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ELISA試劑盒測定方式辦法
ELISA試劑盒已成為剖析化學(xué)領(lǐng)域中的前沿課題,是一種特別的試劑剖析辦法,是在免疫酶技能的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種新式的免疫測定技能。ELISA試劑盒該法由品種和變化可分為雙抗體夾心法、間接法、競爭法、雙位點一步法、捕獲法測IgM抗體、使用親和素和生物素的ELISA,今日咱們就來看看ELISA試劑盒準確測定方法總結(jié)。
一、定量測定
ELISA操作過程雜亂,影響反響因素較多,特別是固相載體的包被難到達各個體之間的一致,因此在定量測定中,每批測驗均須用一系列不一樣濃度的參閱規(guī)范品在相同的條件下制造規(guī)范曲線。測定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA試劑盒,規(guī)范曲線的范圍通常較寬,曲線zui高點的吸光度可接近2.0,制作時常用半對數(shù)紙,以檢查物的濃度為橫坐標,以吸光度為縱坐標,將各濃度的值逐點銜接,所得曲線通常呈S形,其頭、尾部曲線趨于平整,中央較呈直線的有些是的檢查區(qū)域。
二、定性測定
ELISA試劑盒定性測定的成果判別是對受檢標本中是不是含有待測抗原或抗體作出"有"或"無"的簡略回答,分別用"陽性"、"陰性"表明。"陽性"表明該標本在該測定系統(tǒng)中有反響。"陰性"則為無反響。用定性判別法也可得到半定量成果,即用滴度來表明反響的強度,其實質(zhì)仍是一個定性實驗。ELISA試劑盒在這種半定量測定中,將標本作一系列稀釋后進行實驗,呈陽性反響的zui高稀釋度即為滴度。依據(jù)滴度的凹凸,能夠判別標本反響性的強弱,這比調(diào)查不稀釋標本呈色的深淺判別為強陽性、弱陽性更具定量意義。
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