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白細(xì)胞介素-2(interleukin-2;IL-2 )

2015年07月24日 09:14:18人氣:296來(lái)源:江萊生物-中國(guó)老牌試劑供應(yīng)商

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關(guān) 鍵 詞白細(xì)胞介素-2(interleukin-2;IL-2 )
【資料簡(jiǎn)介】

其他名稱(chēng):T細(xì)胞生長(zhǎng)因子(T cell growth factor,TCRF) 

定義:主要由活化的CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞產(chǎn)生的具有廣泛生物活性的細(xì)胞因子。是所有T細(xì)胞亞群的生長(zhǎng)因子,并可促進(jìn)活化B細(xì)胞增殖,故為調(diào)控免疫應(yīng)答的重要因子,也參與抗體反應(yīng)、造血和腫瘤監(jiān)視。 

【中文名稱(chēng)】: 白細(xì)胞介素-2 

【簡(jiǎn)寫(xiě)拼音】: BXBJS-2 

【英文名稱(chēng)】: Interleukin-2 

【所屬類(lèi)別】: 免疫增強(qiáng)劑||其他抗腫瘤藥及輔助治療藥 

【別名】 白間素, 欣吉爾, T細(xì)胞生長(zhǎng)因子 ,白細(xì)胞介素-2 

【外文名】Interleukin-2 ,IL-2 

【適應(yīng)癥】 白介素-2是一個(gè)分子量為14500的糖蛋白,它刺激已被特異性抗原或致絲裂因數(shù)啟動(dòng)的T細(xì)胞增殖。重組白介素-2可用于臨床研究。主要用于腎癌、黑色素瘤和非何杰金淋巴瘤有效(Rossenberg)。LAK細(xì)胞代表1個(gè)有單核巨噬細(xì)胞,B和T淋巴細(xì)胞特征的異原的細(xì)胞體。這些LAK細(xì)胞似乎對(duì)癌細(xì)胞有特異作用。此外,LAK細(xì)胞(不象T細(xì)胞)介導(dǎo)殺傷不受MHC的約束。[1] 

1 材料和方法:

  1.1 制備粗制IL-2無(wú)菌采血,肝素抗凝,用RPMI1640按1∶1將血液稀釋?zhuān)缓笾貙佑诜瓶梢好嫔希? 500r/min離心30min,取白細(xì)胞層,用RPMI1640洗2次,按1~3×10細(xì)胞/ml濃度加入10%胎牛血清RPMI1640,注入一裝有磁棒的大瓶中,置37℃攪拌培養(yǎng)4天,取出,分裝于50ml離心管中,1 500r/min離心20min,棄上清液,將細(xì)胞懸浮于1%胎牛血清RPMI1640培養(yǎng)液中,使細(xì)胞濃度為106細(xì)胞/ml。同時(shí)加入純質(zhì)PHA1~2μg/ml以及多種B淋巴母細(xì)胞株,使其濃度為106細(xì)胞/ml,37℃攪拌培養(yǎng)18~24h后,取出以1500r/min離心30min,取上清,用045μg濾膜過(guò)濾除菌,濾液即為粗制IL-2。 

 2 制備精品IL2 

  2.1 硫酸銨沉淀與真空濃縮透析:在4℃下將硫酸銨粉末按50%飽和量加入上述粗制IL-2中,攪拌2h,12000g離心30min,取上清液,再加入80%飽和硫酸銨,4℃過(guò)夜,次日以12000g離心30min,棄上清液,將沉淀溶于1% PEG 6 000的1∶2 PBS溶液(pH值73)中,置真空負(fù)壓濃縮*中透析濃縮至所需容量。 

  2.2 Sephadex G100凝膠過(guò)濾:用2×180cm的過(guò)濾柱及PBS(同上),以80ml/h流速過(guò)濾。將各管洗脫液用紫外分光光度計(jì)280nm檢測(cè)其OD值。同時(shí)將幾種不同分子量的標(biāo)準(zhǔn)蛋白也用相同條件過(guò)濾及檢測(cè)其OD值,繪出IL-2及標(biāo)準(zhǔn)蛋白OD值的曲線(xiàn)。將各管洗脫液過(guò)濾除菌后,作白細(xì)胞生物活性試驗(yàn),按試驗(yàn)結(jié)果繪出曲線(xiàn),找出具有zui高IL2活性的幾管洗脫液,混合后,作下一步精制。 

