培養(yǎng)基免疫學(xué)方法檢測(cè)細(xì)菌抗原或抗體的方法簡介

　　在細(xì)菌診斷中利用免疫學(xué)的各種方法日益受到人們的極大關(guān)注，從而簡化了病原微生物的鑒定手續(xù)。

　　1．抗血清凝集技術(shù)

　　培養(yǎng)基早在1933年，Lancefield就成功地用多價(jià)血清對(duì)鏈球菌進(jìn)行了血清分型。隨著抗體制備技術(shù)的進(jìn)一步完善，尤其是單克隆抗體的制備，明顯提高了細(xì)菌凝集實(shí)驗(yàn)的特異性，今天廣泛用于細(xì)菌的分型和鑒定，如沙門氏菌、霍亂弧菌等。

　　2．乳膠凝集實(shí)驗(yàn)

　　將特異性的抗體包被在乳膠顆粒上，通過抗體與相應(yīng)的細(xì)菌培養(yǎng)基抗原結(jié)合，產(chǎn)生肉眼可見的凝集反應(yīng)。通常此法需獲得細(xì)菌純培養(yǎng)物，再將培養(yǎng)物與致敏乳膠反應(yīng)。業(yè)已用于鑒定大腸桿菌O157；H7 。

　　3．熒光抗體檢測(cè)技術(shù)

　　用于快速檢測(cè)細(xì)菌的熒光抗體技術(shù)主要有直接法和間接法。培養(yǎng)基直接法是在檢測(cè)樣品上直接滴加已知特異性熒光標(biāo)記的抗血清，經(jīng)洗滌后在熒光顯微鏡下觀察結(jié)果。間接法是在檢樣上滴加已知的細(xì)菌特異性抗體，待作用后經(jīng)洗滌，再加入熒光標(biāo)記的第二抗體。如研制成的抗沙門氏菌熒光抗體，用于750份食品樣品的檢測(cè)，結(jié)果表明與常規(guī)培養(yǎng)法符合率基本一致。

　　4．協(xié)同凝集試驗(yàn)（COA）

　　培養(yǎng)基業(yè)已證實(shí)，葡萄球菌A蛋白（SPA）具有與人及各種哺乳動(dòng)物IgG的Fc段結(jié)合的能力，而不影響抗體Fab段的活性。近年來國內(nèi)外學(xué)者采用抗體致敏的SPA檢測(cè)細(xì)菌即協(xié)同凝集試驗(yàn)。如Rahman等用協(xié)同凝集試驗(yàn)鑒定霍亂弧菌O1群的初代分離物做快速篩選，比常規(guī)法節(jié)省時(shí)間，對(duì)204份材料用兩種方法比較表明協(xié)同凝集試驗(yàn)具有較高的特異性和敏感性。

　　5．酶聯(lián)免疫測(cè)試技術(shù)

　　酶聯(lián)免疫技術(shù)的應(yīng)用，大大提高了檢測(cè)的敏感性和特異性，現(xiàn)已廣泛地應(yīng)用在病原微生物培養(yǎng)基的檢驗(yàn)。

　　應(yīng)用酶聯(lián)免疫技術(shù)制造的mini-Vidas全自動(dòng)免疫分析儀，是用熒光分析技術(shù)通過固相吸附器，用已知抗體來捕捉目標(biāo)生物體，培養(yǎng)基然后以帶熒光的酶聯(lián)抗體再次結(jié)合，經(jīng)充分沖洗，通過激發(fā)光源檢測(cè)，即能自動(dòng)讀出發(fā)光的陽性標(biāo)本，其優(yōu)點(diǎn)是檢測(cè)靈敏度高，速度快，可以在48小時(shí)的時(shí)間內(nèi)快速鑒定沙門氏菌、大腸桿菌O157：H7、單核李斯特菌，空腸彎曲桿菌和葡萄球菌腸毒素等。