神經(jīng)生長因子

【資料簡介】

神經(jīng)生長因子

1. 定義 　　

神經(jīng)生長因子 nerve growth factor 略稱NGF。在將小鼠肉瘤180移植于3日齡雞胚體壁時，與移植片連接的脊髓感覺神經(jīng)節(jié)及交感神經(jīng)節(jié)增大20％—40％，基于比克爾（E.D ......1. 定義
　　神經(jīng)生長因子 nerve growth factor 略稱NGF。在將小鼠肉瘤180移植于3日齡雞胚體壁時，與移植片連接的脊髓感覺神經(jīng)節(jié)及交感神經(jīng)節(jié)增大20％—40％，基于比克爾（E.D.Bueker，1948）的這一發(fā)現(xiàn)，科恩（S.Cohen，1954）等從小鼠肉瘤180和37中成功地分離出具有同一活性的核蛋白質(zhì)，以后從蛇毒中分離出具有千倍活性（Cohen，R.Levi-Montalcini，1956）和從小鼠顎下腺分離出具有萬倍活性的蛋白質(zhì)（Cohen，1960），這種蛋白質(zhì)被稱為?？贫鞯日J為，其有效成分是分子量約為2.2萬的蛋白質(zhì)，由兩個亞單位構(gòu)成的二合體或多合體顯有活性。另一方面，瓦恩（S.Varon，1967）認為，活性成分是分子量約為14萬的蛋白質(zhì)，具有分子量約為3萬的α、β、γ三種亞單位，僅β表現(xiàn)有NGF活性。將精制的NGF注射于雞胚或初生小鼠，則發(fā)育中的感覺和交感神經(jīng)節(jié)細胞的有絲分裂頻率增高，細胞數(shù)增加，神經(jīng)節(jié)體積顯著增大。將兔的NGF抗血清注射于懷孕小鼠或初生小鼠等哺乳類，則生出來的幼體及實驗個體的交感神經(jīng)細胞出現(xiàn)選擇性的壞死（免疫去交感）。對于培養(yǎng)中的神經(jīng)節(jié)，其促進纖維生長和再生效果也是顯著的，例如對7日齡的雞胚分離的感覺神經(jīng)節(jié)的培養(yǎng)，若向培養(yǎng)液中加NGF（0.01毫克/毫升），則在24小時內(nèi)在神經(jīng)節(jié)周圍即可見到神經(jīng)纖維呈旺盛的放射狀伸長（暈圈效應(yīng)），這種現(xiàn)象可被用于鑒定NGF的效果。NGF含于馬、豬的顎下腺和小鼠肉瘤、小鼠胚胎及成體的交感神經(jīng)細胞、小鼠尿和唾液、雞胚的多種器官和一切哺乳類的血清中。
　?。∟GF）是神經(jīng)營養(yǎng)因子中zui早被發(fā)現(xiàn)，目前研究zui為透徹的，具有神經(jīng)元營養(yǎng)和促突起生長雙重生物學(xué)功能的一種神經(jīng)細胞生長調(diào)節(jié)因子，它對中樞及周圍神經(jīng)元的發(fā)育、分化、生長、再生和功能特性的表達均具有重要的調(diào)控作用。NGF包含α、β、γ三個亞單位，活性區(qū)是β亞單位， 由兩個118個氨基酸組成的單鏈通過非共價鍵結(jié)合而成的二聚體，與人體NGF的結(jié)構(gòu)具有高度的同源性，生物效應(yīng)也無明顯的種間特異性。
　　αNGF亞基 功能尚不清楚（紅色）
　　γ亞基 具有蛋白酶活性（綠 色）
　　β亞基 具有生物活性的NGF（藍色）
2．研究歷程
　　1953年 意大利科學(xué)家Levi-Montalcini發(fā)現(xiàn)了NGF。
