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熒光素標(biāo)記腫瘤壞死因子配體超家族成員18抗體IgG

2013年03月04日 10:19:38人氣:227來(lái)源:上海安研商貿(mào)有限公司

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關(guān) 鍵 詞熒光素標(biāo)記腫瘤壞死因子配體超家族成員18抗體IgG,Anti-TNFSF18/GITR Ligand
【資料簡(jiǎn)介】

熒光素標(biāo)記腫瘤壞死因子配體超家族成員18抗體IgG

Anti-TNFSF18/GITR Ligand/FITC  熒光素標(biāo)記腫瘤壞死因子配體超家族成員18抗體IgG
Anti-TNF-α /HRP  辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記腫瘤壞死因子抗體IgG
Anti-CD34/Biotin  *標(biāo)記兔抗人、大、小鼠、豬、兔、狗CD34抗體IgG
Anti-TOPOⅡα/DNA TPⅡα /FITC  熒光素標(biāo)記DNA拓普西異構(gòu)酶Ⅱ抗體IgG
Anti-TNF-α /RBITC  紅色熒光素標(biāo)記腫瘤壞死因子抗體
Anti-TP53/FITC  熒光素標(biāo)記抗腫瘤P53抗體IgG
Anti-t-PA/FITC  熒光素標(biāo)記組織型纖溶酶原激活劑抗體IgG
Anti-TPH /FITC  熒光素標(biāo)記*羥化酶抗體IgG
Anti-TPO/FITC  熒光素標(biāo)記兔抗甲狀腺過(guò)氧化物酶抗體IgG
Anti-TRA16/FITC  熒光素標(biāo)記睪丸激素受體相關(guān)蛋白16抗體IgG
Anti-TRA16 /FITC  熒光素標(biāo)記睪丸激素受體相關(guān)蛋白/孤兒素受體相關(guān)蛋白抗體IgG
Anti-TRADD/FITC  熒光素標(biāo)記有死亡區(qū)的腫瘤壞死因子受體1相關(guān)蛋白抗體IgG
Anti-TPⅠ/FITC  熒光素標(biāo)記拓普西異構(gòu)酶Ⅰ抗體IgG
Anti-TRAF1/TNF-R1 /Biotin   *化腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子1抗體
Anti-TRAF1/TNF-R1 /FITC  熒光素標(biāo)記腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子1抗體IgG
Anti-TRAF2/TNF-R2 /FITC  熒光素標(biāo)記腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子2抗體IgG
Anti-TRAF3/CD40bp /FITC  熒光素標(biāo)記CD40結(jié)合蛋白/CD40受體相關(guān)因子1抗體IgG
Anti-TRAF6 /FITC  熒光素標(biāo)記腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6抗體IgG

“雜音”染色片 
免疫組化除正常的真實(shí)的陽(yáng)性信號(hào)外常常會(huì)遇到不正常的背景著色,這些非正常的著色稱為“雜音”染色。“雜音”染色種類繁多,產(chǎn)生的原因也多種多樣,為了便于說(shuō)明,筆者將其歸納為下面幾種。 
1、 全片著色 
全片著色是指整個(gè)切片全都染上了顏色,著色的強(qiáng)度可深可淺,總之,分不清那些組織是陽(yáng)性那些組織是陰性。出現(xiàn)這種現(xiàn)象的原因有: 
(1)、抗體濃度過(guò)高:一抗?jié)舛冗^(guò)高是常見的原因之一。解決辦法是,每次使用新抗體前應(yīng)當(dāng)對(duì)其工作濃度進(jìn)行測(cè)試,使每一抗體個(gè)體化,找到適合自己實(shí)驗(yàn)室的理想工作濃度,既使是即用型的抗體也應(yīng)如此,不能只簡(jiǎn)單的按說(shuō)明書進(jìn)行染色。 
(2)、抗體孵育時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或溫度較高:解決辦法是,嚴(yán)格執(zhí)行操作規(guī)程,隨身佩帶報(bào)時(shí)表或報(bào)時(shí)鐘,及時(shí)提醒,避免因遺忘而造成時(shí)間延長(zhǎng)。現(xiàn)在流行的二步法(Polymer)敏感性很高,要求一抗孵育的時(shí)間不是傳統(tǒng)的1小時(shí),而是30分鐘,因此,要根據(jù)染色結(jié)果進(jìn)行調(diào)整。 
(3)、DAB變質(zhì)和顯色時(shí)間太長(zhǎng):DAB現(xiàn)用現(xiàn)配,如有沉渣應(yīng)進(jìn)行過(guò)濾后再用。配制好的DAB不應(yīng)存放時(shí)間太長(zhǎng),因?yàn)樵跊]有酶的情況下,過(guò)氧化氫也會(huì)游離出氧原子與DAB產(chǎn)生反應(yīng)而降低DAB的效力,未用完的DAB存放在冰箱里幾天后再用這種似乎節(jié)約的辦法是不可取的。DAB的顯色在顯微鏡下監(jiān)控,達(dá)到理想的染色程度時(shí)立即終止反應(yīng)。不過(guò)當(dāng)染色片太多時(shí)或用染色機(jī)時(shí),這樣做似乎不現(xiàn)實(shí),但至少應(yīng)對(duì)一些新的或少用的抗體顯色時(shí)進(jìn)行監(jiān)控,避免顯色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)。 
(4)、組織變干:修復(fù)液溢出后未及時(shí)補(bǔ)充液體、染色切片太多、動(dòng)作太慢、忘記滴液、滴液流失等都是造成組織變干的原因。解決的辦法是操作要認(rèn)真仔細(xì),采用DAKO筆或PAP Pen在組織周圍畫圈,可以有效的避免液體流失,也能提高操作速度。 
(5)、切片在緩沖液或修復(fù)液中浸泡時(shí)間太長(zhǎng)(大于24小時(shí)):原因上不清楚,但現(xiàn)象存在。有的實(shí)驗(yàn)室喜歡前一天將切片脫蠟至修復(fù),第二天加抗體進(jìn)行免疫組化染色,如果將裝有切片和修復(fù)液的容器放在4ºC冰箱過(guò)夜,對(duì)結(jié)果無(wú)明顯影響,如果放在室溫,特別是炎熱的夏天,會(huì)出現(xiàn)背景著色,因此,不可存放時(shí)間太長(zhǎng)。(6)、一抗變質(zhì)、質(zhì)量差的多克隆抗體:注意抗體的有效期,過(guò)期的抗體要麼不顯色要麼背景著色。用新買的抗體時(shí)設(shè)立陽(yáng)性對(duì)照和用使用過(guò)的抗體作比較。 

上海安研商貿(mào)有限公司作者

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