花青素（Anthocyan）檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書

【資料簡(jiǎn)介】

花青素(Anthocyan)檢測(cè)試劑盒(微板法)

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

花青素(anthocyan,cyanidin)又稱花色素（anthocyanidin），屬黃烷衍生物，溶解于

細(xì)胞液中，是植物體內(nèi)廣泛分布的花色素之一，是花色素苷(anthocyains, anthocyanin) 水

解而得的有顏色的苷元。植物體內(nèi)存在花青素、葉綠素、類胡蘿卜素、類黃酮、酚類等物質(zhì)

與花、果實(shí)和葉片的顏色有關(guān)，而且與果實(shí)等樣品衰老過(guò)程密切相關(guān)，對(duì)其加工性能、存儲(chǔ)、

營(yíng)養(yǎng)價(jià)值等都有重要影響。

植物花青素檢測(cè)試劑盒(微板法)檢測(cè)原理是花青素溶于有機(jī)溶劑，以有機(jī)溶劑

粗提花青素，花青素在酸性溶液中呈紅色，顏色深淺與花青素含量呈正比，于 530nm 有

大吸收波，可利用酶標(biāo)儀測(cè)定其吸光度，進(jìn)而計(jì)算出花青素的含量，方法簡(jiǎn)單易行。因組織

中花青素種類不同，所需標(biāo)準(zhǔn)品亦不同，本產(chǎn)品不含標(biāo)準(zhǔn)品，因此只能檢測(cè)花青素的相對(duì)含

量。如需檢測(cè)樣品中花青素的準(zhǔn)確含量，請(qǐng)自備對(duì)應(yīng)種類的花青素標(biāo)準(zhǔn)品。本試劑盒主要用

于植物組織或果實(shí)中花青素的提取以及定量檢測(cè)花青素相對(duì)含量。該試盒僅用于科研領(lǐng)域，

不宜用于診斷或其他用途。

產(chǎn)品組成：

名稱                                                 100T                               Storage

Anthocyan Assay Buffer              2×500ml                               RT

使用說(shuō)明書                                        1 份

自備材料：

1、實(shí)驗(yàn)材料：桃子、李子、蘋果、杏等果實(shí)或其他植物組織

2、研缽或勻漿器

3、離心管、離心機(jī)

4、濾紙或紗布

5、96 孔板

6、酶標(biāo)儀

操作步驟(僅供參考)：

1、花青素提�。�

方法一：

①4℃預(yù)冷研缽或勻漿器，以及 Anthocyan Assay Buffer。

編號(hào)

名稱

100T

Storage

Anthocyan Assay Buffer

2×500ml

RT

使用說(shuō)明書

1 份②取植物組織，洗凈，擦干，稱取新鮮樣品 0.25g，剪碎，置于研缽或勻漿器中。

③加入 2~3ml Anthocyan Assay Buffer，充分研磨或勻漿后轉(zhuǎn)入 10ml 離心管，用

Anthocyan Assay Buffer 沖洗研缽或勻漿器并轉(zhuǎn)移至離心管，補(bǔ)加 Anthocyan Assay

Buffer 至 8ml。

④4℃避光靜置 20min， 期間搖動(dòng) 2~3 次，然后過(guò)濾至離心管，也可用離心機(jī)

8000r/min 離心 3min，濾液（上清液）即為花青素粗提液。

方法二：

將樣品按上述比例加入提取液中，置于 32℃溫箱浸提 4~8h(期間可搖動(dòng)數(shù)次) ，或室

溫下避光浸提 24h，離心取上清即為花青素粗提液。

2、加樣及測(cè)定：取 96 孔板，用 Anthocyan Assay Buffer 做空白對(duì)照，取花青素提取液

（200~300ul）用酶標(biāo)儀在 530nm 波長(zhǎng)處讀取吸光度值。如果花青素濃度過(guò)高，可以

減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定，樣品的檢測(cè)好能設(shè)置 2 平行孔，求平均值。

計(jì)算：

花青素單位定義：以 OD 值為 0.1 時(shí)的花青素濃度稱為一個(gè)單位(U)。計(jì)算方法如下：

組織樣品的花青素含量(U/g)=(A 測(cè)定-A 空白)/(0.1xW)

式中：A 測(cè)定=花青素提取液在 530nm 的 OD 值

A 空白=空白對(duì)照在 530nm 的 OD 值

W=樣品鮮重(g)

亦可用自備的花青素標(biāo)準(zhǔn)品做梯度稀釋(0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、1mg/ml)，用

Anthocyan Assay Buffer 做空白對(duì)照，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，進(jìn)而計(jì)算出樣品中花青素的含量。

組織樣品的花青素(mg/g)={C×VT}/(W×V1)

式中：C=根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線求得的測(cè)定管花青素含量(mg/ml)

VT=花青素粗提液總體積(ml)=8

V1=加樣時(shí)所用花青素粗提液的體積(ml)

W=樣品鮮重(g)

液體樣品的花青素(mg/ml)=C×N/V

式中：C=根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線求得的測(cè)定管花青素含量(mg/ml)

V=加樣時(shí)所用花青素粗提液的體積(ml)

N=稀釋倍數(shù)

注意事項(xiàng)：

1、 為了避免花青素見(jiàn)光發(fā)生變化，操作時(shí)應(yīng)盡量避光，研磨或勻漿應(yīng)盡量縮短時(shí)間。

2、 取樣量、試劑用量應(yīng)根據(jù)花青素含量適當(dāng)調(diào)整。3、 Anthocyan Assay Buffer 應(yīng)密閉保存，避免有效成分揮發(fā)。

4、 如果沒(méi)有酶標(biāo)儀，也可以使用分光光度計(jì)測(cè)定。

5、 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

有效期：12 個(gè)月有效.