現(xiàn)貨人可溶性血管間黏附分子ELISA檢測(cè)試劑盒

【資料簡(jiǎn)介】

本試劑僅供研究使用  標(biāo)本：血清或血漿

 

試驗(yàn)原理：

sVCAM-1試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.人可溶性血管間黏附分子ELISA檢測(cè)試劑盒已知sVCAM-1濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將sVCAM-1和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中sVCAM-1的濃度呈比例關(guān)系。

自備材料

蒸餾水。
加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
振蕩器及磁力攪拌器等。

 

安全性

避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請(qǐng)盡快用水沖洗。
實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

 

 

操作注意事項(xiàng)

試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

 

樣品收集、處理及保存方法

血清-----操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。人可溶性血管間黏附分子ELISA檢測(cè)試劑盒使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

 

試劑的準(zhǔn)備

標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋?xiě)?yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備，不能儲(chǔ)存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。

洗滌緩沖液（50×）的稀釋?zhuān)赫麴s水50倍稀釋。

 

操作步驟

使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時(shí)加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。
根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。
加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時(shí)。
甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。
取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。
在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。

 

局限

6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的，根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無(wú)法得到的結(jié)果。

 

試劑盒性能

1. 靈敏度：zui小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。

2. 特異性：不與人其它細(xì)胞因子反應(yīng)。

3. 重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。

 

結(jié) 果 判 斷 與 分 析

1、儀器值：于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值

 

2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y），相應(yīng)的sVCAM-1標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X），做得相應(yīng)的曲線，樣品的sVCAM-1含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。

 

3、檢測(cè)值范圍：0-80ng/ml

 

4、敏感度： 0.1 ng/ml

小鼠高遷移率族蛋白1(HMGB1) Mouse mobility group box-1 protein ELISA Kit Y08244 96T/48T
小鼠妊娠相關(guān)血漿蛋白A（PAPP-A） Mouse pregnancy associated plasma protein-A ELISA Kit Y08245 96T/48T
小鼠內(nèi)皮脂肪酶(EL) Mouse Endothelial lipase ELISA Kit Y08246 96T/48T
小鼠碳酸酐酶(CA) Mouse carbonic anhydrase ELISA Kit Y08247 96T/48T
小鼠降鈣素基因相關(guān)肽（CGRP） Mouse calcitonin gene related peptide ELISA Kit Y08248 96T/48T
小鼠胃動(dòng)素（MTL） Mouse Motilin ELISA Kit Y08249 96T/48T
小鼠生長(zhǎng)抑素（SS）  Mouse Somatostatin ELISA Kit Y08250 96T/48T
小鼠纖維蛋白原（FB） Mouse FB ELISA Kit Y08251 96T/48T
小鼠橫紋肌輔肌動(dòng)蛋白α （Actinin α ） Mouse Actinin α ELISA Kit Y08252 96T/48T
小鼠肌球蛋白（Myosin） Mouse Myosin ELISA Kit Y08253 96T/48T
小鼠結(jié)蛋白（Desmin） Mouse Desmin ELISA Kit Y08254 96T/48T
小鼠組織相容性復(fù)合物（MHC） Mouse major histocompatibility complex ELISA Kit Y08255 96T/48T
小鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽（ENA-78）.  Epithelial neutrophil activating peptide-78 ELISA Kit Y08256 96T/48T
小鼠抗凝血酶（AT-III） Mouse AT-III ELISA Kit Y08257 96T/48T
小鼠神經(jīng)肽（NPY） Rat neuropeptide Y ELISA Kit Y08258 96T/48T
小鼠生長(zhǎng)激素釋放多肽（ghrelin） Mouse ghrelin ELISA Kit Y08259 96T/48T
小鼠Gelsolin Mouse Gelsolin ELISA Kit Y08260 96T/48T
小鼠核因子活化因子受體配體(RANKL) Mouse receptor activator of nuclear factor kappaB ligand ELISA Kit Y08261 96T/48T
小鼠血栓前體蛋白（TpP） Mouse TpP ELISA Kit Y08262 96T/48T
小鼠促性腺激素釋放激素(GnRH) Mouse GnRH ELISA Kit Y08263 96T/48T
小鼠抑制素B（INH B0 Mouse inhibin B ELISA Kit Y08264 96T/48T
小鼠促甲狀腺素釋放激素(TRH) Mouse thyrotropin-releasing hormone ELISA KIT Y08265 96T/48T
小鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)  Mouse CRH ELISA Kit Y08266 96T/48T
小鼠胰島素受體β（ISR-β） Mouse Insulin Receptor β（ISR-β）ELISA KIT Y08267 96T/48T
小鼠糖化血紅蛋白（HbA1c） Mouse HbA1c ELISA Kit Y08268 96T/48T
小鼠LFA-3(CD58) Mouse lymphocyte function associated antigen-3 ELISA Kit Y08269 96T/48T
小鼠組織相容性抗原（HLA-2） Mouse HLA-2 ELISA Kit Y08270 96T/48T
小鼠組織相容性抗原（HLA-1） Mouse HLA-1 ELISA Kit Y08271 96T/48T
小鼠骨成型蛋白質(zhì)7（BMP-7） Mouse Bone morphogenetic protein 7 ELISA Kit Y08272 96T/48T
小鼠透明質(zhì)酸(HA) Mouse HA ELISA Kit Y08273 96T/48T
小鼠25羥基維生素D3（25(OH)D3） Mouse 25(OH)D3 ELISA Kit Y08274 96T/48T
小鼠肌紅蛋白(MYO) Mouse Myoglobin 人可溶性血管間黏附分子ELISA檢測(cè)試劑盒ELISA Kit Y08275 96T/48T
小鼠血栓素（TXB2） Mouse Thromboxane B2 ELISA Kit Y08276 96T/48T
小鼠乙酰膽堿(ACh) Mouse acetylcholine ELISA Kit Y08277 96T/48T
小鼠組織多肽抗原（TPA） Mouse Tissue Polypeptide Antigen ELISA Kit Y08278 96T/48T