人慢性骨髓性白血病細胞系 K562齊一生物科技（上海）有限公司產(chǎn)品已被廣泛應用于化學、化工、生命科學的基礎(chǔ)研究和開發(fā)應用、制藥、疾病診斷與控制、人口與健康、生物技術(shù)等諸多領(lǐng)域.客戶遍布國內(nèi)各大學、研究所、醫(yī)院、衛(wèi)生防疫、商品檢驗檢疫、制藥公司、生物技術(shù)公司和食品工業(yè)等單位.齊一生物科技（上海）有限公司：.Web:www.qiyibio。。ｃｏｍ

人慢性骨髓性白血病細胞系 K562細胞培養(yǎng)方法 
1、收到細胞，請查看瓶子是否有破裂，培養(yǎng)基是否漏出，是否渾濁，如有請盡快。
2、收到細胞，如包裝完好，請在顯微鏡下觀察細胞。,由于運輸過程中的問題，細胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來，顯微鏡下觀察會出現(xiàn)細胞懸浮的情況，出現(xiàn)此狀態(tài)時，請不要打開細胞培養(yǎng)瓶，應立即將培養(yǎng)瓶置于細胞培養(yǎng)箱里靜止3-5小時左右，讓細胞先穩(wěn)定下，再于顯微鏡下觀察，此時多數(shù)細胞會重新貼附于瓶壁。如細胞仍不能貼壁，請用臺盼藍染色法鑒定細胞活力，如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理
3. 收到細胞時如無異常情況 ，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過80%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基吸出，留下 5-10ML培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)：超過80%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液，1000轉(zhuǎn)/分鐘離心3分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。
4，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，蓋子微微擰松。吸出的培養(yǎng)基可以保存在滅菌過的瓶子里，存放于4℃冰箱，以備不時之需。
5 、24小時后，細胞形態(tài)已恢復并貼滿瓶壁，就可以傳代了。（貼壁細胞）將培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基倒去，加3-5ml（以能覆蓋細胞生長面為準）PBS或Hanks’液洗滌后棄去。加0.5-1ml  0.25%含EDTA的*消化，消化時間以具體細胞為準，一般1-3分鐘，不超過5分鐘?？梢苑湃?7℃培養(yǎng)箱消化。輕輕晃動瓶壁，見細胞脫落下來，加入3-5ml培養(yǎng)基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細胞，使之*脫落，然后將溶液吸入離心管內(nèi)離心，1000rpm/5min。棄上清，視細胞數(shù)量決定分瓶數(shù)，一般一傳二，如細胞量多可一傳三，有些細胞不易傳得過稀，有些生長較快的細胞則可以多傳幾瓶，以具體細胞和經(jīng)驗為準。（懸浮細胞）用移液管輕輕吹打瓶壁，直接將溶液吸入離心管離心即可。
6，貼壁細胞 ，懸浮細胞。嚴格無菌操作。換液時，換新的細胞培養(yǎng)瓶和換新鮮的培養(yǎng)液，37度    5%CO2 培養(yǎng)
7.  收到細胞后，請鏡下觀察細胞，用恰當方式處理細胞。若懸浮的細胞較多，請離心收集細胞，接種到一個新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液，使用新鮮配制的培養(yǎng)基，使用進口胎牛血清. 剛接到細胞，若細胞不多時 血清濃度可以加到15％去培養(yǎng)。若細胞迏到80%左右 ，血清濃度還是在10％。
培養(yǎng)基參考
500ml基礎(chǔ)培養(yǎng)基（含：必需與非必需氨基酸、維他命、有機與無機成分、激素、生長因子與微量元素）、細胞生長添加劑、抗生素/抗菌素溶液或*/*（P/S）溶液、FBS，適合在飽和濕度為5%CO2與95%空氣的培養(yǎng)箱中使用

一、細胞操作參考書
二、生長特性：貼壁    懸浮
三、細胞生長條件：
培養(yǎng)基                  90%              （GIBCO）
血清              10%  FBS（GIBCO）
溫度                       37℃
空氣條件      5% CO2，,95% AIR
生長代數(shù)    P4
凍存條件    培養(yǎng)基70%、血清20%、DMSO10%
四、組成：
組份    規(guī)格
細胞一瓶    T25
細胞培養(yǎng)與操作說明    1份
五、細胞接收后的操作流程與注意事項
1.如果細胞為貼壁細胞，，而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài)，請將懸浮的細胞即時離心，加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天；同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基，培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增殖而是繼續(xù)脫落死亡，請及時實驗室，技術(shù)人員會跟進解決
2.貼壁細胞生長緩慢：適當提高血清濃度（zui高不能超過20%），或可根據(jù)該細胞生長密度，考慮*消化后，轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)
3.生長不均：貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均，成島狀生長，可將細胞進行消化，重懸打散細胞，加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)

