液相色譜法又稱作高壓液相色譜法（High Performance Liquid Chromatography），是在經(jīng)典液相色譜法的基礎(chǔ)上，隨著現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的發(fā)展而發(fā)展起來(lái)的一種高壓、、高速、高靈敏度的現(xiàn)代化分離方法。由于分離機(jī)制的不同，可分為以下幾種類型：液固色譜、液液色譜、離子交換色譜、離子對(duì)色譜、親和色譜、電色譜等。由于其在氣相色譜法的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的，不僅具有氣相色譜的一般優(yōu)點(diǎn)，還有其自身所*的特點(diǎn)，因此所適用的范圍廣。世界上約有80%的有機(jī)化合物可以用HPLC來(lái)分析測(cè)定。近幾年，液相色譜法現(xiàn)在已經(jīng)廣泛應(yīng)用于天然產(chǎn)物、化工、醫(yī)藥、生化、環(huán)保、農(nóng)業(yè)、食品等科學(xué)領(lǐng)域，特別是天然產(chǎn)物的分析和分離。

一、萜類化合物的分析和分離  

    萜類化合物是廣泛存在于植物和動(dòng)物體內(nèi)的天然有機(jī)化合物。如從植物中提取的香精油——薄荷油、*等，植物及動(dòng)物體中的某些色素——胡籮卜素、蝦紅素等等。隨著對(duì)萜類化合物的深入研究和不斷的開發(fā)利用，其分析方法近年來(lái)也在得到快速發(fā)展，液相色譜也廣泛應(yīng)用于萜類化合 物的研究。李赫等采用DiamonsilTM C18色譜柱(250 mm ×416 mm i1d1, 5 µm ) ,以乙腈和乙酸乙酯為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫，采用二極管陣列檢測(cè)器檢測(cè)，檢測(cè)波長(zhǎng)為450 nm，在以上的條件下，建立了不同劑型保健品中類胡蘿卜素的提取方法和同時(shí)測(cè)定保健品中4種類胡蘿卜素含量的液相色譜分析方法。該法簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確，是保健品中多種類胡蘿卜素定量測(cè)定的可靠方法之一。

二、生物堿類化合物的分析和分離     
    生物堿類是存在于生物體（主要為植物）中的一類含氮的堿性有機(jī)化合物，大多數(shù)有復(fù)雜的環(huán)狀結(jié)構(gòu)，氮素多包含在環(huán)內(nèi)，有顯著的生物活性，是中草藥中重要的有效成分之一。在現(xiàn)代的分析手段中，液相法是分析和分離生物堿類化合物的主要手段之一。陳燕方等人選擇十八烷基鍵合相色譜柱，以甲醇-水-氯f(wàn)ang-三乙胺混合溶液為流動(dòng)相，用液相色譜法測(cè)定了一種植物性農(nóng)yao——0.25 %烏頭總堿乳油中的烏頭生物堿。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明中烏tou堿、烏you堿及次烏tou堿與其他雜質(zhì)能夠得到很好的分離。以安宮黃ti酮作內(nèi)標(biāo)物，用峰面積比測(cè)定各生物堿含量，在其線性范圍內(nèi)分析結(jié)果準(zhǔn)確，回收率高( > 92 %) ，重現(xiàn)性好(RSD < 3.2 %) 。

三、黃酮類化合物的分析和分離       
    黃酮類化合物是天然產(chǎn)物中非常重要的化合物，迄今為止從天然產(chǎn)物中發(fā)現(xiàn)了大量的黃酮類化合物，其中大多數(shù)具有顯著的生理藥理活性，在醫(yī)藥上已有廣泛的應(yīng)用。此外黃酮類化合物也是重要的食品添加劑、天然抗氧化劑、天然色素天然甜味劑等 [1、10] 。伴隨著黃酮類化合物的廣泛研究，其分析和分離手段也得到了大大的改進(jìn)，液相色譜法也廣泛的應(yīng)用于分析和分離黃酮類化合物。

