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超氧化物歧化酶(SOD)測試盒說明書
一、實驗儀器:
試管、微量移液器、旋渦混勻器、恒溫水浴鍋、可見分光光度計(550nm 波長) 。
超氧化物歧化酶(SOD)測試盒說明書 二、適用范圍:
本試劑盒采用黃嘌呤氧化酶法(羥胺法)測定SOD 活力??蓽y血清(漿)、腦脊液、胸水、腹水、腎
透析液、尿液、紅細胞、白細胞、血小板、心肌培養(yǎng)細胞、腫瘤培養(yǎng)細胞、各種動植物細胞、
及亞細胞水平(線粒體、微粒體)中的SOD 活力,并可檢測微生物、藥物、食品、飲料、化妝品中的
SOD 活力。
三、操作方法:
試 劑 測 定 管 對 照 管
試劑一(ml) 1.0 1.0
樣品(ml) a*
蒸餾水(ml) a*
試劑二(ml) 0.1 0.1
試劑三(ml) 0.1 0.1
試劑四(ml) 0.1 0.1
用旋渦混勻器充分混勻,置37℃恒溫水浴40 分鐘
顯色劑(ml) 2 2
混勻,室溫放置 10 分鐘,于波長 550nm 處,1cm光徑比色杯,蒸餾水調(diào)零,比色。
注1:a*代表樣本取樣量和雙蒸水取樣量;
注2:紅細胞中只有CuZn-SOD, 測紅細胞中SOD可以參照T-SOD活力的測定。
四、計算公式:
1、血清(漿)、心肌灌流液、腎透析液、細胞培養(yǎng)液中SOD 活力計算:
50% (/ )
SOD
Uml
−
=÷ ××
活力 反應(yīng)體系的 樣本測試前的 對照OD值 測定OD值
對照OD值 稀釋倍數(shù) 稀釋倍數(shù)
超氧化物歧化酶(SOD)測試盒說明書
2、組織勻漿中 SOD 活力計算:
50% () ) (/)
SOD
ml Umgprot mgprot ml
=÷ ×÷
組織中 活力 待測樣本蛋白濃度 對照OD值-測定OD值 反應(yīng)液總體積
對照OD值 取樣量 (/
3、紅細胞中SOD 活力的計算:
1
50) /)
SOD ml
UgHb gHbml
=÷ × ×× ÷
紅細胞中 反應(yīng)液 血紅蛋白含量 對照OD值-測定OD值 抽提液總量 % 對照OD值 測定抽提液量 采血量 活力( / 總體積 (
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