辣根過氧化物酶標(biāo)記（OVA）ELISA試劑盒簡介

【資料簡介】

產(chǎn)品簡介: 辣根過氧化物酶標(biāo)記抗體是目前廣泛用于免疫學(xué)與分子生物學(xué)、免疫細(xì)胞化學(xué)、病理學(xué)診斷以及自身免疫性疾病的臨床免疫學(xué)診斷。該產(chǎn)品為辣根過氧化物酶標(biāo)記的親和純化OVA。
穩(wěn)定性： 液體-20℃以下可保存可一年穩(wěn)定，凍干粉-20℃以下可保存兩年以上穩(wěn)定，避免反復(fù)凍融。使用時(shí)應(yīng)按所需的濃度進(jìn)行稀釋，應(yīng)該現(xiàn)用現(xiàn)配，因?yàn)橄♂尯蟮娜芤褐锌贵w及酶的有效活性會(huì)很快降低。

辣根過氧化物酶標(biāo)記（OVA）ELISA試劑盒應(yīng)用范圍：
1. 抗原決定族的抗原性分析鑒定，各種抗原、抗體的定量、定性及定位分
析測定等。
2. ELISA 法： 1：2000～10000
3. 免疫印跡法：1:2000～5000
4. 免疫組化： 1：200～500

辣根過氧化物酶標(biāo)記（OVA）ELISA試劑盒將抗原或抗體固定在固相載體上的過程稱為包被(coating)。換言之，包被即是抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面的過程。蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結(jié)合的，靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體表面的疏水基團(tuán)間的作用力。這種物理吸附是非特異性的，受蛋白質(zhì)的分子量、等電點(diǎn)、濃度等的影響。載體對(duì)不同蛋白質(zhì)的吸附能力是不相同的，大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團(tuán)，故更易吸附到固相載體表面。IgG對(duì)聚苯乙烯等固相具有較強(qiáng)的吸附力，其聯(lián)結(jié)多發(fā)生在Fc段上，抗體結(jié)合點(diǎn)暴露于外，因此抗體的包被一般均采用直接吸附法。蛋白質(zhì)抗原大多也可采用與抗體相似的方法包被。當(dāng)抗原決定簇存在于或鄰近于疏水區(qū)域時(shí)，抗原與固相載體的直接吸附可使抗原決定簇不能充分暴露，在這種情況下，直接包被效果不佳，可以采用間接的捕獲包被法，即先將針對(duì)該抗原的特異抗體作預(yù)包被，其后通過抗原抗體反應(yīng)使抗原固相化。此間接結(jié)合在固相上的抗原遠(yuǎn)離載體表面，其抗原決定簇也得以充分暴露。間接包被的抗原經(jīng)固相抗體的親和層析作用，包被在固相上的抗原純度大大提高，因此含雜質(zhì)較多的抗原也可采用捕獲包被法，試驗(yàn)的特異性、敏感性均由此得以改善，重復(fù)性亦佳。間接包被的另一優(yōu)點(diǎn)是抗原用量少，僅為直接包被的1/10乃至于/100。不易吸附在聚苯乙烯載體上的非蛋白質(zhì)抗原可采用特殊的包被方式。例如，在檢測抗DNA抗體時(shí)，需用DNA作為包被抗原，而普遍的固相載體一般不能直接與核酸結(jié)合�？蓪⒕郾揭蚁┌逑冉�(jīng)紫外線照射（例如30W紫外燈，75cm照射12小時(shí)），以增加其吸附性能。固相載體先用堿性蛋白質(zhì)，如聚賴氨酸、*等作預(yù)包被，也可提高核酸的結(jié)合力。也可用親和素*系統(tǒng)作間接包被，即用親和素先包被載體，然后加入*化的DNA，這種包被方法均勻、牢固，已擴(kuò)大應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定量測定。

辣根過氧化物酶標(biāo)記（OVA）ELISA試劑盒結(jié)果計(jì)算與判斷
1. 所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。
2. 以標(biāo)準(zhǔn)品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0 pg/ml為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上作圖，畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。
3. 根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)IL-18BP含量，再乘上稀釋倍數(shù)即可。