上海滬宇生物科技有限公司作者
一個基因文庫中應(yīng)包含的克隆數(shù)目與該生物的基因組的大小和被克隆 DNA片段的長度有關(guān)。原核生物的基因組較小,需要的克隆數(shù)也較少;真核生物的基因組較大,克隆數(shù)需相應(yīng)增加,才能包含所有的基因。此外,每一載體DNA中所允許插入的外源DNA片段的長度較大,則所需總克隆數(shù)越少;反之則所需數(shù)越多。如果一個基因文庫的總克隆數(shù)較少,則從中篩選基因雖然比較容易,但給以后的分析造成困難,因為片段的長度增加了。如果要使每一克隆中的 DNA片段縮短,就須增加克隆數(shù),所以在建立基因文庫前應(yīng)根據(jù)研究目的來確定 DNA片段的長度和克隆的數(shù)目。
L.克拉克和J.卡邦在1975年提出一個統(tǒng)計學(xué)的公式來計算某一基因文庫中所應(yīng)包含的克隆數(shù)目。在建立基因文庫時,任何一個DNA片段都是在隨機的基礎(chǔ)上被克隆的。
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