  2.3 BlueSepharose層析:將上述混合后的洗脫液加入BlueSepharose柱中,流速約15ml/h,按每管10ml收集流出液,當(dāng)樣品全部流出柱中以后,用上述PBS洗滌樣品柱,再用梯度NaCl溶液(從0075mol/L至06mol/L NaCl的PBS溶液)洗脫,按2ml/管收集洗脫液。NaCl 溶液梯度及流速均由梯度混合器調(diào)節(jié)控制。洗脫完畢后,作各管OD值及NaCl濃度的測(cè)定。各管洗脫液過(guò)濾除菌后,作出生物活性測(cè)定。將峰值前后的數(shù)管洗脫液混合,即為精制的IL2。置-20℃冰箱保存。 

  3 檢定 

  3.1 活性測(cè)定用10%胎牛血清RPMI1640將上述IL2稀釋為50%、25%、125%、625%,而后再將每個(gè)百分濃度以及*濃度的IL2倍比稀釋?zhuān)?∶2至1∶128,將每個(gè)稀釋度分別加入多孔板的孔中,每孔01ml。然后取CT6細(xì)胞株(小鼠的IL2依賴(lài)性T細(xì)胞株),調(diào)整濃度為106細(xì)胞/ml,每孔加入01ml,同時(shí)用培養(yǎng)基代替IL2作對(duì)照。將多孔板培養(yǎng)24h后,取出按每孔1μci的濃度加H3標(biāo)記胸腺嘧啶核苷繼續(xù)培養(yǎng)4h。取出后用MESHⅡ細(xì)胞收集器過(guò)濾洗滌細(xì)胞,用β計(jì)數(shù)器測(cè)定各孔細(xì)胞的cpm。必要時(shí)按此結(jié)果繪出曲線(xiàn),確定活性單位。 

  3.2 蛋白含量測(cè)定采用分光光度計(jì),分別測(cè)得OD280及OD260,然后按下式計(jì)算:蛋白含量(mg/ml)=(144×OD280-075×OD260)×稀釋倍數(shù) 

  3.3 毒性試驗(yàn)及細(xì)菌檢查參考*制備部分。 

應(yīng)用

【藥理作用】 本品可促進(jìn)T淋巴細(xì)胞增殖與分化,誘導(dǎo)具有細(xì)胞毒樣活力的殺傷細(xì)胞,誘導(dǎo)及增強(qiáng)殺傷性T細(xì)胞、單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞的活力等。 

【臨床應(yīng)用】 適用于慢性活動(dòng)性乙型肝炎病毒感染等 

【用法用量】 靜脈滴注:每次2.5萬(wàn)-5萬(wàn)U,每日1次。 

【不良反應(yīng)】 常見(jiàn)發(fā)熱、寒戰(zhàn)等反應(yīng)。1.消化系統(tǒng):惡心、嘔吐、腹瀉、結(jié)腸局部壞死或穿孔。 2.呼吸系統(tǒng):可致間質(zhì)性肺水腫、呼吸性堿中毒。3.神經(jīng)系統(tǒng):可發(fā)生行為變化、認(rèn)知障礙。4.心血管系統(tǒng):可出現(xiàn)低血壓、心動(dòng)過(guò)速、心律失常等癥狀。5.血液系統(tǒng):可出現(xiàn)中性粒細(xì)胞上升,淋巴及單核細(xì)胞下降。6.泌尿系統(tǒng):出現(xiàn)少尿、體液潴留、氨質(zhì)血癥??沙霈F(xiàn)內(nèi)分泌功能紊亂,血鈣、血磷下降,*缺乏。 

【規(guī)格】 粉針劑:1000u,10000u, 10萬(wàn)u, 100萬(wàn)u. 

注意事項(xiàng):癲癇、嚴(yán)重低血壓,心、腎功能不全,高熱者禁用。孕婦、患有心臟病或肺部疾病、60歲以上者慎用。用藥期間應(yīng)定期查肝、腎功能。



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產(chǎn)品:

