大鼠N端前腦鈉素(NT-proBNP)酶聯(lián)免疫分析
試劑盒使用說明書
本試劑盒僅供研究使用。
檢測范圍： 96T
250pg/ml - 8000pg/ml
使用目的：
本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中N 端前腦鈉素(NT-proBNP)含量。
實驗原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠N 端前腦鈉素(NT-proBNP)水平。大鼠N端前腦鈉素(NT-proBNP)ELISA試劑盒用純化的
大鼠N 端前腦鈉素(NT-proBNP)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次
加入N 端前腦鈉素(NT-proBNP)，再與HRP 標(biāo)記的N 端前腦鈉素(NT-proBNP)抗體結(jié)合，形
成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在HRP 酶的催化
下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的N 端前腦鈉素
(NT-proBNP)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算
樣品中大鼠N 端前腦鈉素(NT-proBNP)濃度。
試劑盒組成
1 30 倍濃縮洗滌液20ml×1 瓶7 終止液6ml×1 瓶
2 酶標(biāo)試劑6ml×1 瓶8 標(biāo)準(zhǔn)品（16000 pg/ml） 0.5ml×1 瓶
3 大鼠N端前腦鈉素(NT-proBNP)ELISA試劑盒酶標(biāo)包被板12 孔×8 條9 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1 瓶
4 樣品稀釋液6ml×1 瓶10 說明書1 份
5 顯色劑A 液6ml×1 瓶11 封板膜2 張
6 顯色劑B 液6ml×1/瓶12 密封袋1 個
標(biāo)本要求
1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能
馬上進(jìn)行試驗，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2．不能檢測含NaN3 的樣品，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
操作步驟
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：大鼠N端前腦鈉素(NT-proBNP)ELISA試劑盒本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀
釋。
8000 pg/ml 5 號標(biāo)準(zhǔn)品150μl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
4000 pg/ml 4 號標(biāo)準(zhǔn)品150μl 的5 號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2000 pg/ml 3 號標(biāo)準(zhǔn)品150μl 的4 號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1000 pg/ml 2 號標(biāo)準(zhǔn)品150μl 的3 號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
500 pg/ml 1 號標(biāo)準(zhǔn)品150μl 的2 號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2
2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、
待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，
然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5 倍）。大鼠N端前腦鈉素(NT-proBNP)ELISA試劑盒加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡
量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。
4. 配液：將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用。
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30 秒后棄去，如此
重復(fù)5 次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色
15 分鐘。
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 大鼠N端前腦鈉素(NT-proBNP)ELISA試劑盒測定：以空白空調(diào)零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。測定應(yīng)在加終止
液后15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
操作程序總結(jié)：
計算
3
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD 值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的
OD 值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD 值計算出標(biāo)
準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD 值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，
即為樣品的實際濃度。
注意事項
