人（Human）內(nèi)臟素 （Visfatin） ELISA檢測試劑盒

【資料簡介】

　　人（Human）內(nèi)臟素 （Visfatin） ELISA檢測試劑盒試驗(yàn)原理：
　　
　　VISFATIN試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知VISFATIN濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將VISFATIN和*標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中VISFATIN的濃度呈比例關(guān)系。
　　
　　試劑盒內(nèi)容及其配制：
　　
　　試劑盒成份 96孔配置 48孔配置
　　
　　96/48人份酶標(biāo)板 1塊板（96T） 半塊板（48T）
　　
　　塑料膜板蓋 1塊 半塊
　　
　　標(biāo)準(zhǔn)品：200ng/ml  1瓶（1.0ml） 1瓶（0.5ml）
　　
　　空白對照 1瓶（1.0ml） 1瓶（0.5ml）
　　
　　標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液 1瓶（8.0ml） 1瓶（4.0ml）
　　
　　*標(biāo)記的抗VISFATIN抗體 1瓶（8.0ml） 1瓶（4.0ml）
　　
　　親和鏈酶素-HRP 1瓶（12ml） 1瓶（5ml）
　　
　　洗滌緩沖液 1瓶（20ml） 1瓶（10ml）
　　
　　底物A 1瓶（6.0ml） 1瓶（3.0ml）
　　
　　底物B 1瓶（6.0ml） 1瓶（3.0ml）
　　
　　終止液 1瓶（6.0ml） 1瓶（3.0ml）
　　
　　自備材料：
　　
　　1.蒸餾水。
　　
　　2.加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
　　
　　3.振蕩器及磁力攪拌器等。
　　
　　4.
　　
　　樣品收集、處理及保存方法：
　　
　　血清……操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原
　　
　　和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血紅
　　
　　細(xì)胞迅速小心地分離。
　　
　　2、血漿……EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
　　
　　3、細(xì)胞上清液……1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
　　
　　4、組織勻漿……將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液。
　　
　　5、保存……如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
　　
　　ELISA技術(shù)的-操作要點(diǎn)：
　　
　　的試劑,良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠的必要條件。ELISA的操作因固相載體的形成不同而有所差異,國內(nèi)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)一般均用板式點(diǎn).本文將敘述板式注意要點(diǎn),要詳細(xì)的使用說明,嚴(yán)格遵照規(guī)定操作,必能得出準(zhǔn)確的結(jié)果.