人腎小球系膜細(xì)胞 HMC齊一生物科技（上海）有限公司是一家專(zhuān)業(yè)生產(chǎn)和銷(xiāo)售各種生化試劑,細(xì)胞株、原代細(xì)胞、菌種、醫(yī)藥中間體,標(biāo)準(zhǔn)品和對(duì)照品的大型化學(xué)科技公司.齊一生物科技（上海）有限公司：.Web:www.qiyibio。。ｃｏｍ

人腎小球系膜細(xì)胞 HMC細(xì)胞培養(yǎng)方法 
1、收到細(xì)胞，請(qǐng)查看瓶子是否有破裂，培養(yǎng)基是否漏出，是否渾濁，如有請(qǐng)盡快。
2、收到細(xì)胞，如包裝完好，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞。,由于運(yùn)輸過(guò)程中的問(wèn)題，細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來(lái)，顯微鏡下觀察會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況，出現(xiàn)此狀態(tài)時(shí)，請(qǐng)不要打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶，應(yīng)立即將培養(yǎng)瓶置于細(xì)胞培養(yǎng)箱里靜止3-5小時(shí)左右，讓細(xì)胞先穩(wěn)定下，再于顯微鏡下觀察，此時(shí)多數(shù)細(xì)胞會(huì)重新貼附于瓶壁。如細(xì)胞仍不能貼壁，請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力，如臺(tái)盼藍(lán)染色證實(shí)細(xì)胞活力正常請(qǐng)按懸浮細(xì)胞的方法處理
3. 收到細(xì)胞時(shí)如無(wú)異常情況 ，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過(guò)80%匯合度時(shí)，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基吸出，留下 5-10ML培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)：超過(guò)80%匯合度時(shí)，請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液，1000轉(zhuǎn)/分鐘離心3分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。
4，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，蓋子微微擰松。吸出的培養(yǎng)基可以保存在滅菌過(guò)的瓶子里，存放于4℃冰箱，以備不時(shí)之需。
5 、24小時(shí)后，細(xì)胞形態(tài)已恢復(fù)并貼滿瓶壁，就可以傳代了。（貼壁細(xì)胞）將培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基倒去，加3-5ml（以能覆蓋細(xì)胞生長(zhǎng)面為準(zhǔn)）PBS或Hanks’液洗滌后棄去。加0.5-1ml  0.25%含EDTA的胰酶消化，消化時(shí)間以具體細(xì)胞為準(zhǔn)，一般1-3分鐘，不超過(guò)5分鐘?？梢苑湃?7℃培養(yǎng)箱消化。輕輕晃動(dòng)瓶壁，見(jiàn)細(xì)胞脫落下來(lái)，加入3-5ml培養(yǎng)基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細(xì)胞，使之*脫落，然后將溶液吸入離心管內(nèi)離心，1000rpm/5min。棄上清，視細(xì)胞數(shù)量決定分瓶數(shù)，一般一傳二，如細(xì)胞量多可一傳三，有些細(xì)胞不易傳得過(guò)稀，有些生長(zhǎng)較快的細(xì)胞則可以多傳幾瓶，以具體細(xì)胞和經(jīng)驗(yàn)為準(zhǔn)。（懸浮細(xì)胞）用移液管輕輕吹打瓶壁，直接將溶液吸入離心管離心即可。
6，貼壁細(xì)胞 ，懸浮細(xì)胞。嚴(yán)格無(wú)菌操作。換液時(shí)，換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和換新鮮的培養(yǎng)液，37度    5%CO2 培養(yǎng)
7.  收到細(xì)胞后，請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞，用恰當(dāng)方式處理細(xì)胞。若懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)離心收集細(xì)胞，接種到一個(gè)新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液，使用新鮮配制的培養(yǎng)基，使用進(jìn)口胎牛血清. 剛接到細(xì)胞，若細(xì)胞不多時(shí) 血清濃度可以加到15％去培養(yǎng)。若細(xì)胞迏到80%左右 ，血清濃度還是在10％。
培養(yǎng)基參考
500ml基礎(chǔ)培養(yǎng)基（含：必需與非必需氨基酸、維他命、有機(jī)與無(wú)機(jī)成分、激素、生長(zhǎng)因子與微量元素）、細(xì)胞生長(zhǎng)添加劑、抗生素/抗菌素溶液或青霉素/鏈霉素（P/S）溶液、FBS，適合在飽和濕度為5%CO2與95%空氣的培養(yǎng)箱中使用
