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平末端DNA加A試劑盒說(shuō)明資料

時(shí)間:2018/1/11閱讀:1441
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For Research Use Only僅供研究用

平末端DNAA試劑盒

說(shuō)明書(shū)

產(chǎn)品介紹:

由Pfu、Pwo、Vent或KOD等有3’→5’外切酶活性的高保真DNA聚合酶擴(kuò)增的PCR產(chǎn)物為不帶A尾的平末端DNA段,如該平末端DNA段需要和T載體相連接,需要先利用Taq DNA polymerase在平末端段后加上A尾后才能與T載體的T頭互補(bǔ)連接。本試劑盒提供了加A尾需要的所有成分,可以在20分鐘左右完成整個(gè)過(guò)程。

產(chǎn)品組成

試劑盒組成

(25次)

(50次)

Taq DNA polymerase

25ul

50ul

10×A-tailing buffer

25ul

50ul

dATP Mix

25ul

50ul

說(shuō)明書(shū)

一份

一份

平末端DNA加A試劑盒說(shuō)明資料操作步驟:

  • 平末端PCR產(chǎn)物用PCR純化(無(wú)非特異擴(kuò)增)或者膠回收純化(有非特異擴(kuò)增)。

2 . 純化好的平末端 DNA 段按以下反應(yīng)體系加 A 尾 :

dATP Mix

1ul

10 x A-tailing buffer

1ul

Taq DNA polymerase

1ul

3 . 輕輕混勻后 72 ℃ 保溫 20 - 30 分鐘。(可在 PCR 儀上操作。)

4 . 加 A 尾的產(chǎn)物可以不需要再次清潔或者膠回收純化,可直接用于連接反應(yīng)。

平末端DNA加A試劑盒說(shuō)明資料儲(chǔ)存: -20℃ 保存, 避免反復(fù)凍融.

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