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微小RNA(miRNA)是一類(lèi)內(nèi)源性非編碼小分子RNA(約22個(gè)核苷酸),通過(guò)與靶信使RNA(mRNA)形成RNA誘導(dǎo)的基因沉默復(fù)合物(RNA-induced silencing complex, RISC)參與轉(zhuǎn)錄后基因表達(dá)的調(diào)控,在多種生理學(xué)和病理學(xué)過(guò)程的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重大作用。大量研究工作表明某些miRNA的表達(dá)水平能夠很好地反映許多重大疾病所處的發(fā)展階段,可以作為疾病早期診斷的標(biāo)志物,因此miRNA的檢測(cè)對(duì)于其生物功能的研究及疾病的臨床診斷都具有重要意義。由于miRNA分子量和表達(dá)水平都很低,因此需要極其靈敏的定量分析工具。
近日,中國(guó)科學(xué)院蘇州生物醫(yī)學(xué)工程技術(shù)研究所助理研究員繆鵬等提出了一種超靈敏的miRNA檢測(cè)方法:設(shè)計(jì)四條單鏈DNA組成DNA四面體納米結(jié)構(gòu),通過(guò)底面三巰基與金電極牢固結(jié)合;待測(cè)樣本中的miRNA可打開(kāi)DNA四面體頂部的頸環(huán)結(jié)構(gòu)用以捕獲DNA修飾的金納米顆粒;隨后引發(fā)雜交鏈?zhǔn)椒磻?yīng),將大量銀納米顆粒固定于電極表面;通過(guò)檢測(cè)銀納米顆粒的溶出電流信號(hào),建立檢測(cè)miRNA濃度的標(biāo)準(zhǔn)曲線。研究結(jié)果表明該檢測(cè)方法靈敏度*,不依賴(lài)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),可用于細(xì)胞樣本內(nèi)miRNA的檢測(cè),在生物學(xué)基礎(chǔ)研究和臨床診斷上都具有潛在的應(yīng)用價(jià)值。
相關(guān)結(jié)果以封面形式刊載于Chem. Commun., 2015, 51, 15629。
以上工作得到國(guó)家自然科學(xué)基金的支持。
金、銀納米顆粒TEM,DLS表征
金納米顆粒輔助信號(hào)放大
檢測(cè)不同濃度miRNA(10-16-10-7M)的線性?huà)呙璺矆D
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