四、香dou素類化合物的分析和分離 

    香dou素又稱香豆精，為順式鄰羥基桂皮酸的內(nèi)酯，具特異香氣，以游離狀態(tài)及其苷類存在于生物體內(nèi)。金米聰?shù)仍谌獦悠方?jīng)乙酸乙酯提取后，在XDB C18柱(150 mm ×211 mm , 5µm )上以甲醇-0.2%乙酸水溶液(體積比為88∶12)混合液為流動(dòng)相，采用熒光變波長(zhǎng)程序檢測(cè)，同時(shí)通過(guò)建立各殺鼠劑的熒光光譜庫(kù)，利用譜庫(kù)檢索，提高定性的準(zhǔn)確度。各殺鼠劑的線性范圍為0.01～10.00 mg /L (*為0.05～10.00 mg /L )，檢出限為0.01～0.05 mg /L，方法的加標(biāo)回收率為81%～98%，其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD )為3.8%～8.5%。建立了同時(shí)測(cè)定全血中*、殺鼠mi、*、氟鼠靈與溴shu靈等5種香dou素類殺鼠劑的簡(jiǎn)便、靈敏、準(zhǔn)確的液相色譜-變波長(zhǎng)熒光分析方法。該法適用于中毒病人的中毒診斷檢測(cè)。

五、皂苷類化合物的分析和分離     

    目前已知的人參皂苷類成分有30多種。到現(xiàn)在為止，許多研究人參皂苷的研究人員基于不同物質(zhì)建立了許多方法，而現(xiàn)在比較常用的方法是液相色譜法。潘堅(jiān)揚(yáng)等采用Agilent Zorbax SB-C18柱，以乙腈-水-0.05%磷酸為流動(dòng)相，流速1.5 ml/min，柱溫35℃，檢測(cè)波長(zhǎng)203 nm。在此色譜條件下，建立可同時(shí)測(cè)定人參皂苷Rg1、Re、Rf、Rg2、Rb1、Rc、Rb2、Rb3 和Rd含量的反相液相色譜(RP-HPLC)方法。各組分在60 min內(nèi)均得到較好分離，回收率符合含量測(cè)定要求。

六、醌類化合物的分析和分離 

    醌類化合物是許多中草藥中具有多種生物活性的有效成分，包括苯醌、萘醌、菲醌和蒽醌。其中蒽醌及其衍生物的種類、含量較多，在自然界植物中分布很廣。馬志剛等采用Waters Spherisorb ODS2(5µm ,Φ4. 6mm ×250mm)色譜柱；以體積比為85∶15的甲醇- 0.1%磷酸溶液為流動(dòng)相；流速為1.5 ml/ min ；柱溫為40℃；檢測(cè)波長(zhǎng)為430nm的色譜條件下，建立1個(gè)同時(shí)在10min內(nèi)有效的分離和測(cè)定大黃及其制劑中的蘆薈大黃素、大黃酸和大黃素含量的反相液相色譜法。此方法簡(jiǎn)便、快速、靈敏、線性范圍寬，可用于大黃及其制劑中蘆薈大黃素、大黃酸和大黃素的定量測(cè)定。

七、甾類化合物的分析和分離 

    隨著人類對(duì)甾類化合物生理機(jī)能的認(rèn)識(shí)，該類化合物的研究和應(yīng)用受到了生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、化學(xué)等眾學(xué)科的關(guān)注。有關(guān)甾類化合物的多種分析方法，如紫外分光光度法、熒光法、HPLC、放射免疫法、差分脈沖極譜法等已見報(bào)道。本文列舉一些液相色譜法在甾類化合物的分析和分離例子。閆素君等從星骨海綿Sletta tenuis Lindgren中分離及鑒定的甾類化合物。其中甾酮3β-羥基-豆甾-5-烯-7-酮、3β-羥基-膽甾-5-烯-7-酮是第1次從該種海綿中由液相色譜分離得到，根據(jù)IR、MS、NMR、2D-NMR等波譜數(shù)據(jù)確定其結(jié)構(gòu)。

    液相色譜法是現(xiàn)代分析化學(xué)中zui重要的分離方法之一。液相色譜法吸取了氣相色譜和經(jīng)典液相色譜的優(yōu)點(diǎn)，而且具有、高速的優(yōu)點(diǎn)，靈敏度高、樣品用量少，并用現(xiàn)代化的手段加以改進(jìn)，因此得到了迅猛的發(fā)展。20多年來(lái)，隨著HPLC技術(shù)的不斷進(jìn)步和完善，它在生化、藥檢、石油化工、環(huán)境監(jiān)測(cè)、合成化學(xué)、食品衛(wèi)生等領(lǐng)域的應(yīng)用越來(lái)越廣泛，并且是天然產(chǎn)物研究領(lǐng)域中起至關(guān)重要的一種研究手段。近年隨著天然產(chǎn)物研究的深入下去，液相色譜法將有更廣泛的應(yīng)用前景。

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