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上海士鋒生物科技有限公司作者
新生大鼠大腦皮層星形膠質(zhì)細胞的原代培養(yǎng)
| 資料類型 | png文件 | 資料大小 | 51812 |
| 下載次數(shù) | 489 | 資料圖片 | 【點擊查看】 |
| 上 傳 人 | 上海士鋒生物科技有限公司 | 需要積分 | 0 |
| 關(guān) 鍵 詞 | 新生大鼠大腦皮層星形膠質(zhì),新生大鼠大腦皮 | ||
- 【資料簡介】
將出生2天以內(nèi)的新生SD大白鼠10只，用75%的酒精浸泡消毒后，采用無菌方法迅速取出大腦，用冷的D-Hanks液清洗并剔除腦膜和血管，取大腦皮質(zhì)，將碎為1mm3，用0.125%,37ºC消化10分鐘，過濾（200目尼龍濾網(wǎng)），離心（1000rpm 10分鐘）。
去上清，加入DMEM/F12*培養(yǎng)基（其中含10%胎牛血清，10%馬血清，L-2mmol/L，100u/ml,100μg/ml）制成細胞懸液。
計數(shù)后按5×105/cm2接種于培養(yǎng)瓶。貼附30min后，轉(zhuǎn)移細胞懸液至新瓶中，加入DMEM/F12*培養(yǎng)基，在37ºC, 5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)9天（每3天更換培養(yǎng)液一次），第9天將培養(yǎng)瓶置于恒溫旋轉(zhuǎn)搖床上37ºC, 240rpm，搖18小時，去掉懸浮的細胞，用D-Hanks液清洗3次，進行傳代培養(yǎng)即得純化的星形膠質(zhì)細胞。
經(jīng)免疫細胞化學(xué)法檢測，98%以上的細胞GFAP免疫反應(yīng)為陽性。
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