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上海哈靈生物科技有限公司

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細(xì)胞線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測(cè)試劑盒

2016-3-15  閱讀(590)

主要用途

 

細(xì)胞線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測(cè)試劑是一種旨在通過線粒體鈣離子特異性熒光探針Rhod-2,與鈣離子結(jié)合后,其熒光強(qiáng)度顯著增強(qiáng),在熒光分光光度儀下觀察相對(duì)熒光峰值的變化,來測(cè)定細(xì)胞線粒體中總鈣離子濃度而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的其適用于各種活體細(xì)胞(動(dòng)物、人體等)內(nèi)線粒體鈣離子的濃度檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定,檢測(cè)敏感。

 

技術(shù)背景

 

鈣是人體中的一種重要電介質(zhì)和礦物質(zhì),占1150克。其中99%的鈣以氟磷灰石鈣(calcium fluorophosphate apatite)形式存在于骨組織中。非骨組織鈣成分主要存在于細(xì)胞內(nèi)。鈣具有兩種主要形式:一種是非彌散型蛋白結(jié)合鈣,其構(gòu)成約40%至50%的血清中的總鈣含量;另一種為彌散型游離鈣,其進(jìn)一步分成具有活性的復(fù)合鈣(complexed calcium)和離子鈣(ionized calcium)。鈣對(duì)神經(jīng)肌肉興奮性(neuromuscular excitability)、血液凝固、酶的激活、離子跨膜運(yùn)輸、釋放神經(jīng)傳導(dǎo)介質(zhì)、信使傳導(dǎo)等方面起著重要作用。在細(xì)胞內(nèi),鈣離子主要儲(chǔ)存在線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器中。其中線粒體鈣離子在調(diào)節(jié)線粒體代謝、保持線粒體的ATP產(chǎn)量達(dá)到細(xì)胞需求,維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境鈣離子平衡方面起著重要作用。線粒體鈣的檢測(cè)包括沉淀法、EDTA鰲合滴定法、火焰光度法(flame photometry)、原子吸收分光光度法等技術(shù),但容易受到鈉、鉀、磷酸鹽、硫酸鹽的干擾,或者受限于儀器的特殊的要求,以及需要線粒體純化。Rhod-2,羅丹明123(rhodamine 123)的衍生產(chǎn)物,一種與鈣離子結(jié)合產(chǎn)生熒光,同時(shí)其正電荷特性,特異性地聚集在線粒體里, 由此用于測(cè)定線粒體內(nèi)鈣離子水平。在熒光分光光度儀下,激發(fā)波長550nm,散發(fā)波長590nm,來定量測(cè)定線粒體的鈣濃度。

 

產(chǎn)品內(nèi)容

 

清理液(Reagent A)       40毫升

染色液(Reagent B)  30微升

介導(dǎo)液(Reagent C)      600微升

飽和液(Reagent D)        2毫升

陰性液(Reagent E)        2毫升

產(chǎn)品說明書     1份

 

保存方式

 

保存染色液(Reagent B)和介導(dǎo)液(Reagent C)在-20℃冰箱里,避免光照;其余的保存在4冰箱里;有效保證6月

 

用戶自備

 

1.5毫升離心管:用于工作液配制的容器

細(xì)胞培養(yǎng)箱:用于染色孵育

黑色96孔板:用于樣品操作的容器

熒光酶標(biāo)儀:用于熒光分析

(共聚焦)熒光顯微鏡:用于熒光染色觀察



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