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人激活素ELISA試劑盒技術(shù)參數(shù)
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關(guān) 鍵 詞 | 人激活素ELISA試劑盒,ELISA試劑盒 |
- 【資料簡介】
人激活素ELISA試劑盒技術(shù)參數(shù)
試劑盒組成
30 倍濃縮洗滌液 20ml× 瓶 7 終止液 6ml× 瓶
2 酶標試劑 6ml× 瓶 8 標準品(00ng/mL) 0.5ml× 瓶
3 酶標包被板 2 孔×8 條 9 標準品稀釋液 .5ml× 瓶
4 樣品稀釋液 6ml× 瓶 0 說明書 份
5 顯色劑 A 液 6ml× 瓶 封板膜 2 張
6 顯色劑 B 液 6ml×/瓶 2 密封袋 個
人激活素ELISA試劑盒標本要求
.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
50ng/mL 5 號標準品50µl 的原倍標準品加入 50µl 標準品稀釋液
25ng/mL 4 號標準品50µl 的 5 號標準品加入 50µl 標準品稀釋液
2.5ng/mL 3 號標準品50µl 的 4 號標準品加入 50µl 標準品稀釋液
6.25ng/mL 2 號標準品50µl 的 3 號標準品加入 50µl 標準品稀釋液
3.25ng/mL 號標準品50µl 的 2 號標準品加入 50µl 標準品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔 (空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣 50µl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl,然后再加待測樣品 0µl(樣品zui終稀釋度為 5 倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4. 配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此重復(fù) 5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑 50µl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同 3。
8. 洗滌:操作同 5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色0 分鐘.
0. 終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
. 測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應(yīng)在加終止液后 5 分鐘以內(nèi)進行。
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