人糖抗原72-4（CA72-4）ELISA試劑盒酶法

【資料簡(jiǎn)介】

人糖抗原72-4(CA72-4)ELISA試劑盒酶法齊一生物客戶寄標(biāo)本時(shí)需注明以下情況：

1、標(biāo)本編號(hào)；2、所測(cè)項(xiàng)目；3、是否做復(fù)孔；3、；4、實(shí)驗(yàn)后標(biāo)本是否寄回。

客戶必知：

客戶應(yīng)對(duì)所提供的材料及信息負(fù)責(zé)，如因客戶提供的材料及信息不準(zhǔn)確而引起的實(shí)驗(yàn)延誤或經(jīng)濟(jì)損失由客戶承擔(dān)。

齊一生物供應(yīng)ELISA試劑盒檢測(cè)的目的是為實(shí)驗(yàn)提供準(zhǔn)確可靠的定量分析實(shí)驗(yàn)依據(jù)。為了保證實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠性，在實(shí)驗(yàn)過程中必須堅(jiān)持全面質(zhì)量控制和全過程質(zhì)量控制。在收集標(biāo)本前都必須有一個(gè)完整的計(jì)劃。 

樣本保存條件：

1.2-8℃冰箱zui多放2周

2.-20到-50℃的冰箱可以放3-6個(gè)月

3.-50℃以下的冰箱，可以放一年

人糖抗原72-4(CA72-4)ELISA試劑盒酶法樣本收集

1.血清樣本用干燥管（紅色）或者促凝管（黃色）收集

2.血漿用抗凝管，一般有EDTA抗凝（紫色）、枸櫞酸鈉抗凝（黑色或者藍(lán)色）

3.動(dòng)物組織勻漿（細(xì)胞）：

              1g組織加入9ml PBS（濃度為0.1M，pH為7.4的）測(cè)分泌型指標(biāo)

              1g組織加入1ml組織裂解液加入8ml PBS 測(cè)細(xì)胞內(nèi)

糞便樣本：1g樣本+9ml PBS（濃度為0.01M，pH為7.4的）

沒有PBS的話也可以用一下生理鹽水，還是用PBS

樣本離心轉(zhuǎn)速及時(shí)間

1.試管采集的樣本：3000轉(zhuǎn)，離心五分鐘取上清

2.離心管或者EP管采集的樣本：5000--8000轉(zhuǎn)3分鐘取上清

3..樣本保存--如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

人糖抗原72-4(CA72-4)ELISA試劑盒酶法操作步驟：

1.使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時(shí)加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。

2.根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。

3.加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時(shí)。

4.甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。

5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。

6.甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。

7.每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育15分鐘。避免光照。

8.取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。

9.在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。

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