上海酶聯(lián)生物研究所作者
的形成,常用0.85%氯化鈉或各種緩沖液作為抗原及抗體的稀釋液。由于氯化鈉在水溶液中解離成Na+和C1-,可分別中和膠體粒子上的電荷,使膠體粒子的電勢下降。當電勢降至臨界電勢(12~15mV)以下時,則能促使抗原抗體復合物從溶液中析出,形成可見的沉淀物或凝集物。影響抗原抗體反應的因素主要有以下兩點,另外,適當振蕩也可促進抗原抗體分子的接觸,加速反應。
(一)溫度
在一定范圍內(nèi),溫度升高可加速分子運動,抗原與抗體碰撞機會增多,使反應加速。但若溫度高于56℃時,可導致已結(jié)合的抗原抗體再解離,甚至變性或破壞;在40℃時,結(jié)合速度慢,但結(jié)合牢固,更易于觀察。常用的抗原抗體反應溫度為37℃。每種試驗都有其*的zui適反應溫度,例如冷凝集素在4左右與紅細胞結(jié)合,20℃以上反而解離。
(二)酸堿度
抗原抗體反應必須在合適的pH環(huán)境中進行。蛋白質(zhì)具有兩性電離性質(zhì),因此每種蛋白質(zhì)都有固定的等電點??乖贵w反應一般在pH為6~8進行。PH過高或過低都將影響抗原與抗體的理化性質(zhì),例如pH達到或接近抗原的等電點時,即使無相應抗體存在,也會引起顆粒性抗原非特異性的凝集,造成假陽性反應。
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