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上海哈靈生物科技有限公司
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巴氏染液（試劑盒）配制:蘇木精、桔黃克、EA染液
2013-8-23 閱讀(2042)
巴氏染液（試劑盒）配制
1、蘇木精：
Harris蘇木精：蘇木精5克溶于無水乙醇50毫升 ，硫酸鋁鉀100克溶于蒸餾水1000毫升 ，混合后煮沸，待稍冷加入氧花汞2.5克，再煮沸2分鐘，用前加冰醋酸20毫升
改良克ill氏半氧化蘇木精：
蘇木精2克, 無水乙醇250毫升, 硫酸鋁17.6克,（可減半量） 碘酸鈉0.2克, 檸檬酸2克，, 蒸餾水750毫升。
配制方法：將蘇木精溶于無水乙醇，硫酸鋁溶于蒸餾水，*溶解后兩液混合，依次加入碘酸鈉，檸檬酸，。
此配方特點： 配制時勿須加溫。配后即可應(yīng)用。性能穩(wěn)定，基本消除了過度氧化的蘇木精結(jié)晶污染涂片的麻煩。唯染色時間較長，須5～10分鐘。
2、桔黃克6： 桔黃克 0.5克，溶于95百分比酒精100毫升, 加磷鎢15m克。
3、 EA染液：
EA36：由3種貯備液按比例混合而成：
0.5百分比亮綠酒精溶液45毫升，
0.5百分比裨士麥褐酒精溶液10毫升，
0.5百分比伊紅Y酒精溶液45毫升，
混合后，再加磷鎢酸0.2克，飽和碳酸鋰水溶液1滴。
EA50：3百分比亮綠水溶液10毫升，純甲醇250毫升， 20百分比伊紅Y 水溶液20毫升，冰醋酸20毫升，磷鎢酸2克 （水溶后加入），95百分比酒精700毫升 。
染色方法
1、經(jīng)固定的涂片入水、蘇木精染核、鹽酸酒精分化、返蘭同HE染色 。
2、70百分比、80百分比、95百分比酒精逐級脫水各1分鐘。
3、桔黃克6 3～5 分鐘 。
4、95百分比酒精二缸漂洗各1 分鐘 。
5、EA36或EA50 5 分鐘 。
6、95百分比酒精二缸漂洗各1 分鐘 。
7、*二缸漂洗各1 分鐘 。
8、二甲苯二缸透明各1 分鐘 。
9、中性樹膠封片。
染色結(jié)果
核深藍色, 鱗狀上皮底層、中層及表層角化前細胞漿染綠色，表層不全角化細胞胞漿染粉紅色, *角化細胞胞漿呈桔黃色, 紅細胞染鮮紅色，粘液染淡藍色或粉紅色。
巴氏染色特點
細胞透明度好, 結(jié)構(gòu)清晰, 涂片色彩豐富而鮮艷, 因能顯示鱗狀上皮不同角化程度, 常用于陰道涂片測定雌激素水平。宮頸涂片和痰涂片內(nèi)分化差的小角化細胞癌顯示桔黃色胞漿, 在紅色壞死背景中特別突出, 不易漏診。因此本室宮頸涂片、痰涂片常規(guī)用巴氏染色。但巴氏染液多數(shù)用95百分比酒精配制，成本高, 染液配制麻煩, 染色步驟多, 而且染液易陳舊, 染色效果不穩(wěn)定, 因此基層醫(yī)療單位推廣有困難。EA50染液配方稍復(fù)雜, 但不易沉淀，染色效果較EA36穩(wěn)定。