美國(guó)ATCC簡(jiǎn)介：美國(guó)菌種保藏中心， 又稱(chēng)美國(guó)模式菌種收集中心(ATCC)，是位于馬里蘭洲洛克菲勒的一家私營(yíng)的，非贏利性組織。目前它可以提供各種動(dòng)植物細(xì)胞、標(biāo)準(zhǔn)品、菌株達(dá)兩萬(wàn)多種。ATCC成立于1925年，是世界上zui大的生物資源中心，由美國(guó)14家生化、醫(yī)學(xué)類(lèi)行業(yè)協(xié)會(huì)組成的理事會(huì)負(fù)責(zé)管理，是一家性、非盈利生物標(biāo)準(zhǔn)品資源中心。ATCC向發(fā)布其獲取、鑒定、保存及開(kāi)發(fā)的生物標(biāo)準(zhǔn)品，推動(dòng)科學(xué)研究的驗(yàn)證、應(yīng)用及進(jìn)步 ATCC可以提供以下類(lèi)別生物標(biāo)準(zhǔn)品：細(xì)胞株（3000多種）；菌株（15000多種）；動(dòng)植物病毒株（2500多種）以及重組物質(zhì)等。

現(xiàn)已成為可信賴的活體微生物、細(xì)胞系等獲得、保存和發(fā)放的國(guó)家資源中心。ATCC有29,000多種不同品系可靠的動(dòng)物細(xì)胞和微生物培養(yǎng)體，它能滿足各科學(xué)團(tuán)體對(duì)可信賴品系的需要。僅1981年就有39,000多培養(yǎng)物發(fā)放給*的科學(xué)工作者，并成功地用冷凍和冷凍干燥的方法保存各種細(xì)胞品系。 ATCC是一個(gè)非(學(xué)會(huì)單位)無(wú)利潤(rùn)的公司，由各科學(xué)組織推選成員組成理事會(huì)進(jìn)行管理?，F(xiàn)有工作人員125人。參加的科學(xué)團(tuán)體有：美國(guó)免疫協(xié)會(huì)、美國(guó)生物化學(xué)會(huì)、美國(guó)細(xì)胞生物學(xué)會(huì)、美國(guó)微生物學(xué)會(huì)、美國(guó)動(dòng)物學(xué)會(huì)、美國(guó)遺傳學(xué)會(huì)、原生動(dòng)物學(xué)會(huì)和組織培養(yǎng)協(xié)會(huì)等16個(gè)學(xué)術(shù)組織。在ATCC可利用各種材料以及工具和設(shè)備進(jìn)行廣泛的研究。主要研究項(xiàng)目有：酶聯(lián)免疫吸附分析技術(shù)(ELISA)，真核細(xì)胞轉(zhuǎn)錄的調(diào)控，雜交瘤、淋巴類(lèi)和髓類(lèi)以及其他細(xì)胞系的建立，人突變細(xì)胞系的基因蛋白質(zhì)，借助計(jì)算機(jī)進(jìn)行鑒別分析，培養(yǎng)物的特征鑒別和保存技術(shù)的改進(jìn),關(guān)于化學(xué)致癌、致畸和致突變的。

大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子B(VEGF-B)ELISA 試劑盒
大鼠白介素12(IL-12/P40)ELISA 試劑盒
大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子C(VEGF-C)ELISA 試劑盒
大鼠白介素11(IL-11)ELISA 試劑盒
大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白4(IGFBP-4)ELISA 試劑盒
大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)ELISA 試劑盒
大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子D(VEGF-D)ELISA 試劑盒
大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白2(IGFBP-2)ELISA 試劑盒
大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1(VEGFR-1/Flt1)ELISA 試劑盒
大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)ELISA 試劑盒 
大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體2(VEGFR-2/Flk-1)ELISA 試劑盒
大鼠肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)ELISA 試劑盒
大鼠糖蛋白130(gp130)ELISA 試劑盒
大鼠生長(zhǎng)激素(GH)ELISA 試劑盒
大鼠粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA 試劑盒
大鼠中性粒細(xì)胞趨化蛋白2(NAP-2/CXCL7)ELISA 試劑盒
大鼠FMS樣酪氨酸激酶3(Flt3)ELISA 試劑盒
大鼠FMS樣酪氨酸激酶3配體(Flt3L)ELISA 試劑盒
大鼠堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子9(bFGF-9)ELISA 試劑盒
大鼠堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子4(bFGF-4)ELISA 試劑盒
大鼠堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子6(bFGF-6)ELISA 試劑盒
大鼠酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子1(aFGF-1)ELISA 試劑盒
大鼠凋亡相關(guān)因子配體(FASL) ELISA 試劑盒 
大鼠凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)ELISA 試劑盒
大鼠紅細(xì)胞生成素受體(EPOR)ELISA 試劑盒
大鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)ELISA 試劑盒 
大鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子(ECF)ELISA 試劑盒
大鼠內(nèi)分泌腺來(lái)源的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(EG-VEGF)ELISA 試劑盒
大鼠1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)ELISA 試劑盒 
