好看日韩在线视频免费,日本不卡一区二区三区,三级a全过程在线观看,亚洲精品国产9999久久久久

技術(shù)中心

大鼠 (Rat) 低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α) 說(shuō)明書(shū)

2015年05月04日 16:30:45人氣:947來(lái)源:上海滬震生物科技有限公司

資料類型doc文件資料大小89088
下載次數(shù)149資料圖片 【點(diǎn)擊查看】
上 傳 人上海滬震生物科技有限公司 需要積分0
關(guān) 鍵 詞大鼠 (Rat) 低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α) 說(shuō)明書(shū),大鼠 (Rat) 低氧誘導(dǎo)因子1α(HI
【資料簡(jiǎn)介】

大鼠 (Rat) 低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α) 說(shuō)明書(shū)

Goat Anti-Rat Hypoxia inducible factor 1α

                                                                                                   

Storage: 2 - 8 °C                                       Package size: 96 determinations   

 

大鼠 (Rat) 低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α) 說(shuō)明書(shū)PRINCIPLE OF THE METHOD

The HIF-1α kit is a solid phase phase sandwich enzyme linked immuno sorbent assay(ELISA). Samples , including standards of  known HIF-1α concentrations and unknowns are pipetted into these wells. During the first incubation, the HIF-1α antigen and a biotinylated monoclonal antibody specific for HIF-1α are simultaneously incubated. After washing, the enzyme(streptavidin-peroxydase)is added. After incubation and washing to remove all the unbound enzyme, a substrate solution which is acting on the bound enzyme is added to induce a coloured reaction product. The intensity of this coloured product is directly proportional to the concentration of HIF-1α present in the samples.

 

REAGENTS PROVIDED AND RECONSTTTUTION

REAGENTS(Store at 2-8℃)

1×96 WELLS

0.5×96 WELLS

RECONSTTTUTION

96/48-wells microtiter plates

1

0.5

Ready-to-use

Plastiv cover

2

1

Ready-to-use

Standard: 800pg/ml

1Vials  (0.6ml)

0.5Vials  (0.3ml)

See reagents preparation on page 3

Blank control

1Vials  (1.0ml)

1Vials   (0.5ml)

Ready-to-use

Standard Diluent

1Vials  (4.0ml)

1Vials   (2.0ml)

Ready-to-use

Biotinylated anti-HIF-1α

1Vials  (6.0ml)

1Vials   (3.0ml)

Ready-to-use

Streptavidin-HRP

1Vials  (8.0ml)

1Vials   (4.0ml)

Ready-to-use

Washing Buffer

1Vials  (20ml)

1Vials   (10ml)

50× concentrate

Substrate  A

1Vials  (6.0ml)

1Vials   (3.0ml)

Ready-to-use

Substrate  B

1Vials (6.0ml)

1Vials   (3.0ml)

Ready-to-use

Stopping Solution

1Vials  (6.0ml)

1Vials   (3.0ml)

Ready-to-use

Sample Diluent 

1Vials  (12ml)

1Vials   (6.0ml)

Ready-to-use

 

大鼠 (Rat) 低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α) 說(shuō)明書(shū) 

MATERIAL REQUIRED BUT NOT PROVIDED

  • Distilled water
  • Pipettes:10ul、50ul、100ul、200ul、1000ul。
  • Vortex mixer and magnetic stirrer.

 

SAFETY

  • For research use only
  • Avoid any skin contact with H2SO4 and TMB. In case of contact, wash thoroughly water.
  • Do not eat, drink, smoke or apply cosmetics where kit reagents are used.
  • Do not pipette by mouth.

大鼠 (Rat) 低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α) 說(shuō)明書(shū) 

PROCEDURAL NOTES/LAB.QUALITY CONTROL

  • When not in use, kit components should be stored refrigerated or frozen as indicated on vials or bottles. All reagents should be warmed to room temperature before use. Lyophilized standards should be discarded after use.
  • Once the desired number of strips has been removed, immediay reseal the bag to protect the remaining strips from edterioration.
  • Cover or cap all reagents when not in use.
  • Do not mis or interchange reagents between different lots.
  • Do not use reagents beyond the expiration date of the kit .
  • Use a clean disposable plastic pipette tip for each reagent, standard, or specimen addition in order to avoid cross-contamination, for the dispensing of H2SO4 and substrate solution, avoid pipettes with metal parts.
  • Use a clean plastic container to prepare the washing solution.
  • Thoroughly mix the reagents and samples before use by agitation or swirling.
  • All residual washing liquid must be drained from the wells by efficient aspiration or by decantation followed by tapping the plate forcefully on absorbent paper. Never insert absorbent paper directly into the wells.
  • The TMB solution is light sensitive. Avoid prolonged exposure to light, also, avoid contact of the TMB solution with metal to prevent colour development. Warning TMB is toxic avoid direct contact with hands. Dispose off properly. If a dark blue colour develops within a few minutes after preparation, this indicates that the TMB solution has been contaminated and must be discarede. Read absorbances within 1 hour after completion of the assay.
  • When pipetting reagents, maintain a consistent order of addition from well-to-well. This will ensure equal incubation times for all wells.
  • Respect incubation times described in the assay procedure.

