酶聯(lián)免疫試劑盒的吸附試驗(yàn)方法

【資料簡介】

間接ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),酶聯(lián)免疫試劑盒） 本法主要用于檢測抗體。以鴨病毒性肝炎（DVH）抗體的ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),酶聯(lián)免疫試劑盒）為例，間接ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),酶聯(lián)免疫試劑盒）的操作程序如下。
（1） 材料
① 包被液、洗滌液、保溫液、底物液、終止液；
② DVH包被抗原、酶標(biāo)抗抗體、陰性及陽性DVH參考血清；待檢鴨血清；
③ ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),酶聯(lián)免疫試劑盒）檢測儀、加樣器、聚苯乙烯微量板。
（2） 方法步驟
① 加抗原包被 → 4℃過夜，洗滌三次、拋干
② 加待檢血清 → 37℃ 2小時(shí)，洗滌三次、拋干
③ 加酶標(biāo)抗體 → 37℃ 2小時(shí)，洗滌三次、拋干
④ 加底物液 → 37℃ 30分鐘，加終止液
⑤ 用ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),酶聯(lián)免疫試劑盒）檢測儀測定OD值，并計(jì)算出P/N比值。
（3） 結(jié)果判定 已知陽性血清與已知陰性血清的比值（P/N）≥2.1，而且已知陽性血清的OD值≥0.4；在上述條件成立的情況下，如果待檢血清與已知陰性血清的比值（P/N）≥2.1，而且待檢血清的OD值≥0.4，則判為陽性，否則判為陰性。