大鼠可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)酶聯(lián)免疫分析大鼠可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)酶聯(lián)免疫分析體(sEPCR)ELISA 試劑盒
大鼠CD30分子(CD30)ELISA 試劑盒
大鼠E鈣黏蛋白/上皮鈣黏蛋白(E-Cad)ELISA 試劑盒
大鼠β細(xì)胞素(BTC)ELISA 試劑盒 
大鼠血管生成素1(ANG-1)ELISA 試劑盒
大鼠血管生長(zhǎng)素(ANG)ELISA 試劑盒
大鼠角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)ELISA 試劑盒
大鼠白細(xì)胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA 試劑盒
大鼠白介素9(IL-9)ELISA 試劑盒
大鼠巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子(MIF)ELISA 試劑盒
大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α(TGF-α)ELISA 試劑盒
大鼠孕激素/孕酮(PROG)ELISA 試劑盒
大鼠雌激素(E)ELISA 試劑盒
大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA 試劑盒 
大鼠白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA 試劑盒
大鼠脂聯(lián)素(ADP)ELISA 試劑盒
大鼠游離β絨毛膜促性腺激素(f-βCG)ELISA 試劑盒
大鼠醛固酮(ALD)ELISA 試劑盒
大鼠去甲腎上腺素(NA)ELISA 試劑盒
大鼠前列腺素F(PGF)ELISA 試劑盒
大鼠前列腺素E1(PGE1)ELISA 試劑盒
大鼠內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA 試劑盒
大鼠血管舒緩激肽(BK)ELISA 試劑盒
大鼠抵抗素(Resistin)ELISA 試劑盒
大鼠催乳素(PRL)ELISA 試劑盒
大鼠促生長(zhǎng)激素釋放激素(GRH)ELISA 試劑盒
大鼠促卵泡素(FSH)ELISA 試劑盒
大鼠雌二醇受體(ER)ELISA 試劑盒
大鼠前心鈉肽(Pro-ANP)ELISA 試劑盒
大鼠大內(nèi)皮素(Big ET)ELISA 試劑盒
大鼠大內(nèi)皮素(Big ET)ELISA 試劑盒
大鼠遲現(xiàn)抗原(VLA)ELISA 試劑盒
大鼠降鈣素(CT)ELISA 試劑盒
大鼠骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA 試劑盒
大鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)ELISA 試劑盒
大鼠促甲狀腺素(TSH)ELISA 試劑盒 
大鼠脫氫表雄酮硫酸酯(DHEA-S)ELISA 試劑盒
Phenyl Sefinose 6 Fast Flow (low sub，LS) 標(biāo)準(zhǔn)載量苯基疏水色譜柱料
Phenyl Sefinose 6 Fast Flow (high sub,HS) 高載量苯基疏水色譜柱料
Phenyl Sefinose 6 Fast Flow (high sub,HS) 高載量苯基疏水色譜柱料
Blue SefinoseTM 6 Fast Flow 蘭色色譜柱料
Blue SefinoseTM 6 Fast Flow 蘭色色譜柱料
Protein G SefinoseTM Resin (Settled Resin)
Protein G SefinoseTM Resin (Settled Resin)
NHS-activated SefinoseTM 4 Fast Flow
SG-Arginine-C?
SG-Aspartic-N?
SG-Chymotrypsin?
SG-Glutamic-C?
SG-Lysine-C?
SATA
Protein Stains L無(wú)毒型蛋白質(zhì)快速染色試劑盒
BCA Protein Assay KitBCA蛋白質(zhì)定量檢測(cè)試劑盒
Bradford Protein Assay KitBradford 蛋白質(zhì)定量檢測(cè)試劑盒
Bradford Protein Assay KitBradford 蛋白質(zhì)定量檢測(cè)試劑盒
Modified Bradford Protein Assay Kit改良型Bradford蛋白濃度測(cè)定試劑盒
Modified BCA Protein Assay Kit 改良型BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒
Micro BCA Protein Assay KitBCA法微量蛋白濃度測(cè)定試劑盒
Non-Interference Protein Assay Kit非干擾型蛋白濃度測(cè)定試劑盒
Lowry Protein Assay Kit福林酚蛋白濃度測(cè)定試劑盒
Lowry Protein Assay Kit福林酚蛋白濃度測(cè)定試劑盒
Modified Lowry Protein Assay Kit 改良型Lowry法蛋白濃度測(cè)定試劑盒
Stable Lowry Protein Assay Kit 穩(wěn)定型Lowry法蛋白濃度測(cè)定試劑盒
BSA牛血清白蛋白溶液
Triton X-405
Triton X-405
Folin-Phenol Reagent 福林酚蛋白濃度測(cè)定試劑
Sulfo-NHS-Biotin
Sulfo NHS LC Biotin
NHS LC Biotin
Sulfo NHS
Sulfo NHS
Iodination Reagent
Iodination Reagent
Traut's Reagent
Western-Blot-Re-Probe SolutionWestern Blots---印跡膜再生液