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液相色譜柱使用的3個注意事項(xiàng)

2018年08月27日 16:12:57人氣:2029來源:南京科捷檢測科技發(fā)展有限公司

  液相色譜是一類分離與分析技術(shù),其特點(diǎn)是以液體作為流動相,固定相可以有多種形式,如紙、薄板和填充床等。在色譜技術(shù)發(fā)展的過程中.為了區(qū)分各種方法,根據(jù)固定相的形式產(chǎn)生了各自的命名,如紙色譜、薄層色譜和柱液相色譜。
   經(jīng)典液相色譜的流動相是依靠重力緩慢地流過色譜柱,因此固定相的粒度不可能太小(100μm~150μm左右)。分離后的樣品是被分級收集后再進(jìn)行分析的,使得經(jīng)典液相色譜不僅分離效率低、分析速度慢,而且操作也比較復(fù)雜。直到20世紀(jì)60年代.發(fā)展出粒度小于10μm的固定相,并使用了高壓*和自動記錄的檢測器,克服了經(jīng)典液相色譜的缺點(diǎn),發(fā)展成液相色譜,也稱為高壓液相色譜。

1.色譜柱的安裝
色譜柱在使用過程中避免強(qiáng)烈的碰撞和震動。各個廠家生產(chǎn)的色譜柱在接口尺寸上有差異,如果柱頭類型和不銹鋼毛細(xì)管接頭兩者類型不匹配,將會產(chǎn)生漏液或者死體積過大的現(xiàn)象。接頭比柱頭深度長,不易擰緊而漏液;接頭比柱頭深度短,柱頭內(nèi)留有空隙而產(chǎn)生死體積,使譜帶展寬和峰拖尾。


2.色譜柱的平衡
色譜柱平衡指的是用完整的分析程序,運(yùn)行幾遍測試,等觀察到峰形、保留時間和峰面積穩(wěn)定為止,平衡即完成。另外,在使用緩沖鹽時,應(yīng)該先使用水過渡后,再將緩沖鹽引入色譜柱,以防止鹽析發(fā)生,從而損壞色譜柱。


3.色譜柱的保存
hao遵守色譜柱說明書中的保持方式。在實(shí)際應(yīng)用中為了方便也可以如下使用:短期保持用所用的流動相保存為佳,這樣做可以減少下次使用的平衡時間。一般情況下,建議長期用80%甲醇或乙腈來保存反相柱。純有機(jī)相保持有大限度減少鍵合相水解的作用,但純甲醇(乙腈)又會將已水解而暫時吸附在柱內(nèi)的鍵合相洗脫出去,使固定相流失進(jìn)程加快,縮短壽命;另外,純有機(jī)相保存時,溶劑易揮發(fā),導(dǎo)致柱床變干,也會容易損壞色譜柱。正相柱一般應(yīng)保持在所用流動相中。

關(guān)鍵詞:色譜柱
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