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細(xì)胞庫

快速藥物敏感性測試(AST&DST)-Anopore氧化鋁膜

時間:2017/1/6閱讀:1748
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Whatman Anopore氧化鋁膜
用于快速藥物敏感性測試(AST&DST)

前言

藥物敏感性試驗(DST)常用于了解病原微生物對各種抗生素的敏感程度或耐受程度來指導(dǎo)臨床用藥。微生物生長在許多診斷過程中的收到速率的限值。然而分子方法僅在某些情況下能實施,基于培養(yǎng)基的方法仍然占據(jù)主流,運用Anopore氧化鋁膜來實現(xiàn)藥物敏感性實驗可基于微生物成像更快速的表型。致病微生物氧化鋁膜上較其他任何方式的生長而不易受限制,大大縮短了培養(yǎng)時間,且可以原位觀察致病微生物在同藥物作用時生長變化,即輕松實現(xiàn)致病微生物在氧化鋁膜上的培養(yǎng)、殺死、染色和原位成像等連續(xù)步驟。

操作步驟

1.孔徑為200nm的氧化鋁膜(Anopore)滅菌后置于適合的瓊脂平板上,通常為含有某待測抗生素的

Mueller-Hinton或Sabouraud培養(yǎng)基;

2.氧化鋁膜上注射待試驗的細(xì)菌或真菌,并置于CO2培養(yǎng)箱中37°C環(huán)境(40min至幾個小時);

3.接下來用熒光染料對附著在氧化鋁膜上的細(xì)胞進(jìn)行染色,真菌用Fun-1染色,細(xì)菌用Syto 9染色,染色過程通過氧化鋁膜中貫穿的納米孔進(jìn)行;

4.染色的微生物群直接用Olympus BX41落射熒光顯微鏡成像。

結(jié)論

多孔陶瓷膜Anopore做抗生素敏感性試驗(AST)對染色和原位成像極其有利,明顯加快了檢測速度,

特別檢測生長速率緩慢的真菌和結(jié)核桿菌

訂貨信息

貨號

名稱/孔徑

尺寸mm

數(shù)量

6809-7023

Anodisc 13, 200nm

∅13

100

6809-6022

Anodisc 25, 200nm

∅25

50

6809-5522

Anodisc 47, 200nm

∅47

50

注: 白色念球菌在 Anopore 表面可在 60min 內(nèi)觀察 到生長,毛癬菌則在 6h 后觀察 到生長,產(chǎn)氣腸桿菌在 25min 內(nèi)觀察 到生長 , 等等, 檢測 MIC 值都與 E 試驗法相當(dāng),且檢測時間更短。通過氧化鋁膜 Anopore 方法,耐 5/5 和 19/19 *氧下二胺嘧啶敏感的菌種均被測試,卻要比常規(guī)的培養(yǎng)基方法快 8 個小時。

下表為傳統(tǒng)方法與 Anopore 方法的對照:

??

參考文獻(xiàn) C. Ingham, M. de Lange, M. van den Ende, P.C. Wever, P.M. Schneeberger Jeroen Bosch Ziekenhuis, ‘s - Hertogenbosch, the Netherlan . The culture and antibiotic sensitivity testing (AS T) of pathogenic microorganisms on a highly porous ceramic (Anopore)

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