凈臺(tái),檢查 HEPA過濾器。高濃度的抗生素和抗霉菌素可能對(duì)一些細(xì)胞系有毒性,因而,做劑量反應(yīng)實(shí)驗(yàn)確定抗生素和抗霉菌素產(chǎn)生毒性的劑量水平。這點(diǎn)在使用抗生素如兩性霉素 B 和抗霉菌素如泰樂菌素時(shí)尤其重要。
下面是推薦的確定毒性水平和消除培養(yǎng)污染的實(shí)驗(yàn)步驟。
(1)在無抗生素的培養(yǎng)基中消化、計(jì)數(shù)和稀釋細(xì)胞,稀釋到常規(guī)細(xì)胞傳代的濃度。
(2)分散細(xì)胞懸液到多孔培養(yǎng)板中,或幾個(gè)小培養(yǎng)瓶中。在一個(gè)濃度梯度范圍內(nèi),把選擇抗生素
加入到每一個(gè)孔中。例如,兩性霉素 B 推薦下列濃度,0.25,0.50,1.0,2.0,4.0,8.0mg/ml。
(3)每天觀測(cè)細(xì)胞毒性指標(biāo),如脫落,出現(xiàn)空泡,匯合度下降和變圓。
(4)確定抗生素毒性水平后,使用低于毒性濃度 2-3 倍濃度的抗生素的培養(yǎng)液培養(yǎng)細(xì)胞 2-3 代。
(5)在無抗生素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)細(xì)胞一代。
(6)重復(fù)步驟 4。
(7)在無抗生素的培養(yǎng)基中培養(yǎng) 4-6 代,確定污染是否以已被消除。
請(qǐng)輸入賬號(hào)
請(qǐng)輸入密碼
請(qǐng)輸驗(yàn)證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé),環(huán)保在線對(duì)此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風(fēng)險(xiǎn),建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。