3-羥-3-甲戊二酰輔酶AELISA試劑盒技術(shù)背景

【資料簡介】

3-羥-3-甲戊二酰輔酶AELISA試劑盒技術(shù)背景:
甲戊二羥酸通路（mevalonate pathway），又稱為3-羥-3-甲戊二酰輔酶A（HMG-COA）還原酶通路或甲戊二羥酸依賴性通路，是所有高等真核生物和許多細菌具有的重要的細胞代謝通路，用于體內(nèi)產(chǎn)生二甲基丙烯焦磷酸（dimethylallyl pyrophosphate；DMAPP）和異戊二烯焦磷酸（isopentenyl pyrophosphate；IPP）作為生物大分子合成的基礎(chǔ)，包括蛋白質(zhì)異戊二烯化、細胞膜維護、激素合成、蛋白固著、蛋白糖化等。3-羥-3-甲戊二酰輔酶A還原酶（3-hydroxy-3-methyl-glutaryl-CoA reductase；HMGR；EC1.1.1.34）是控制甲戊二羥酸通路的關(guān)鍵的酶，調(diào)節(jié)膽固醇和類異戊二烯脂分子的產(chǎn)生。HMG-COA還原酶位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上，含有8個跨膜結(jié)構(gòu)域，其中活性結(jié)構(gòu)域在細胞漿里。HMG-COA還原酶是許多降脂藥物的靶標，包括lovastatin （Mevacor）、atorvastatin （Lipitor）、pravastatin（Pravachol）和simvastatin（Zocor）。在植物組織中，HMG-COA還原酶位于質(zhì)體、線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上，含有2個跨膜結(jié)構(gòu)域，組織發(fā)育、光照、病原菌感染、創(chuàng)傷等將誘導HMG-COA還原酶活性增加。在HMG-COA還原酶的催化下，將4個電子的3-羥-3-甲戊二酰輔酶A（HMG-COA）還原為甲戊二羥酸（mevalonate），同時產(chǎn)生還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（reduced nicotinamide adenine dinucleotide phosphate；NADPH）被氧化為氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（oxidized nicotinamide adenine dinucleotide phosphate；NADP），其氧化后的吸光峰值變化（340nm 波長），來定量分析3-羥-3-甲戊二酰輔酶A（HMG-COA）還原酶的活性。

3-羥-3-甲戊二酰輔酶AELISA試劑盒主要用途:
3-羥-3-甲戊二酰輔酶A（HMG-COA）還原酶活性直接光度法定量檢測試劑是一種旨在運用3-羥-3-甲戊二酰輔酶A作為底物，在還原酶的催化下，還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）氧化后吸光峰值的降低，即采用光度法來測定植物裂解樣品中酶活性的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種植物組織，包括種子（seed）、葉片（leaf）、根（root）、胚胎葉（cotyledon）、上胚軸（epicotyl）等裂解懸液、微粒體，或純化酶樣品3-羥-3-甲戊二酰輔酶A（HMG-COA）還原酶的活性檢測，以及抑制劑篩選。產(chǎn)品嚴格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定。

3-羥-3-甲戊二酰輔酶AELISA試劑盒注意事項：
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。
3．各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
4．請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物請避光保存。
7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9．本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準。