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上海哈靈生物科技有限公司
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ELISA實(shí)驗(yàn)的注意事項(xiàng)以及技術(shù)指南
2013-8-21 閱讀(789)
ELISA實(shí)驗(yàn)的注意事項(xiàng)！
1.認(rèn)真并且仔細(xì)的閱讀相關(guān)說(shuō)明書
2.確保elisakit試劑盒沒有過期。
3.根據(jù)說(shuō)明書把需要的試劑事先配置好。
4.樣品制備必須標(biāo)準(zhǔn)化，根據(jù)2-3％的金額重復(fù)的井制備的樣品的體積比（存儲(chǔ)），嘗試做一個(gè)備份等分。短期內(nèi)無(wú)法實(shí)驗(yàn)者，注意低溫保存。
準(zhǔn)備所有必要的實(shí)驗(yàn)其他項(xiàng)目如試管，槍頭，移液器，離心機(jī)等。
根據(jù)檢測(cè)到的數(shù)量的試樣，以確定所需的試劑量。
7.根據(jù)說(shuō)明書將所用試劑與室溫平衡，配置好需要使用的試劑。
ELISA常見技術(shù)指南
1.選擇時(shí)選擇一種單克隆抗體和多克隆抗體配對(duì);如果選擇兩個(gè)單克隆抗體，必須承認(rèn)不同的抗原決定簇，從同一家公司選擇的抗體對(duì)。
2.ELISA法檢測(cè)時(shí)為了確定*的信號(hào)和zui低的背景應(yīng)與對(duì)方捕獲抗體（0.5-4μg/ml）和檢測(cè)抗體（0.25-2μg/ml）在預(yù)實(shí)驗(yàn)命題滴定。在同一時(shí)間應(yīng)包括在適當(dāng)范圍內(nèi)的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋系列。提供的試劑由傳統(tǒng)的手工操作的范圍。
3.標(biāo)準(zhǔn)品的配制：對(duì)于每一個(gè)細(xì)胞因子應(yīng)仔細(xì)閱讀說(shuō)明書注意每個(gè)批次的細(xì)節(jié)。在使用細(xì)胞因子前應(yīng)該瞬時(shí)離心試劑瓶，盡可能多收回其中的細(xì)胞因子。
4.正常情況等測(cè)抗原標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍的可通過將標(biāo)準(zhǔn)品做八次二倍系列稀釋從2000pg/毫升到15pg/毫升?？山柚鷺?biāo)準(zhǔn)的ELISA使用流程、第三類試劑、放大試劑盒、或改變酶底物系統(tǒng)可在一定范圍內(nèi)促使提高靈敏度。
5.因?yàn)橐獌?yōu)化靈敏度，建議標(biāo)準(zhǔn)和樣品孵育過夜。
6.如果您正在使用過氧化物酶作為一種顏色系統(tǒng)，應(yīng)禁止在洗滌和稀釋劑加入*，*抑制過氧化物酶的活性。