bs-12540R磷酸化活化復(fù)制因子2抗體|phospho-ATF2(Thr71)
bs-12542R活化轉(zhuǎn)錄因子5抗體|ATF5
bs-12543R活化轉(zhuǎn)錄因子6β抗體|ATF6 beta
bs-12544RAICAR甲酰基轉(zhuǎn)移酶抗體|ATIC
bs-12545R磷酸化毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白抗體|phospho-ATM (Ser794)
bs-12546RATP5E蛋白抗體|ATP5E
bs-12547RATP5G2蛋白抗體|ATP5G2
bs-12548RATP6V0D2蛋白抗體|ATP6V0D2
bs-12549RATP6V1B2蛋白抗體|ATP6V1B2
bs-12550RATPIF1蛋白抗體|ATPIF1
bs-12551RAttractin蛋白抗體|Attractin
bs-12552R磷酸化有絲分裂激酶B抗體|Phospho-Aurora B(Tyr12)
bs-12529R肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白M1抗體|ARPM1
bs-12565RALKB蛋白抗體|ABH1
bs-12566R乙酰*?;D(zhuǎn)移酶1抗體|ACAA1
bs-12581R磷酸化β-肌動(dòng)蛋白抗體|phospho-beta Actin (Tyr53)
bs-12978R磷酸化腎上腺素能受體β2/β2-AR 抗體|phospho-beta 2 Adrenergic Receptor (Ser346)
bs-12979R磷酸化腎上腺素能受體β2/β2-AR抗體|phospho-beta 2 Adrenergic Receptor (Ser355 + Ser356)
bs-10130R載脂蛋白D抗體|APOD
bs-2586R酸敏感離子通道1抗體|ASIC1/BNaC2/ASIC1A
bs-2168R雙鏈RNA腺苷酸脫氨基酶抗體(C端)|ADAR1 (C-terminus)
bs-3696R髓系、淋巴、混合系白血病易位基因10抗體|AF10
bs-3681R腺苷酸環(huán)化酶1抗體|ADCY1
bs-3680R腺瘤樣息肉抗體|APC
bs-5023R溶血磷脂?;D(zhuǎn)移酶抗體|AGPAT1
bs-9098R錨蛋白重復(fù)及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體|ANKS3
bs-3047R磷酸化間變型淋巴瘤激酶抗體|phospho-ALK (Tyr1586)
bs-5018R酰基*脫氫酶很長(zhǎng)鏈抗體|ACADVL
bs-7735R信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)銜接結(jié)合蛋白抗體|AMSH
bs-7736R錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族3抗體|ASB3
bs-2750R有絲分裂激酶B抗體|Aurora C
bs-3045R磷酸化Ack1抗體|Phospho-Ack1 (Tyr284)
bs-3046R磷酸化Ack1抗體|Phospho-Ack1 (Tyr326)
bs-3048R磷酸化β抑制蛋白1抗體|Phospho-beta-Arrestin 1 (Ser412)
bs-3050R磷酸化有絲分裂激酶A抗體|Phospho-Aurora A (Thr288)
bs-3003R磷酸化APS抗體|phospho-APS(Ser598)
bs-2749R有絲分裂激酶A抗體|Aurora A
bs-5986R干擾素誘導(dǎo)蛋白AIM2抗體|AIM2
bs-4611R水通道蛋白-2抗體|Aquaporine 2
bs-5984R腫瘤抑制基因ABI2/**蛋白激酶結(jié)合蛋白抗體|ABI2
bs-5987RADP核糖基化因子樣11抗體|ARL11
bs-5990RARM重復(fù)X連鎖蛋白ARMCX3抗體|ARMCX3
bs-5988RARM重復(fù)X連鎖蛋白ARMCX1抗體|ARMCX1
bs-5989RARM重復(fù)X連鎖蛋白ARMCX2抗體|ARMCX2
bs-5991R自噬相關(guān)蛋白10抗體|Apg10
bs-6017R?;?結(jié)合結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體|ACBD6
bs-6019R氨基?;?抗體|Aminoacylase 1
bs-3831R脂肪甘油三酯脂酶抗體|Adipose Triglyceride Lipase
bs-4002R磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1抗體|phospho-AMPK alpha-1 (Thr172)
bs-3847R雙調(diào)蛋白(結(jié)腸直腸細(xì)胞源性生長(zhǎng)因子)抗體|Amphiregulin
bs-5185R磷酸化水通道蛋白2抗體|phospho-AQP2(Ser264)
bs-5180R粘附相關(guān)激酶抗體|AXL
bs-5181R磷酸化粘附相關(guān)激酶抗體|phospho-AXL (Tyr698+Tyr702+Tyr703)
bs-5182R磷酸化蛋白激酶B抗體|phospho-AKT1 + AKT2 + AKT3 (Thr308+Thr309+Thr305)
bs-5187R磷酸化水通道蛋白2抗體|phospho-AQP2(Ser269)
bs-5186R磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體|phospho-Amyloid Precursor Protein (Thr743)
bs-5188R磷酸化蛋白激酶B抗體|phospho-AKT1(Ser129)
bs-5189R磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體|phospho-Amyloid Precursor Protein (Ser198)
bs-5190R磷酸化活化轉(zhuǎn)錄因子4抗體|phospho-ATF4 (Ser245)
bs-5191R磷酸化雄激素受體抗體|phospho-Androgen Receptor (Ser213)
bs-5192R磷酸化雄激素受體抗體|phospho-Androgen Receptor (Ser650)
bs-5193R磷酸化蛋白激酶AKT1,2,3抗體|phospho-AKT1+2+3 (Tyr315+316+312) 

江萊生物-中國(guó)老牌試劑供應(yīng)商作者

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