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上海博麥德生物技術(shù)有限公司

人肺耐藥蛋白(LRP)ELISA試劑盒

時(shí)間:2013-11-13閱讀:276
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實(shí)驗(yàn)方法原理:人肺耐藥蛋白(LRP)ELISA試劑盒  

 T 細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí),受到非特異性有絲分裂原(如PHA、ConA)刺激后,可出現(xiàn)細(xì)胞體積增大,代謝旺盛,蛋白和核酸合成增加,即向淋巴母細(xì)胞轉(zhuǎn)化。淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率的高低可以反映機(jī)體的細(xì)胞免疫水平,因此可作為測(cè)定機(jī)體免疫功能的指標(biāo)之一。淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)有形態(tài)計(jì)數(shù)法、MTT 法和同位素法三種。MTT 法即四甲基偶氮唑鹽微量酶反應(yīng)比色法。MTT 是一種噻唑鹽,化學(xué)名3-4,5-二甲基-2-噻唑)-2,5-

試劑、試劑盒:人肺耐藥蛋白(LRP)ELISA試劑盒

1. RPMI1640 培養(yǎng)液2. Hank’s 3. 刀豆蛋白AConcanvalin A, ConA),用RPMI1640 液配成1mg/ml,分裝小瓶,冷凍保存4. MTT 1mg/ml5.

實(shí)驗(yàn)步驟:人肺耐藥蛋白(LRP)ELISA試劑盒

1. 小鼠脾細(xì)胞懸液的制備:取一個(gè)滅菌的平皿,加入5ml Hank’s液。頸椎脫臼法處死小鼠,取脾臟,放入平皿中,在鋼網(wǎng)上研磨并過(guò)篩,制成細(xì)胞懸液。取出100μl用于計(jì)數(shù)。將其余細(xì)胞懸液移入一離心管中,離心1500rpm,7min,(或1000rpm10min)棄去上清,用RPMI1640 培養(yǎng)液稀釋,制成2.5×106 / ml的脾細(xì)胞懸液,然后加入ConA使每孔zui終濃度為2μg/ml,同時(shí)做不加ConA的陰性對(duì)照孔。2. 將上述細(xì)胞懸液加入96 孔平底培養(yǎng)板中,每孔0.1ml3. 將培養(yǎng)板放入含有5%CO237培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48-72 小時(shí),在培養(yǎng)結(jié)束前4-6 小時(shí),于培養(yǎng)板各孔內(nèi)加入1mg/mlMTT液,10μl/孔。37培養(yǎng)6 小時(shí)。4. 各孔內(nèi)加入0.01M 鹽酸異丙醇110μl,30 分鐘內(nèi)(或加2%SDS 100ul/孔,過(guò)夜)用酶標(biāo)測(cè)定儀測(cè)OD 值,測(cè)定波長(zhǎng)570nm5. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果將實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組三個(gè)復(fù)孔的OD 值平均。轉(zhuǎn)化值=實(shí)驗(yàn)組的平均OD -對(duì)照組的平均OD 值。 注意事項(xiàng) 1. 由于本實(shí)驗(yàn)需要培養(yǎng)3 天,才能觀察結(jié)果。因此,在操作時(shí)應(yīng)注意無(wú)菌操作,避免細(xì)菌污染,導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)的失敗。2. 細(xì)胞操作要輕柔、迅速,以免細(xì)胞損傷影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

公司主營(yíng)產(chǎn)品:ELISA 試劑盒,ELISA免費(fèi)代測(cè),中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)品,生化試劑,科研抗體,美國(guó)ATCC細(xì)胞株,生物培養(yǎng)基等產(chǎn)品經(jīng)營(yíng):

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人*酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA試劑盒 Human glial fibrillary acidic protein,GFAP ELISA試劑盒 
人白三烯C4(LTC4)ELISA試劑盒 Human Leukotriene C4,LT-C4 ELISA試劑盒
人*(Cyt-C)ELISA試劑盒 Human Cytochrome-C,Cyt-C ELISA試劑盒
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人糖原磷酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA試劑盒 Human Glycogen phosphorylase MM,GP-MM ELISA試劑盒
人糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA試劑盒 Human Glycogen phosphorylase BB,GP-BB ELISA試劑盒
人脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒 Human lipoprotein α,Lp-α ELISA試劑盒
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人脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉(DPD)ELISA試劑盒 Human deoxypyridinoline,DPD ELISA試劑盒
人吡啶交聯(lián)物(PY)ELISA試劑盒 Human pyridinium crosslink/PyriLinks,PY ELISA試劑盒
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