1.30%丙烯酰胺溶液

 

【配制方法】將29g丙烯酰胺和1g N，N’-亞甲雙丙烯酰胺溶于總體積為60ml的水中。加熱至37℃溶解之，補(bǔ)加水至終體積為100ml。用Nalgene濾器（0.45μm孔徑）過濾除菌，查證該溶液的pH值應(yīng)不大于7.0，置棕色瓶中保存于室溫。

 

【注意】丙烯酰胺具有很強(qiáng)的神經(jīng)毒性并可以通過皮膚吸收，其作用具累積性。稱量丙烯酰胺和亞甲雙丙烯酰胺時應(yīng)戴手套和面具?？烧J(rèn)為聚丙烯酰胺無毒，但也應(yīng)謹(jǐn)慎操作，因?yàn)樗€可能會含有少量未聚合材料。一些價格較低的丙烯酰胺和雙丙烯酰胺通常含有一些金屬離子，在丙烯酰胺貯存液中加入大約0.2體積的單床混合樹脂（MB-1Mallinckrodt），攪拌過夜，然后用Whatman 1號濾紙過濾以純化之。在貯存期間，丙烯酰胺和雙丙烯酰胺會緩慢轉(zhuǎn)化成丙烯酰和雙丙烯酸。

 

2.40%丙烯酰胺

 

【配制方法】把380g丙烯酰胺（DNA測序級）和20g N，N’-亞甲雙丙烯酰胺溶于總體積為600ml的蒸餾水中。繼續(xù)按上述配制30%丙烯酰胺溶液的方法處理，但加熱溶解后應(yīng)以蒸餾水補(bǔ)足至終體積為1L。

 

【注意】見上述配制30%丙烯酰胺的說明，40%丙烯酰胺溶液用于DNA序列測定。

 

3.*溶液

 

【配制方法】把20mg*溶解于4ml 100%乙醇中，1：10稀釋貯存液，用100%乙醇作空白對照讀取OD440值。*（分子量為1255）純品在水溶液中的摩爾消化系數(shù)為21，900，故而1mg/ml的*溶液在440nm處的吸光值為0.182，*的貯存液應(yīng)放在包有箔片的試管中，保存于-20℃。

 

【注意】*是致畸劑和致癌劑，配制該溶液時必須戴手套并在通風(fēng)櫥內(nèi)操作，而不能在開放在實(shí)驗(yàn)桌面上進(jìn)行，謹(jǐn)防吸入藥粉或讓其接觸到眼睛或皮膚。

 

藥廠提供的作治療用途的*制品常含有糖或鹽等添加劑。只要通過測量貯存液在440nm波長處的光吸收確定*的濃度，這類制品便可用于抑制自身引導(dǎo)作用。

 

4.0.1mol/L腺苷三磷酸（ATP）溶液

 

【配制方法】在0.8ml水中溶解60mg ATP,用0.1mol/L NaOH調(diào)至pH值至7.0，用蒸餾水定容1ml，分裝成小份保存于-70℃

 

5.10mol/L乙酸酰溶液

 

【配制方法】把770g乙酸酰溶解于800ml水中，加水定容至1L后過濾除菌。

 

6.10%過硫酸銨溶液

 

【配制方法】把1g過硫酸銨溶解于終量為10ml的水溶液中，該溶液可在4℃保存數(shù)周。

 

7.BCIP溶液

 

【配制方法】把0.5g的5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸二鈉鹽（BCIP）溶解于10ml 100%的二甲基甲酰胺中，保存于4℃

 

8.2×BES緩沖鹽溶液

 

【配制方法】用總體積90ml的蒸餾水溶解1.07g鹽溶液BES[N，N-雙（2-羥乙基）-2-氨基乙磺酸]、1.6g NaCl和0.027g Na2HPO4，室溫下用HCl調(diào)節(jié)　該溶液的pH值至6.96、然后加入蒸餾水定容至100ml，用0.22μm濾器過濾除菌，分裝成小份，保存于-20℃。

 

9.1mol/L CaCl2溶液

 

【配制方法】在200ml蒸餾水中溶解54g CaCl2?6H2O，用0.22μm濾器過濾除菌，分裝成10ml小份貯存于-20℃。

 

【注意】制備感受態(tài)細(xì)胞時，取出一小份解凍并用蒸餾水稀釋至100ml，用Nalgene濾器（0.45μm孔徑）過濾除菌，然后驟冷至0℃。

 

10.2.5mol/L CaCl2溶液

 

【配制方法】在20ml蒸餾水中溶解13.5g CaCl2?6H2O，用0.22μm濾器過濾除菌，分裝成1ml小份貯存于-20℃。

 

11.1mol/L二硫蘇糖醇（DTT）溶液

 

【配制方法】用20ml 0.01mol/L乙酸鈉溶液（pH5.2）溶解3.09g DTT，過濾除菌后分裝成1ml小份貯存于-20℃。

 

【注意】DTT或含有DTT的溶液不能進(jìn)行高壓處理。

 

12.脫氧核苷三磷酸（dNTP）溶液

 

【配制方法】把每一種dNTP溶解于水至濃度各為100mmol/L左右，用微量移液器吸取0.05mol/l Tris堿分別調(diào)節(jié)　每一dNTP溶液的pH值7.0（用pH試紙檢測），把中和后的每種dNTP溶液各取一份作適當(dāng)稀釋，在給出的波長下讀取光密度計(jì)算出每種dNTP的實(shí)際濃度，然后用水稀釋成終濃度為50mmol/L的dNTP，分裝成小份貯存于-70℃。

 

13.0.5mol/l EDTA（pH8.0）溶液

 

【配制方法】在800ml水中加入186.1g二水乙二胺四乙酸二鈉（EDTA-Na?2H2O），在磁力攪拌器上劇烈攪拌，用NaOH調(diào)節(jié)　溶液的pH值至8.0（約需20g NaOH顆粒）然后定容至1L，分裝后高壓滅菌備用。

 

【注意】EDTA二鈉鹽需加入NaOH將溶液的pH值調(diào)至接近8.0，才能*溶解。

 

14.溴化乙錠（10mg/ml溶液）

 

【配制方法】在100ml水中加入1g溴化乙錠，磁力攪拌數(shù)小時以確保其*溶解，然后用鋁箔包裹容器或轉(zhuǎn)移至棕色瓶中，保存于室溫。

 

【注意】小心：溴化乙錠是強(qiáng)誘變劑并有中度毒性，使用含有這種染料的溶液時務(wù)必戴上手套，稱量染料時要戴面罩。

 

15.2×HEPES緩沖鹽溶液

 

【配制方法】用總量為90ml的蒸餾水溶解1.6g NaCl、0.074g KCl、0.027g Na2PO4?2H2O、0.2g葡聚糖和1gHEPES，用0.5mol/l NaOH調(diào)節(jié)　pH值至7.05，再用蒸餾水定容至100ml。用0.22μm濾器過濾除菌，分裝成5ml小份，貯存于-20℃。