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常用的伊紅美藍乳糖培養(yǎng)基,可用來鑒別飲用水和乳制品中是否存在大腸桿菌等細菌。如果有大腸桿菌,因其強烈分解乳糖而產生大量的混合酸,菌體帶H+,故菌落被染成深紫色,從菌落表面的反射光中還可以看到金屬光澤。
伊紅為酸性染料,美藍為堿性染料。 當大腸桿菌分解乳糖產酸時細菌帶正電荷被染成紅色,再與美藍結合形成紫黑色菌落,并帶有綠色金屬光澤。而產氣桿菌則形成呈棕色的大菌落。在堿性環(huán)境中不分解乳糖產酸的細菌不著色,伊紅和美藍不能結合,故沙門氏菌等為無色或琥珀色半透明菌落。金葡菌在此培養(yǎng)基上不生長。
伊紅美藍培養(yǎng)基配置方法如下:
1、材料:蛋白胨 10g ;* 2g ;瓊脂 20~30g ;蒸餾水 1000ml ;2%伊紅水溶液 20ml ;0.5 %美藍水溶液 13ml 。
2、儲備培養(yǎng)基的制備:先將瓊脂加至900ml蒸餾水,加熱溶解,然后加入*及蛋白胨,混勻使之溶解,再以蒸餾水補足至1000ml,調整PH為7.2~7.4。趁熱用脫脂棉或絨布過濾,再加入乳糖,混勻后定量分裝于燒瓶內,置高壓蒸汽滅菌器內以115℃滅菌20min,貯存于冷暗處備用。
3、制法:將蛋白胨、磷酸鹽和瓊脂溶解于蒸餾水中,校正PH,分裝于燒瓶內,121℃高壓滅菌15min備用。臨用時加入乳糖并加熱溶化瓊脂,冷至50~55℃,加入伊紅和美藍溶液,搖勻,傾注平板。
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