1．大鼠N端前腦鈉素(NT-proBNP)ELISA試劑盒試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未
用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。
3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間
控制在5 分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
4． 請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD 值
大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD 值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n 倍）后再測定，計
算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物請避光保存。
7．嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9．本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)。
保存條件及有效期
1．試劑盒保存：；2-8℃。
2．大鼠N端前腦鈉素(NT-proBNP)ELISA試劑盒有效期：6 個月

Anti-Defensin β1  防御素β1抗體
anti-DEK oncogene (DNA binding)  DEK癌基因結(jié)合蛋白
Anti-Defensin β2  防御素β2抗體
Anti-Deltex-1  DTX1 (Deltex protein 1)
Anti-Dengue Virus（Dengue virus type -2）  抗登革熱病毒抗體
Anti-Des antibody (Desmin)  結(jié)蛋白(抗體)
Anti-DFF-45/ICAD (DNA fragmentation factor-45)  DNA裂解因子抗體
Anti-Digoxin IgG （兔抗Dig-RCA）  兔抗抗體
Anti-DISC1（disrupted in schizophrenia1）(CT)  DISC1 C端抗體
Anti-DISC1（disrupted in schizophrenia1）（NT）  DISC1 N端抗體
anti-DJ-1  絲裂原依賴性癌基因蛋白抗體
Anti-DLX4 (Dsital-less homebox4 isoformα/β)  兔抗DLX4抗體
Anti-DMBT1 (Deleted in malignant brain tumor 1)  抑癌基因抗體
Anti-Dnmt1(DNA methyltransferase 1)  DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1抗體
Anti-Dnmt3a(cytosine-5)-methyltransferase 3A)  DNA甲基轉(zhuǎn)移酶-3α抗體
Anti-Dnmt3β (DNA (cytosine-5)-methyltransferase 3 β)  DNA甲基轉(zhuǎn)移酶-3β抗體
Anti-DPPA2 (developmental pluripotency associated gene2)  多能發(fā)育相關(guān)基因2抗體
Anti-DR3/TNF-αR/TRAMP (death receptor 3)  TNF-α膜受體抗體/DR3 死亡受體3抗體
Anti-DR4/APO2/TRAILR1 (Death receptor 4)  死亡受體4抗體
Anti-DTNBP1 (Dysbindin-1)  精神分裂癥易感基因抗體
Anti-DVL1 (dishevelled 1)  蓬亂蛋白1抗體
Anti-Dynamin 2（Mouse Anti-Human Dynamin-2 Monoclonal Antibody）  鼠抗人鳥苷三磷酸酶－發(fā)動蛋白2單克隆抗體
Anti-Dynamin 2（Anti-Human Dynamin-2 ）  兔抗人鳥苷三磷酸酶－發(fā)動蛋白2抗體
Anti-Dysbindin/rhogap92b  精神分裂癥易感基因抗體
Anti-E2F1  轉(zhuǎn)錄因子E2F-1抗體
Anti-E2F2  轉(zhuǎn)錄因子E2F-2抗體
Anti-E7 protein (Human papillomavirus type 16)  人乳頭瘤病毒16型E7抗體
Anti-EAAT1/Glast(Excitatory amino acid transporters 1)  膠質(zhì)細(xì)胞谷氨酸運(yùn)載蛋白1 抗體
Anti-EBNA-3 (EpsteinBarr nuclear antigens 3)  EB病毒編碼核蛋白-3抗體
Anti-ECE1（Endothelin Converting Enzyme 1）  內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶1ECE1抗體
Anti-ECG2 (sophagus cancer-related gene-2)  食道癌相關(guān)基因抗體
Anti-ECM1 (extracellular matrix protein 1)  細(xì)胞外基質(zhì)蛋白1抗體
Anti-ED-1 (Ectodermal Dysplasia 1)  外胚層發(fā)育不良抗體
Anti-EGF-R （Epidemal growth factor receptor）  表皮生長因子受體抗體
Anti-EGFR-ⅤⅢ  表皮生長因子受體-8抗體
Anti-Egr-1 （Early growth response 1）  早期反應(yīng)基因-1/應(yīng)急反應(yīng)生長基因1抗體
Anti-Emp1 (epithelial membrane protein 1)  表皮膜蛋白1抗體
anti-EMAb（Endometrium）  抗子宮內(nèi)膜抗體
Anti-Endostatin  內(nèi)皮抑素/內(nèi)皮他丁抗體