　　1960年 美國科學(xué)家Cohen提取純化NGF，證明其生物活性。
　　1970年 Cohen證明NGF是個復(fù)合蛋白。
　　1984年 NGF的研究重點從周圍神經(jīng)系統(tǒng)拓展到中樞神經(jīng)系統(tǒng)，乃至非神經(jīng)系統(tǒng)。
　　1986年 Montalcini和Cohen因?qū)GF研究的杰出而榮獲諾貝爾生理醫(yī)學(xué)獎。
　　90年代 國內(nèi)外多家制藥公司和藥物研究機構(gòu)相繼開始進行NGF開發(fā)研究。
　　2001年 北京圣日醫(yī)藥科技發(fā)展有限公司*個獲得中國SDA頒發(fā)NGF新藥證書。
　　2002年 武漢海特生物制藥股份有限公司和北京圣日合作開始了NGF產(chǎn)業(yè)化進程。
　　2003年1月6日 世界上*個——金路捷在武漢海特上市。
3．NGF在機體中的分布
　　NGF在人體內(nèi)主要分布于腦、神經(jīng)節(jié)、虹膜、心臟、脾、胎盤等組織及成纖維細胞、平滑肌、骨骼肌、膠質(zhì)細胞、雪旺氏細胞等。
4．制備來源
　?。?）雄性小鼠頜下腺 ：與人類NGF有90%同源性
　?。?）牛精漿
　　（3）蛇毒
　?。?）豚鼠前列腺
5．理化特性
　?。?）7s NGF：分子量接近140kD，沉降系數(shù)為7s的復(fù)合物．它由α，β，γ三個亞單位和鋅離子構(gòu)成。其生物活性位于β亞單位。β亞單位是2條由118個氨基酸組成的單鏈，通過非共價鍵結(jié)合而成的二聚體。
　　（2）2.5s NGF：分子量13～14kD，沉降系數(shù)為 2.5s。其結(jié)構(gòu)與β亞基基本相同。故又稱β－NGF。
6．受體分類
　　（1）膜受體：
　　低親和力受體：快NGF受體，跨膜糖蛋白，分細胞外部分、跨膜連接區(qū)、胞漿部分，具有G蛋白偶聯(lián)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)功能。
　　高親和力受體：慢NGF受體，跨膜糖蛋白，具有*蛋白激酶活性。
　?。?）核受體
7．受體存在的部位
　　外周神經(jīng)系統(tǒng)：交感神經(jīng)元、感覺神經(jīng)元。
　　中樞神經(jīng)系統(tǒng)：*能神經(jīng)元、腎上腺素能神經(jīng)元、肽能神經(jīng)元、脊髓運動神經(jīng)元、腦干運動神經(jīng)元、中腦三叉核神經(jīng)元、視網(wǎng)膜節(jié)細胞、小腦部分神經(jīng)元。
[編輯本段]8．的作用機理
　　NGF與受體結(jié)合，通過受體介導(dǎo)的內(nèi)吞機制產(chǎn)生內(nèi)在化，形成由軸膜包繞、含有NGF、并保持其生物活性的小泡，經(jīng)軸突沿微管逆行轉(zhuǎn)運至胞體，經(jīng)*蛋白激酶、脂酰肌醇鈣、內(nèi)源性環(huán)腺苷酸等第二信使體系的轉(zhuǎn)導(dǎo)，啟動一系列級聯(lián)反應(yīng)，對靶細胞的某些結(jié)構(gòu)或功能蛋白基因表達進行調(diào)控而發(fā)揮其生物效應(yīng)。
9．NGF 生物效應(yīng)
　　發(fā)育期
　　誘導(dǎo)神經(jīng)纖維定向生長
　　刺激胞體和樹突的發(fā)育
　　增加神經(jīng)纖維支配區(qū)的密度
