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平末端DNA加A試劑盒
說(shuō)明書(shū)
產(chǎn)品介紹:
由Pfu、Pwo、Vent或KOD等有3’→5’外切酶活性的高保真DNA聚合酶擴(kuò)增的PCR產(chǎn)物為不帶A尾的平末端DNA段,如該平末端DNA段需要和T載體相連接,需要先利用Taq DNA polymerase在平末端段后加上A尾后才能與T載體的T頭互補(bǔ)連接。本試劑盒提供了加A尾需要的所有成分,可以在20分鐘左右完成整個(gè)過(guò)程。
產(chǎn)品組成
試劑盒組成 | (25次) | (50次) |
Taq DNA polymerase | 25ul | 50ul |
10×A-tailing buffer | 25ul | 50ul |
dATP Mix | 25ul | 50ul |
說(shuō)明書(shū) | 一份 | 一份 |
平末端DNA加A試劑盒說(shuō)明資料操作步驟:
2 . 純化好的平末端 DNA 段按以下反應(yīng)體系加 A 尾 :
dATP Mix | 1ul |
10 x A-tailing buffer | 1ul |
Taq DNA polymerase | 1ul |
3 . 輕輕混勻后 72 ℃ 保溫 20 - 30 分鐘。(可在 PCR 儀上操作。)
4 . 加 A 尾的產(chǎn)物可以不需要再次清潔或者膠回收純化,可直接用于連接反應(yīng)。
平末端DNA加A試劑盒說(shuō)明資料儲(chǔ)存: -20℃ 保存, 避免反復(fù)凍融.
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