Anti-EpCAM（Epithelial cell adhesion molecule）  上皮細(xì)胞粘附分子/表皮細(xì)胞粘附分子抗體
Anti-EPEC-IgG O (Anti-Enteropathogenic E.coli )  大腸埃希桿菌O抗體
Anti-EphA2 R(Ephrin A2 Receptor)  酪氨酸蛋白激酶受體A2抗體
Anti-EphB2 R (Ephrin B2 Receptor)  酪氨酸蛋白激酶受體B2抗體
Anti-ER  雌激素受體

人熱休克蛋白27(HSP-27)ELISA試劑盒 Human heat shock protein 27,HSP-27 ELISA試劑盒
人血管抑素/血管穩(wěn)定蛋白(ANG)ELISA試劑盒  Human angiostatin,ANG ELISA試劑盒
人心型脂肪酸結(jié)合蛋白(h-FABP)ELISA試劑盒  Human heart fatty acid binding protein,h-FABP ELISA試劑盒
人血管舒緩激肽(BK)ELISA試劑盒  Human Bradykinin,BK ELISA試劑盒
人肌球蛋白輕鏈(MLC)ELISA試劑盒 Human Myosin light Chain,MLC ELISA試劑盒
人α-輔肌動蛋白3(ACTN-3)ELISA試劑盒 Human α-Actinin 3,ACTN-3 ELISA試劑盒
人超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISA試劑盒  Human high sensitivity C-Reactive Protein,hs-CRP ELISA試劑盒
人肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA試劑盒 Human Troponin Ⅰ,Tn-Ⅰ ELISA試劑盒
人血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒 Human Serum amyloid A,SAA ELISA試劑盒
人熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA試劑盒 Human Heat Shock Protein 60,HSP-60 ELISA試劑盒
人熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)ELISA試劑盒 Human Heat Shock Protein glycoprotein 96,HSP gp96 ELISA試劑盒
人心肌營養(yǎng)素1(CT-1)ELISA試劑盒 Human cardiotrophln 1,CT-1 ELISA試劑盒
人銅藍(lán)蛋白(CP/CER)ELISA試劑盒 Human Ceruloplasmin,CP/CER ELISA試劑盒
人熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒 Human Heat Shock Protein 90,HSP-90 ELISA試劑盒
人熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒 Human Heat Shock Protein 70,HSP-70 ELISA試劑盒
人熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA試劑盒 Human Heat Shock Protein 40,HSP-40 ELISA試劑盒
人熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒 Human Heat Shock Protein 20,HSP-20 ELISA試劑盒
人肌球蛋白(MYS)ELISA試劑盒 Human Myosin,MYS ELISA試劑盒
人凝溶膠蛋白(GS)ELISA試劑盒 Human Gelsolin,GS ELISA試劑盒
人C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒 Human C-Reactive Protein,CRP ELISA試劑盒
人醛固酮(ALD)ELISA試劑盒 human aldosterone,ALD ELISA試劑盒
人肌紅蛋白(MYO/MB)ELISA試劑盒 Human Myoglobin,MYO/MB ELISA試劑盒
人心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA試劑盒 Human cardiac troponin Ⅰ,cTn-ⅠELISA試劑盒
人血管生成素受體/含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域酪氨酸激酶1(Tie1)ELISA試劑盒 Human tyrosine kinase with immunoglobulin-like and EGF-like domains 1,Tie1 ELISA試劑盒 
人血管生成素2(ANG-2)ELISA試劑盒 Human Angiopoietin 2,ANG-2 ELISA試劑盒
人血管生成素1(ANG-1)ELISA試劑盒 Human Angiopoietin 1,ANG-1 ELISA試劑盒
人血管生長素(ANG)ELISA試劑盒 Human Angiogenin,ANG ELISA試劑盒
人血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA試劑盒 Human angiotension Ⅱ,ANG-Ⅱ ELISA試劑盒
人帕金森氏病2Parkin(Park2)ELISA試劑盒 Human Parkinson disease 2 parkin,Park2 ELISA試劑盒
人紐蛋白(VCL)ELISA試劑盒 Human vinculin,VCL ELISA試劑盒
人軸突生長誘向因子4(Ntn4)ELISA試劑盒 Human Netrin-4,Ntn4 ELISA試劑盒
人軸突生長誘向因子1(Ntn1)ELISA試劑盒 Human Netrin-1,Ntn1 ELISA試劑盒
人硫酸腦苷酯(SFT)ELISA試劑盒 Human sulfatide,SFT ELISA試劑盒