　　促進神經(jīng)元的分化發(fā)育
　　能使感覺神經(jīng)，交感神經(jīng)節(jié)數(shù)目增加，體積增大，纖維延長
　　成熟期
　　NGF和NGF受體的水平和分布都明顯減少,主要效應(yīng)神經(jīng)對NGF的依賴性也顯著降低,只有部分交感神經(jīng)元仍需依賴NGF存活。
　　神經(jīng)損傷后
　　NGF受體增加,反映在損傷修復(fù)過程中對NGF的
　　需求。
　　靶區(qū)NGF的水平也明顯升高。
10. 的神經(jīng)營養(yǎng)作用
　　在胚胎發(fā)育的一定時期內(nèi)，NGF為效應(yīng)神經(jīng)元生存所必須。體外實驗證實，如果培養(yǎng)液中不加NGF，神經(jīng)細胞即不能長出軸突，也不能存活。NGF及其受體也廣泛分布于中樞神經(jīng)系統(tǒng)，由海馬和腦皮質(zhì)產(chǎn)生的NGF可通過*能神經(jīng)逆行運輸至前腦基底核，維持*能神經(jīng)元的存活和功能。在胚胎發(fā)育早期，中樞NGF的含量決定*能神經(jīng)的密度。在無*能神經(jīng)支配的小腦區(qū)和下丘腦，NGF含量也較高，表明除*能神經(jīng)外，NGF對其他類神經(jīng)元也有營養(yǎng)作用。
11. 的神經(jīng)保護作用
　　當(dāng)NGF的效應(yīng)神經(jīng)元受到損傷時，例如切斷軸突、藥物損害，甚至缺血、缺氧等，神經(jīng)元將發(fā)生一系列的病理改變，包括死亡，實驗研究證實NGF通過：
　?。?）抑制毒性氨基酸的釋放；
　?。?）抑制鈣離子超載；
　　（3）抑制超氧自由基的釋放
　?。?）抑制細胞凋亡等機制而明顯減輕或防止這些繼發(fā)性病理損害的發(fā)生。
12. 的促神經(jīng)生長作用
　　如上所述，在切斷軸突后給予NGF將減少某些神經(jīng)元的變性與死亡，無疑這將有助于提高軸突再生的可能性。同時它還影響軸突再生開始的時間和參與再生的神經(jīng)元數(shù)目以及再生神經(jīng)的質(zhì)量和速度。
13. 在神經(jīng)系統(tǒng)以外的作用
　　• NGF的非神經(jīng)系統(tǒng)作用主要表現(xiàn)在影響免疫細胞的活性，進而調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)功能。不但調(diào)節(jié)神經(jīng)系統(tǒng)功能，而且也是一種免疫調(diào)節(jié)因子。
　　• NGF可以抑制某些腫瘤的有絲分裂，促其向良性分化。
　　• NGF促進創(chuàng)口組織的修復(fù)反應(yīng)，促進創(chuàng)口愈合。
14.目前國內(nèi)的的醫(yī)藥產(chǎn)品
　　目前國內(nèi)的的醫(yī)藥產(chǎn)品主要有以下三個：蘇肽生、金路捷和恩經(jīng)復(fù)
　　蘇肽生
　　通用名：注射用鼠
　　【主要成分】 本品主要成分系從小鼠頜下腺中提取的，是一種分子量為26.5KD的生物活性蛋白。
　　【適 應(yīng) 癥】 本品具有促進神經(jīng)損傷恢復(fù)的作用，用于治療視神經(jīng)損傷在各科的應(yīng)用舉例如下：
