好看日韩在线视频免费,日本不卡一区二区三区,三级a全过程在线观看,亚洲精品国产9999久久久久

技術(shù)中心

您現(xiàn)在的位置:環(huán)保在線 > 技術(shù)首頁 > 產(chǎn)品資料

大鼠糖原磷酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA試劑盒說明書

2010年06月10日 16:13:37人氣:334來源:廈門慧嘉生物科技有限公司

 

大鼠糖原磷酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA試劑盒說明書
本試劑盒僅供研究使用                                       
預(yù)期應(yīng)用
ELISA法定量測定大鼠血清、血漿或其它相關(guān)液體中GP-II含量。
實驗原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心酶標(biāo)免疫分析法測定標(biāo)本中GP-II水平。用純化的抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入GP-II抗原、*化的抗大鼠GP-II抗體、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的GP-II呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
試劑盒組成及試劑配制
1.         酶聯(lián)板:一塊(96孔)
2.         標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為1000 U/mL,做系列倍比稀釋后,分別稀釋成1000 U/mL,500 U/mL ,250 U/mL,125 U/mL,62.5 U/mL,31.2 U/mL,15.6 U/mL,其原液直接作為zui高標(biāo)準(zhǔn)濃度,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 U/mL,臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制500 U/mL標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml 1000 U/mL的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3.         樣品稀釋液:1×20ml/瓶。
4.         檢測稀釋液A:1×10ml/瓶。
5.         檢測稀釋液B:1×10ml/瓶。
6.         檢測溶液A:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計算好的每次實驗所需的總量配制(每孔100ul),實際配制時應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如1ul檢測溶液A加99ul檢測稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制。
7.         檢測溶液B:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液B1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。
8.         底物溶液:1×10ml/瓶。
9.         洗滌液:1×30ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10.     終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
標(biāo)本的采集及保存
1.血清:標(biāo)本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)?biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注:標(biāo)本溶血會影響zui后檢測結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項檢測。
操作步驟
各試劑在使用前平衡至室溫。實驗開始前,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭噭┗驑悠废♂寱r,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時,應(yīng)在試管中將樣品用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1.         加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00ul,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100ul,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2.         棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100ul(取1ul檢測溶液A加99ul檢測稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3.         溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350ul/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4.         每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100ul,37℃,60分鐘。
5.         溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350ul/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6.         依序每孔加底物溶液90ul,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi))(此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯)。
7.         依序每孔加終止溶液50ul,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8.         用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測。
 
1. 每次實驗留一孔作為空白調(diào)零孔,該孔不加任何試劑,只是zui后加底物溶液及2NH2SO4。測量時先用此孔調(diào)OD值至零。
2.為防止樣品蒸發(fā),試驗時將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標(biāo)板加上蓋或覆膜。
3. 未使用完的酶標(biāo)板或者試劑,請于2-8保存。標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據(jù)所需的量配置使用,不要一次用完。請勿重復(fù)使用已稀釋過的標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。
4. 建議檢測樣品時均設(shè)雙孔測定,以保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。
 
洗板方法
手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實驗臺上鋪墊幾層
紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘,根據(jù)需
要,重復(fù)此過程數(shù)次。
自動洗板:如果有自動洗板機,應(yīng)在熟練使用后再用到正式實驗過程中。
 
特異性
    本試劑盒可同時檢測重組或天然的大鼠GP-II,且與其它相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)。
計算
  以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)(對數(shù)坐標(biāo)),OD值為縱坐標(biāo)(普通坐標(biāo)),在半對數(shù)坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。
注意事項
1. 洗滌過程非常重要,不充分的洗滌易造成假陽性。
2. 一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
3. 請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。
4. 如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請zui后乘以稀釋倍數(shù)。
5.在配制標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液工作液時,請以相應(yīng)的稀釋液配制,不能混淆。
6.底物請避光保存。
檢測范圍:
15.6 U/mL -1000 U/mL
說明
1.試劑盒保存:-20℃(較長時間不用時);2-8℃(頻繁使用時)。
2.有效期:6個月
3.濃洗滌液會有鹽析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶。
4.剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會含有少許水樣物質(zhì),此為正?,F(xiàn)象,不會對實驗結(jié)果造成任何影響。
 
廈門慧嘉生物科技有限公司專業(yè)代理眾多生命科學(xué)領(lǐng)域的。致力于各種ELISA試劑盒、免疫組化試劑盒、一抗二抗、細(xì)胞因子、生物試劑、移液器、耗材的銷售推廣及服務(wù)工作。
:      
 
