南京科捷檢測(cè)科技發(fā)展有限公司作者
糧食中麥角甾醇含量正相液相色譜法檢測(cè)
糧食在生產(chǎn)或儲(chǔ)藏過(guò)程中,可能會(huì)受到真菌的侵染;隨著真菌侵染程度的加深,糧食將逐步發(fā)生霉變。霉變的食物不僅品質(zhì)劣變,風(fēng)味喪失,失去應(yīng)有的價(jià)值。而且容易產(chǎn)生各種各樣的毒素,如AFT、嘔吐毒素、玉米赤霉烯酮、T2毒素、煙曲霉毒素、赭曲霉毒素。這些毒素被人或動(dòng)物食用后將產(chǎn)生嚴(yán)重的危害,如AFT可造成動(dòng)物的肝臟損傷,有致癌活性,嚴(yán)重時(shí)可急性致死;玉米赤霉烯酮可造成動(dòng)物的性早熟而生育能力下降;煙曲霉毒素可導(dǎo)致馬不能正常入睡和原地轉(zhuǎn)圈;赭曲霉毒素造成動(dòng)物不進(jìn)食和進(jìn)食后發(fā)生嘔吐,即使是微量的毒素也可使動(dòng)物的免疫機(jī)制收到抑制。因此,真菌毒素的產(chǎn)生,不僅會(huì)嚴(yán)重影響食物安全,還會(huì)造成生物成本的增加。準(zhǔn)確的知道糧食、食品和飼料是否收到真菌的侵染及侵染是否嚴(yán)重到霉變的程度,可以預(yù)測(cè)糧食、食品和飼料中存在毒素的風(fēng)險(xiǎn)程度,對(duì)準(zhǔn)確評(píng)價(jià)這些糧食、食品和飼料的使用或飼用安全程度有著十分重要的意義。
糧食、食品、飼料受真菌侵染的程度的定量分析通常采用微生物技術(shù)如平板計(jì)數(shù)法及侵染率(種子表明受到真菌侵染的百分比)。這些方法費(fèi)時(shí),重現(xiàn)性差。平板計(jì)數(shù)法zui大的缺陷在于僅反映能生長(zhǎng)的霉菌孢子的數(shù)量,而無(wú)法評(píng)價(jià)無(wú)孢子形成的菌絲體的數(shù)量。侵染率又難以找到平均樣品,不能滿足快速檢測(cè)的需要。
為避免這些缺陷,人們建立化學(xué)分析方法;這些方法從霉菌的化學(xué)組成入手,如幾丁質(zhì)含量分析和麥角淄醇含量分析。
幾丁質(zhì)是真菌細(xì)胞壁的組成成分,化學(xué)成分為N-乙烯基-D-葡萄糖胺的聚合物, 廣泛存在于真菌菌絲體和真菌孢子之中,也存在于昆蟲(chóng)外骨骼中,因此專一性較差。幾丁質(zhì)可以通過(guò)酸、堿或酶水解后用比色法分析,分析方法的缺陷是檢測(cè)靈敏度低,受雜質(zhì)的干擾,重現(xiàn)性差;幾丁質(zhì)也可以用氨基酸分析儀分析,但設(shè)備昂貴。
麥角甾醇是真菌細(xì)胞膜的組成成分,對(duì)真菌細(xì)胞膜和其他細(xì)胞成分的形成起著重要的作用。麥角甾醇也可以被某些細(xì)菌合成,但相對(duì)于真菌來(lái)說(shuō),數(shù)量甚微。植物甾醇主要為β-谷甾醇、豆甾醇及*?;某些禾木科植物含有低濃度的*;由于植物不能合成麥角甾醇或僅有痕量的麥角甾醇形成,因此,麥角甾醇可以作為真菌的*成分進(jìn)行分析,其含量的多少反映了糧食受真菌侵染的程度,間接反映糧食的品質(zhì)狀況;又由于麥角甾醇檢測(cè)靈敏度高,檢測(cè)快捷、簡(jiǎn)單,結(jié)果準(zhǔn)確,其含量多少可以作為糧食食用安全的敏感指標(biāo)之一,如利用麥角甾醇的含量多少來(lái)評(píng)價(jià)糧食就倉(cāng)干燥工藝的安全性。
麥角甾醇的分析方法有比色法,氣相色譜法,紅外光譜法,紫外光譜法及液相色譜法。由于液相色譜法的快速、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好而被各國(guó)專家普遍采用;如澳大利亞的喬治教授采用固相萃取技術(shù)及液相色譜分離技術(shù)檢測(cè)麥角甾醇的含量,以控制就倉(cāng)干燥的工藝??紤]到我嗎、國(guó)的國(guó)情,要將麥角甾醇的檢測(cè)技術(shù)在我國(guó)推廣應(yīng)用,必須具備檢測(cè)成本低,檢測(cè)快速,結(jié)果準(zhǔn)確,方法通用性強(qiáng)等特點(diǎn);因此,我們參照AOAC的麥角甾醇的檢測(cè)技術(shù)及其它資料介紹的甾族化合物檢測(cè)技術(shù),經(jīng)比較研究之后,建立了一種快速、簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確、通用的麥角甾醇的檢測(cè)方法。
儀器準(zhǔn)備
儀器簡(jiǎn)介
LC-600A智能全控液相色譜系統(tǒng)由P600高壓恒流泵與UV600紫外檢測(cè)器直接構(gòu)成等度分析系統(tǒng)。使用WS600工作站可以同時(shí)控制數(shù)臺(tái)P600高壓恒流泵、UV600紫外檢測(cè)器及恒溫柱箱等,實(shí)行多元高壓洗脫、波長(zhǎng)掃描等功能。
應(yīng)用領(lǐng)域
化合物檢測(cè)、法醫(yī)毒物分析、蛋白質(zhì)組學(xué)食品檢測(cè)、藥物分析、環(huán)境分析、聚合物分析
色譜條件:
流動(dòng)相 | 正己烷/異丙醇=99/1(V/V),2.0mL/min |
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檢測(cè)波長(zhǎng) | 282nm,0.1000AUFS |
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測(cè)定結(jié)果:
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