抗血清質(zhì)量鑒定方法

【資料簡介】

抗血清的質(zhì)量直接影響分析方法的特異性和靈敏度，因此非常重要。用于鑒定抗血清質(zhì)量的參數(shù)主要有以下三項(xiàng)：

1．特異性（specificity）  是指一種抗體識別相應(yīng)抗原決定簇的能力。由于一種抗原常有結(jié)構(gòu)極相似的類似物（同類物、前體、降解物和代謝物），其抗血清可能對該抗原的類似物產(chǎn)生交叉反應(yīng)。因此，抗體的特異性通常以交叉反應(yīng)率表示：將反應(yīng)的zui大結(jié)合率抑制下降50%時特異性抗原與類似物的劑量（ED50）之比來計算交叉反應(yīng)率。如胰島素標(biāo)準(zhǔn)品使125I胰島素與抗血清的zui大結(jié)合下降50%的用量為0．5ng，而類似的物（前體）胰島素原的用量為500ng，則相應(yīng)的交叉反應(yīng)率（%）為：0．5/500＝0．1%。
　　抗體交叉反應(yīng)程度的高低直接影響測定結(jié)果的準(zhǔn)確性，但應(yīng)注意，抗血清特異性與分析方法特異性并不*相同，因后者對某一待測抗原的特異性程度不僅取決于所用抗體，尚有賴于標(biāo)記物的質(zhì)量和方法學(xué)設(shè)計。

 2．效價（titer） 是反映抗血清中有效抗體含量的相對參數(shù)，即抗血清稀釋至能與抗原發(fā)生有效反應(yīng)的zui大稀釋度。通常是將一株抗血清作系列稀釋后與標(biāo)記抗原反應(yīng)，計算不同稀釋度時抗體結(jié)合標(biāo)記抗原的百分率，繪制出抗體稀釋度曲線。結(jié)合具體方法設(shè)計要求。效價一般指結(jié)合50%標(biāo)記抗原時，抗血清的稀釋度

 3．親和性（affinity） 是指抗體分子上一個抗原結(jié)合部位與相應(yīng)的抗原決定簇之間的結(jié)合強(qiáng)度，常用親和常數(shù)Ka表示。Ka是正/逆向反應(yīng)速度常數(shù)的比值，單位為稀釋度單位（L/mol或LM-1），表示需將lmol抗體稀釋至多少升，才能使抗原—抗體結(jié)合下降50%；而Ka的倒數(shù)為解離常數(shù)（Kd），其單位為濃度單位（mol/L）。為提高放射免疫分析的靈敏度、精密度和準(zhǔn)確度，需選用Ka值高（109一1012L/mo1）的抗血清。

原文地址:/biotech/Immunity/2009/u819414716