全年征稿/資訊合作 聯(lián)系郵箱:hbzhan@vip.qq.com
版權(quán)與免責(zé)聲明
1、凡本網(wǎng)注明"來源:環(huán)保在線"的所有作品,版權(quán)均屬于環(huán)保在線,轉(zhuǎn)載請必須注明環(huán)保在線,http://www.niunang.cn。違反者本網(wǎng)將追究相關(guān)法律責(zé)任。
2、企業(yè)發(fā)布的公司新聞、技術(shù)文章、資料下載等內(nèi)容,如涉及侵權(quán)、違規(guī)遭投訴的,一律由發(fā)布企業(yè)自行承擔(dān)責(zé)任,本網(wǎng)有權(quán)刪除內(nèi)容并追溯責(zé)任。
3、本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其它來源的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點或證實其內(nèi)容的真實性,不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時,必須保留本網(wǎng)注明的作品來源,并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
4、如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題,請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。

廈門慧嘉生物科技有限公司作者

我要投稿
  • 投稿請發(fā)送郵件至:(郵件標(biāo)題請備注“投稿”)hbzhan@vip.qq.com
  • 聯(lián)系電話0571-87759680
環(huán)保行業(yè)“互聯(lián)網(wǎng)+”服務(wù)平臺
環(huán)保在線APP

功能豐富 實時交流

環(huán)保在線小程序

訂閱獲取更多服務(wù)

微信公眾號

關(guān)注我們

抖音

環(huán)保在線網(wǎng)

抖音號:hbzhan

打開抖音 搜索頁掃一掃

視頻號

環(huán)保在線

公眾號:環(huán)保在線

打開微信掃碼關(guān)注視頻號

快手

環(huán)保在線

快手ID:2537047074

打開快手 掃一掃關(guān)注
意見反饋
五月婷婷免费观看视频-男人操女人下面视频在线免费看| mm在线精品视频在线观看-欧美国产日韩在线一区二区三区| 亚洲国产视频不卡一区-激情欧美视频一区二区| 日本高清二区视频久二区-大香蕉在线视频大香蕉在线视频| 欧美成人精品巨臀大屁股-亚洲综合欧美日韩一区| 97人妻精品一区二区三区爱与-日韩精品亚洲专区在线观看| 久久99热这里都是精品啊-国产成人亚洲精品无码aV| 欧美日韩黑人在线播放-51在线精品免费视频观看| 欧美亚洲另类久久久精品-国产精品一区二区亚洲推荐| 国产美女网站在线观看-国产精品亚洲综合网69| 久久99国产综合精品女人-日韩一区二区三区在线不卡| av噜噜国产在线观看-欧美视频亚洲视频一区二区三区| av一区免费在线观看-中文字幕日韩国产精品视频| 激情字幕久久久字幕中文-一区二区三区免费黄片| 青木玲高清中文字幕在线看-视频在线免费观看你懂的| 狠狠狠狠爱精品一二三四区-l舌熟女av国产精品| 天天干天天天天天天天-亚洲综合av在线三区| 国产午夜精品理论片A级漫画-久久精品国产99亚洲精品| 极品人妻av在线播放-久久精品视频一区二区三区| 日韩高清在线观看一区二区-美产av在线免费观看| 黄片一区二区三区在线看-偷拍一区二区在线观看| 国产在线不卡高清一区-日本一区二区三区四区无卡| 青青操大香蕉在线播放-国产亚洲欧美精品在线观看| 欧美亚洲另类久久久精品-国产精品一区二区亚洲推荐| 国产精品久久久精品一区-99久久免费精品国产男女性高好| 久久亚州天堂一区二区-色噜噜色哟哟一区二区三区| 国产福利视频一区二区三区-日韩人妻中文视频精品| 中文字幕亚洲综合久久最新-久久精品视频免费久久久| 深夜三级福利在线播放-日韩精品一区二区在线天天狠天| 夜夜久久国产精品亚州av-欧美大屁股一区二区三区| 国产精品中出久久久蜜臀-久久久中国精品视频久久久| 国产精品电影在线一区-亚洲国产大片一区二区官网| 少妇一区二区三区粉嫩av-国产精品区久久久久久久| 久久精品人妻一区二区三区极品-久久99热这里只有精品免费| 国产黄污网站在线观看-成人av电影中文字幕| 国产精品成人欧美激情-黄色床上完整版高清无遮挡| 五月婷婷六月在线观看视频-亚洲黑寡妇黄色一级片| 蜜臀一区二区三区精品在线-99久久久精品免费看国产| 天天干天天日天天射天天舔-精品香蕉视频官网在线观看| 国产欧美日韩精品一区在线-久久精品视频免费获取地址| 可以免费看污污视频的网站-日韩欧美不卡视频在线观看|