　　1、眼科：急性和遷延性視神經(jīng)、視網(wǎng)膜、角膜損傷；視神經(jīng)炎；神經(jīng)性角膜炎；過敏性結(jié)膜炎；視網(wǎng)膜脫離；弱視；視神經(jīng)萎縮；糖尿病性視網(wǎng)膜病變；手術(shù)或變性損傷；青光眼；角膜潰瘍等。
　　2、神經(jīng)外科：腦、脊髓損傷；脊髓移植。
　　3、骨科：四肢神經(jīng)損傷；坐骨神經(jīng)損傷；坐骨神經(jīng)痛；多發(fā)性神經(jīng)炎；椎間盤痛；神經(jīng)斷裂及退行性病變。
　　4、神經(jīng)內(nèi)科：急性腦血管（腦梗塞、腦出血）性中樞神經(jīng)損傷；腦萎縮；帕金森?。话V呆；癲癇；神經(jīng)衰弱；神經(jīng)性頭痛；重癥肌無力；多發(fā)性硬化；杭廷頓舞蹈癥等疾病。
　　5、兒科：新生兒缺血缺氧性腦??；小兒腦癱；腦炎后遺癥。
　　6、內(nèi)分泌科：糖尿病末梢神經(jīng)炎。
　　【用法用量】
　　1.臨用前每瓶注射用鼠用ml*（或*）溶解。
　　2．肌肉注射，每次30ug，一日1次，3-6周為一個療程。
　　【不良反應(yīng)】
　　臨床實驗中發(fā)現(xiàn)有注射部位局部疼痛，偶見蕁麻疹。
　　【規(guī) 格】
　　30ug（生物學(xué)活性≧15000AU）/瓶
　　【貯 藏】
　　于2-8℃避光保存。
　　金路捷
　　通用名： 注射用鼠
　　[主要成分］
　　本品主要成分系從小鼠頜下腺中提取純化的（mNGF），沉降系數(shù)2.5S,分子量13.5KD,純度≥98％，比活性≥22.5萬AU/mg蛋白。成品含5％苷露醇和0.1%人血蛋白作保護劑。
　　[性　狀］
　　本品為白色凍干疏松體。按瓶標(biāo)示量后溶液應(yīng)為無色澄明液體，不應(yīng)有異物、渾濁和沉淀。
　　[藥理作用］
　　大鼠體內(nèi)試驗結(jié)果表明：本品可改善由己二酮和丙烯酰胺造成的大鼠中毒性周圍神經(jīng)病所致的肢體運動功能障礙，縮短神經(jīng)－肌肉動作電位潛伏期，并提高神經(jīng)－肌肉動作電位幅度。組織病理學(xué)檢查結(jié)果表明，本品有減輕動物脛神經(jīng)的髓鞘腫脹發(fā)生率和降低變性脛神經(jīng)纖維數(shù)量等作用。以上結(jié)果提示本品可能有促進神經(jīng)損傷修復(fù)的作用。
　　[臨床應(yīng)用］
　　正己烷中毒性周圍神經(jīng)病。
　　1）周圍神經(jīng)損傷與周圍神經(jīng)病。如視神經(jīng)損傷、神經(jīng)離斷傷、正己烷中毒等
　　2）顱腦外傷
　　3）急性腦血管病、腦萎縮、帕金森病、早老性癡呆
　　4）脊髓損傷
　　5）新生兒缺血缺氧性腦病、小兒腦癱
　　大量文獻證實金路捷（NGF）已用于治療以上疾病。
　　[用法用量］
　　本品用2ml注射用水溶解，肌肉注射，一天一次，每次1支規(guī)格20ug（≥9000AU）/支，四周為一療程，可遵醫(yī)囑多療程連續(xù)給藥。兒童用藥請遵醫(yī)囑。（用法與用量請遵醫(yī)囑）
　　[不良反應(yīng)］
　　1.無嚴重不良反應(yīng)。臨床試驗中未發(fā)現(xiàn)有肝，腎，心臟等功能損害。
　　2. 用藥后常見注射部位痛或注射側(cè)下肢疼痛，一般無須處理。個別癥狀較重者，口服鎮(zhèn)痛劑即可緩解
　　3．偶見其他癥狀（如頭暈、失眠），發(fā)生率與安慰劑組比較無顯著差別?！?
　　[禁　忌］
　　對本品過敏者禁用?！?
