本公司所銷(xiāo)售的昆蟲(chóng)PDH-E1elisa試劑盒只供科研，保證質(zhì)量，如有任何質(zhì)量問(wèn)題，本司一律包退包換，咨詢(xún)。

昆蟲(chóng)PDH-E1elisa試劑盒測(cè)試步驟：

（1）仔細(xì)切開(kāi)覆蓋在孔板上的箔片，從微孔板底部用手指輕輕頂出所用的孔板。注意不要損傷不使用的孔板上的條或孔，而且應(yīng)將其立即用塑料袋密封放入2-8℃的冰箱保存，以防止瓊脂變干；

（2）揭開(kāi)覆蓋在孔板上的箔片，每孔加入80mL牛奶樣品。并分別加入80mL的陰性和陽(yáng)性質(zhì)控，加入樣品時(shí)應(yīng)避免交叉污染；

（3）用密封膠將孔板密封，置于65℃恒溫箱或水浴箱中孵育直到陰性質(zhì)控轉(zhuǎn)化成淺黃綠色（參照每批質(zhì)量檢測(cè)報(bào)告,大約需要1小時(shí)45分鐘）。

注：如果是采用水浴進(jìn)行孵育的話，請(qǐng)注意避免水進(jìn)入微孔。樣品孵育時(shí)間不能超過(guò)質(zhì)檢報(bào)告中說(shuō)明的時(shí)間，否則檢測(cè)靈敏度會(huì)下降。

操作不當(dāng)將引起較大的誤差，以下敘述各個(gè)步驟中的影響因素：

1.加樣，加樣時(shí)速度不可太快，避免將標(biāo)本加在孔壁上部 ，并注意不要濺出或產(chǎn)生氣泡，產(chǎn)生氣泡可以減少標(biāo)本與包被物的接觸，降低試劑的敏感性。不要讓吸頭接觸孔底部，以防破壞包被物，吸附血清內(nèi)的蛋白，造成假陽(yáng)性。

2.溫育，溫育過(guò)程中，反應(yīng)板不宜疊放，以保證各板的溫度都能迅速平衡。

3.洗滌，洗滌是ELISA測(cè)定過(guò)程中決定實(shí)驗(yàn)成敗的一個(gè)關(guān)鍵步驟。其目的是去除反應(yīng)體系中與反應(yīng)無(wú)關(guān)的成分、未結(jié)合的酶結(jié)合物以及反應(yīng)過(guò)程中非特異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。

4.顯色，顯色是 ELISA中的zui后一步溫育反應(yīng)，顯色受時(shí)間和溫度的影響，一般37℃反應(yīng)30分鐘可使顯色充分，如果縮短反應(yīng)時(shí)間或者降低反應(yīng)溫度均可影響檢測(cè)的下限。

5.比色，ELISA顯色的結(jié)果必須通過(guò)酶標(biāo)儀進(jìn)行檢測(cè)，有兩個(gè)重要的原因：一是不同的個(gè)體的色覺(jué)存在差異，如果僅憑肉眼判斷，則結(jié)果重復(fù)性差，并且難以形成統(tǒng)一的判斷標(biāo)準(zhǔn)，尤其是對(duì)于HBeAb、HBcAb這樣的檢測(cè)項(xiàng)目；二是日益頻繁的醫(yī)療糾紛要求臨床實(shí)驗(yàn)室必須對(duì)ELISA檢測(cè)的原始吸光度值，陰陽(yáng)性判斷結(jié)果等原始數(shù)據(jù)進(jìn)行保存，否則面對(duì)醫(yī)療糾紛時(shí)將無(wú)法舉證。

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