人再生基因蛋白IV(REG-4)ELISA試劑盒 Human regenerating gene Ⅳ,REG-4 ELISA試劑盒
人多功能蛋白聚糖(VS)ELISA試劑盒 human versican/PG-M/PG-350,VS ELISA試劑盒
人B細(xì)胞κ 輕肽基因增強(qiáng)子核因子抑制因子ε(Nfkbie)ELISA試劑盒  human nuclear factor of kappa light polypeptide gene enhancer in B-cells inhibitor epsilon,Nfkbie
人ADAM金屬肽酶含血小板反應(yīng)蛋白1基元4(ADAMTS4)ELISA試劑盒 human ADAM metallopeptidase with thrombospondin type 1 motif4,ADAMTS4 ELISA試劑盒
人類似RIKEN cDNA 4933429F08 基因 ELISA試劑盒 human similar to RIKEN cDNA 4933429F08 gene ELISA試劑盒
人孕酮和adipoQ受體家族成員Ⅶ(PAQR7)ELISA試劑盒 human progestin and adipoQ receptor family member Ⅶ,PAQR7 ELISA試劑盒
人集蛋白亞家族成員11(COLEC11)ELISA試劑盒 human collectin sub-family member 11,COLEC11 ELISA試劑盒
人絲氨酸蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子進(jìn)化枝3G(Serpina3g)ELISA試劑盒 human serine/cysteine peptidase inhibitor clade A member 3G,Serpina3g ELISA試劑盒
人類似RIKEN cDNA A630077B13 基因 ELISA試劑盒 human similar to RIKEN cDNA A630077B13 gene ELISA試劑盒
人類似RIKEN cDNA 3110050K21 基因 ELISA試劑盒 human similar to RIKEN cDNA 3110050K21 gene ELISA試劑盒
人類似RIKEN cDNA 2610307008 基因 ELISA試劑盒 human similar to RIKEN cDNA 2610307008 gene ELISA試劑盒
人類似RIKEN cDNA 2010109K09 基因 ELISA試劑盒 human similar to RIKEN cDNA 2010109K09 gene ELISA試劑盒
人ras同源物基因家族成員b(RHOB)ELISA試劑盒 human ras homolog gene family,memmber B,RHOB ELISA試劑盒
人假定蛋白LOC677340 ELISA試劑盒 human hypothetical protein LOC677340 ELISA試劑盒
人假定蛋白LOC433328 ELISA試劑盒 human hypothetical protein LOC433328 ELISA試劑盒
人髓樣分化因子初次應(yīng)答基因88(MYD88)ELISA試劑盒 human myeloid differentiation primary response gene 88,MYD88 ELISA試劑盒
人干擾素活化基因205(Ifi205)ELISA試劑盒 human interferon activated gene 205,Ifi205 ELISA試劑盒
人組織相容性2-K1-K 區(qū)(H2-K1)ELISA試劑盒 human Histocompatibility 2-K1-K region,H2-K1 ELISA試劑盒
人白細(xì)胞免疫球蛋白樣受體亞家族B成員4(LILRB4)ELISA試劑盒 human leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily B member 4,LILRB4 ELISA試劑盒
人C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族4成員E(CLEC4E)ELISA試劑盒 human C-type lectin domain family 4 member e,CLEC4E ELISA試劑盒
人假定蛋白LOC677168 ELISA試劑盒 human Hypothetical protein LOC677168 ELISA試劑盒
人淋巴細(xì)胞抗原6復(fù)合物基因座A(Ly6a)ELISA試劑盒 human lymphocyte antigen 6 complex locus A,Ly6a ELISA試劑盒
人嗜酸性白血球相關(guān)之RNA水解酵素家族成員1(EAR1)ELISA試劑盒 human eosinophil-associated ribonuclease A family member 1,EAR1 ELISA試劑盒
人混合系列蛋白激酶樣結(jié)構(gòu)域(MLKL)ELISA試劑盒 human mixed lineage kinase domain-like,MLKL ELISA試劑盒
人過氧化物酶體增殖激活物受體γ輔激活因子1α(PPARGC1)ELISA試劑盒 human peroxisome proliferative activated receptor gama coactivator 1 alpha,PPARGC1 ELISA試劑盒
人類似cDNA順序BC027382 ELISA試劑盒 human similar to cDNA sequence BC027382 ELISA試劑盒
人類似RIKEN cDNA 4931408D14 基因 ELISA試劑盒 human similar to RIKEN cDNA 4931408D14 gene ELISA試劑盒
人REST協(xié)阻抑因子3(RCOR3)ELISA試劑盒 human REST corepressor 3,RCOR3 ELISA試劑盒
人集蛋白亞家族成員11(COLEC11)ELISA試劑盒 Human collectin sub-family member 11,COLEC11 ELISA試劑盒