　　[注意事項］
　　1、過敏體質(zhì)者慎用；
　　2、本品加注射用水震蕩后即可*溶解，如有不溶的沉淀、混濁或絮狀物時不可使用；
　　3、使用前應(yīng)仔細檢查藥瓶，如有裂縫活破損等異常情況不可使用。
　　4、用藥過程中，如有任何不適應(yīng)癥狀及時與醫(yī)生詢問。
　　[孕婦劑哺乳期婦女用藥］
　　本品對神經(jīng)細胞有促進生長、發(fā)育的作用，建議孕婦劑哺乳期婦女慎用。
　　[規(guī)　格］
　　每支生物活性大于等于9000AU，含mNGF20ug。
　　[貯　藏］
　　2～8℃避光保存。
　　恩經(jīng)復(fù)
　　通用名：注射用鼠
　　主要組成】 本品主要成分系從小鼠頜下腺提取的（mNGF），沉降系數(shù)2.5g，分子量13.5Kd，純度≥98%，比活性≥5.0×10U/mg蛋白，成品中含5%*和1%*作保護劑。
　　【性狀】
　　本品為白色凍干疏松體。按瓶標(biāo)示量溶解后溶液為無色澄明液體，不應(yīng)有異物，混濁和沉淀。
　　【藥理毒理】
　　藥理作用： 大鼠體內(nèi)試驗結(jié)果表明：本品可改善由己二酮和丙烯胺造成的大鼠中毒性周圍神經(jīng)病所致的肢體運動功能障礙，縮短神經(jīng)-肌肉動作電位潛伏期，并提高神經(jīng)-肌肉動作電位幅度。組織病理學(xué)檢查結(jié)果表明，本品有減輕動物脛神經(jīng)的髓鞘腫脹發(fā)生率和降低變性脛神經(jīng)纖維數(shù)量等作用。以上結(jié)果提示本品可能有促進損傷神經(jīng)恢復(fù)的作用。
　　毒理研究： 重復(fù)給藥的毒性試驗結(jié)果表明：1）Wistar大鼠肌注本品劑量分別為30μg/kg、60μg/kg和120μg/kg，連續(xù)給藥12周，僅見120μg/kg劑量組的動物在給藥28天后出現(xiàn)食欲減低，體重增長延緩，活動減少等。2）雜種犬肌注本品高劑量為17.8μg/kg，連續(xù)給藥60天后，動物未見明顯毒性反應(yīng)。 上海種小鼠的一般生殖毒性、致畸敏感期和圍產(chǎn)期毒性試驗結(jié)果表明：劑量在高達200μg/kg時，對動物的生育力、胚胎器官形成及時F1代仔鼠的發(fā)育無明顯的影響。
　　【藥代動力學(xué)】
　　目前尚無人體藥代動力學(xué)資料。
　　【適應(yīng)癥】
　　正己烷中毒性周圍神經(jīng)病。
　　【用法用量】
　　本品用2ml注射用水溶解，肌肉注射。一天1次，每次1支，4周為一療程，根據(jù)病情經(jīng)重可遵醫(yī)囑多療程連續(xù)給藥。
　　【不良反應(yīng)】
　　1．無嚴重不良反應(yīng)。臨床試驗中未發(fā)現(xiàn)有肝、腎、心臟等功能損害。 2．用藥后常見注射部位痛或注射側(cè)下肢疼痛（發(fā)生率分別為85%和29%），一般不需處理。 個別癥狀較重者，口服鎮(zhèn)痛劑即可緩解。
　　3．偶見其它癥狀（如頭暈、失眠等），發(fā)生率與安慰劑組比較無明顯差別。
　　【禁忌癥】
　　對本品過敏者禁用。
　　【注意事項】
　　1．過敏體質(zhì)者慎用。
　　2．本品加注射用水振蕩后即可*溶解，如有不溶的沉淀、混濁或絮狀物時不可使用。
　　3．使用前應(yīng)仔細檢查藥瓶，如有裂縫或破損等異常情況時不可使用。
　　4．用藥過程中，如有任何不適癥狀及時與醫(yī)生詢問。
　　【孕婦及哺乳期婦女用藥】
　　本品對神經(jīng)細胞有促進生長、發(fā)育的作用，建議孕婦及哺乳期婦女慎用。
　　【兒童用藥】
　　因目前尚沒有兒童應(yīng)用本品的資料，故兒童用藥請遵醫(yī)囑。
　　【老年患者用藥】
　　尚不明確。