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DRG神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)方法
我的經(jīng)驗(yàn)是DRG取出來(lái)后,放在冷的Pucks solution中 (in mM) 171 NaCl, 6.7 KCl, 1.6
Na2PO4, 0.5 KH2PO4, 6 D-glucose, pH 7.3.,將其中樞和外周端的軸突剪去后,轉(zhuǎn)入含10ng/ml
papain的Puck's溶液中,37°C消化10-15min,離心去上清后加入含1 mg/ml collagenase 1A和 2.5
mg/ml dispase的F-12細(xì)胞培養(yǎng)液,輕輕搖勻后37°C消化10-15min,離心去上清后重新加入F-12細(xì)胞培養(yǎng)液,然后用不同口徑的玻璃吸管輕輕吹打至無(wú)明顯團(tuán)塊為止,zui后將此懸液鋪盤于培養(yǎng)皿中常規(guī)培養(yǎng)即可。
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