產(chǎn)品名稱：大腸桿菌熱敏毒素elisa試劑盒

產(chǎn)品規(guī)格：48孔/96孔

保存條件：2-8℃

主要用途：科研檢測

大腸桿菌熱敏毒素elisa試劑盒操作步驟：

1.加樣：分別設(shè)空白孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔加待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。 

2.棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記抗小鼠IgG工作液100μl（取1μl*標(biāo)記抗體加99μl*標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），37℃，60分鐘。 

3.溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干。

4.依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見孔內(nèi)有明顯藍(lán)色，即可終止）。 

5.依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。 

6.用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測。

“"實(shí)驗(yàn)在做到嚴(yán)格要求的同時(shí)有著一些不能忽視的小細(xì)節(jié)：

1.用槍吸取液體時(shí)速度不能太快，以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。

2.液體全部加完后，可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動功能。

3.洗液不夠時(shí)，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可*保存。

4.吸取液體時(shí)，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。

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