大鼠 (Rat) 低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α) 說(shuō)明書(shū) 

SPECIMEN COLLECTION\ PROCESSING AND STORAGE

  • Serum---Avoid any inintentional stimulation of the cells by the procedure. Use pyrogen\endotoxin free collecting tubes. Serum should be removed rapidly and carefully from the red cells after clothing. For that, after clothing, centrifuge at approximay 1000×g for 10 min and remove serum.
  • Plasma---EDTA\ citrate and heparin plasma can be assayed. Spin samples at 1000×g for 30 min remove particulates. Harvest plasma.
  • Cell culture supernatants---Remove particulates and aggregates by spinning at approximay 1000×g for 10 min.
  • Storage---If not analyzed shortly after collection, samples should be aliquoted(250-500ul) to avoid freeze-thaw cycles and stored frozen at -70℃. Avoid multiple freeze-thaw cycles of frozen specimens. When possible, avoid use of badly hemolyzed or lipemic sera. If large amounts of particles are present, this should be removed prior to assay by centrifugation or filtration.
  • Recommendation---Do not thaw by heating at 37℃ or 56℃. Thaw at room temperature and make sure that sample is compley thawed and homogenous before assaying.

 

PREPARATION OF REAGENTS

  • Standards: Standard have to be reconstituled with the volume of standard buffer diluent indicated on the vial. This reconstitution produces a stock solution of 800pg/ml HIF-1α. Allow standard to stand for 5 
  • minutes with gentle swirling prior to making dilutions. Serial dilutions of standard must be made before each assys and cannot be stored.

 

800 pg/ml

(6  Standard)

Original density 50ul

400 pg/ml

(5  Standard)

100ul  6 Standard  +100ul diludent

200 pg/ml

(4  Standard)

100ul  5 Standard  +100ul diludent

100 pg/ml

(3  Standard)

100ul  4 Standard  +100ul diludent

50 pg/ml

(2  Standard)

100ul  3 Standard  +100ul diludent

25 pg/ml

(1  Standard)

100ul  2 Standard  +100ul diludent

0 pg/ml

Blank Control

50ul。

 

  • Washing buffer 50×concentrate:  Dilute 50 times in distilled water.

大鼠 (Rat) 低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α) 說(shuō)明書(shū) 

ASSAY METHOD

  • Before use, mix all reagents thoroughly without making foam.
  • Determine the number of microwell strips required to test the desired number of samples,plus appropriate number of wells needed for running blanks standards. Each sample, standard and blank should be assayed in duplicate. Remove sufficient microwell strips from the pouch.
  • Add 50ul of standard diluent to standard wells B1,B2,  C1,C2,  D1,D2,  E1, E2,  F1,F2. Reconstitute standard vial with the appropriate volume as described in the chapter reagents preparation. Preparation. Pipet 100ul of standard into wells A1 and A2 (see plate scheme below). Transfer 50ul from A1 and A2 to B1 and B2 wells. Mix the contents by repeated aspirations and ejections. Take care not to scratch the inner surface of microwells. Repat this procedure from the wells B1,B2 to wells C1,C2 and from wells C1,C2 to D1,D2 and so on creating two parallel rows of HIF-1α standard dilutions ranging,Add 50ul of standard diluent to the bland wells.
  • Dilute samples 1:1 distribing 50ul of sample into 50ul of dilluent ,Add 50ul of diluted sample to wells..
  • Add 50ul of diluted biotinylated anti-HIF-1α to all wells.
  • Cover with a plate vover and incubate for 1 hour at 37℃.
  • Remove the cover and wash the plate as follows: ⑴ aspirate the liquid from each well, ⑵ dispensse 0.3ml of washing solution into each well. ⑶ Aspirate again the contet of each well after 0.5 minute. ⑷ Repeat steps ⑵ and ⑶ three times.
  • Distribute 60ul of streptavidin-HRP solution to all wells, including blank wells.
  • Cover and incubate 30 min at 37℃.
  • Remove the cover and empty wells, Wash microwell strips according to step, Proceed immediay to the next step.
  • Add 50ul Substrate A and Substrate B to each well。Incubate for 10 min at 37℃。
  • The enzyme-substrate reaction is stopped by quickly pipetting 50ul of H2SO4. stop reagent into each well, including the blank wells, to compley and uniformly inactivate the enzyme. Results must be red immediay after the addition of H2SO4.
  • Read absorbance of each well on a spectrophotometer using 450nm as the primary wavelength and optionally 620nm (610nm to 650nm is acceptable ) as the reference wavelength.

 

大鼠 (Rat) 低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α) 說(shuō)明書(shū) 

SUGGESTED PLATE SCHEME

 

Standard

concentrations(pg/ml)

 

A

800

800

sample

sample

sample

sample

sample

sample

sample

sample

sample

sample

B

400

400

sample

sample

sample

sample

sample

sample

sample

sample

sample

sample

C

200

200

sample

sample

sample

sample

sample

sample

sample

sample

sample

sample

D

100

100

sample

sample

sample

sample

sample

sample

sample

sample

sample

sample

E

50

50

sample

sample

sample

sample

sample

sample

sample

sample

sample

sample

F

25

25

sample

sample

sample

sample

sample

sample

sample

sample

sample

sample

G

0

0

sample

sample

sample

sample

sample

sample

sample

sample

sample

sample

H

sample

sample

sample

sample

sample

sample

sample

sample

sample

sample

sample

sample

 

LIMITATIONS OF THE PROCEDURE 

Do not extrapolate the standard curve beyond the max  standard curve point. The dose-response is non-linear in this region and good accruacy is difficult to obtain. 

 

CALCULATION OF RESULTS 

The minimum detectable concentration in this assay is estimated to be 1.0pg/ml 

 

上海滬震生物科技有限公司作者

上一篇:血小板聚集儀操作規(guī)程

下一篇:透射式黑白密度儀的維護(hù)


我要投稿
  • 投稿請(qǐng)發(fā)送郵件至:(郵件標(biāo)題請(qǐng)備注“投稿”)hbzhan@vip.qq.com
  • 聯(lián)系電話0571-87759680
環(huán)保行業(yè)“互聯(lián)網(wǎng)+”服務(wù)平臺(tái)
環(huán)保在線APP

功能豐富 實(shí)時(shí)交流

環(huán)保在線小程序

訂閱獲取更多服務(wù)

微信公眾號(hào)

關(guān)注我們

抖音

環(huán)保在線網(wǎng)

抖音號(hào):hbzhan

打開(kāi)抖音 搜索頁(yè)掃一掃

視頻號(hào)

環(huán)保在線

公眾號(hào):環(huán)保在線

打開(kāi)微信掃碼關(guān)注視頻號(hào)

快手

環(huán)保在線

快手ID:2537047074

打開(kāi)快手 掃一掃關(guān)注
意見(jiàn)反饋
麻豆国产欧美一区二区三区r| 哈啊慢点不要了视频| 喜欢被粗大阴茎插入| 啊啊啊操我视频大全| 日本高清一区二区三区在线观看| 日本人色频在线看观| 亚洲国产一区二区不卡在线资源| 欧美日韩久久一区二区三区| 上萬網友分享a级国产乱| 青青河边草直播免费观看| 找个日韩操逼的看看| 久久无码免费视频| 色男人天堂亚洲男人天堂| 久久久久黑人强伦姧人妻| 黑人大鸡巴双插美女| 无码人妻免费一区二区三区| 男人插女人视频软件| 国产污污污在线观看视频| 亚洲人成在线不卡网| 国产精品亚洲综合av| 日本成人精品一区二区三区| 天天干天天操天天插| 中文字幕亚洲欧美精品一区二区| 在线精品亚洲观看不卡欧| 中文字幕欧美人妻在线| 婷婷6月天丁香综合在线| 爱爱视频小抽插动漫| 国产精品亚洲一区二区三区下载| 最新的亚洲欧美中文字幕| 国产欧美洲中文字幕床上| 国产午夜爽爽爽男女免费动漫AV| 男插女逼啪啪啪软件| 鸡巴插骚逼视频欧美风格| 91在线一区二区| 欠欠草免费在线视频| 男生鸡鸡插进女生笑穴里| 精品免费久久久久久久久| 国产高清免费一级a久久| 中文字幕在线观一区二区| 亚洲日韩国产欧美久久久| 黑人与日本人妻中文字幕|