六、細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程（請嚴格遵照無菌操作）
1．吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加2~3 ml  0.25%*進行消化細胞（注意把握消化時間，通常控制在1-2min）
2．鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時（不建議消化到細胞漂?。┤サ?，加6~8ml *培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散
3．取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當?shù)?培養(yǎng)基，，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)
4．注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液（每周2-3次），待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存
特別注意：（如使用公共實驗室或初次接觸細胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng)）
1.收到細胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶培養(yǎng)基，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清（原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間zui長不宜超過72小時）
2.貼壁細胞收到當天切忌立刻消化，請將細胞放置培養(yǎng)箱孵育過夜到第二天再做消化傳代
如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并實驗室
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7.質(zhì)量保證，保證售后
Aniline blue,alcohol soluble 苯胺藍醇溶    [8004-91-9]
Aniline blue, water soluble 苯胺藍(水溶)    [28631-66-5]
Ruthenium Red 釕紅    [11103-72-3]
Azure B 天青B    [531-55-5]
Azelaic acid 壬二酸    [123-99-9]
Aflatoxin G1 G1    [1165-39-5]
Aflatoxin G2 G2    [7241-98-7]
Aflatoxin M1 from Aspergillus flavus M1    [6795-23-9]
Agarose SFRTM 瓊脂糖 SFRTM    [9012-36-6]
Agarose SFRTM 瓊脂糖 SFRTM    [9012-36-6]
Agarose 3:1 HRBTM 瓊脂糖3:1 HRBTM    [9012-36-6]
Agarose 3:1 HRBTM 瓊脂糖3:1 HRBTM    [9012-36-6]
Agarose ITM 瓊脂糖 ITM    [9012-36-6]
Agarose ITM 瓊脂糖 ITM    [9012-36-6]
Allura red 誘惑紅    [25956-17-6]
Ethyl red 乙基紅    [76058-33-8]
BPDA 聯(lián)苯二酐    [2420-87-3]
Agarose IIITM 瓊脂糖 IIITM    [9012-36-6]
Agarose IIITM 瓊脂糖 IIITM    [9012-36-6]
Agarose IVTM 瓊脂糖 IVTM    [9012-36-6]
BCA, disodium salt 2,2’-聯(lián)喹啉-4,4’-二羧酸二鈉    [979-88-4]
Benzil 聯(lián)苯甲酰    [134-81-6]
Agarose IVTM 瓊脂糖 IVTM    [9012-36-6]
Agarose B, Low EEO 瓊脂糖    [9012-36-6]
Agarose B, Low EEO 瓊脂糖    [9012-36-6]
Agarose H 瓊脂糖H    [9012-36-6]
Agarose H 瓊脂糖H    [9012-36-6]
Agarose, Low melting 低熔點瓊脂糖    [9012-36-6]
Agarose, Low melting 低熔點瓊脂糖    [9012-36-6]
Benzimidazole 苯并咪唑    [51-17-2]
Benzopurpurine 4B 苯紅紫4B    [992-59-6]
BAEE 苯甲酰-L-*乙酯鹽酸鹽    [2645-08-1]
Alcian yellow 阿利新黃GXS()    [61968-76-1]
Ala-Gln 丙谷二肽    [39537-23-0]
β-Alanine β-*    [107-95-9]
D-Alanine D-*    [338-69-2]
DL-Alanine DL-*    [302-72-7]
L-Alanine L-*    [56-41-7]
L-Alanine L-*    [56-41-7]
DL-Alaninol DL-氨基丙醇    [6168-72-5]
Albumin, from bovine Cohn fraction V pH 5.2 牛血清白蛋白    [9048-46-8]
Albumin, from bovine pH 7.0 Fatty free 無脂肪酸牛血清白蛋白    [9048-46-8]
Albumin, from bovine Protease free 無蛋白酶牛血清白蛋白    [9048-46-8]
Albumin, from bovine pH 7.0 Low endotoxin 低內(nèi)毒素牛血清白蛋白    [9048-46-8]
Albumin, bovine, fraction V, cold alcohol isolation 牛血清白蛋白    [9048-46-8]
Albumin, bovine, fraction V, cold alcohol isolation 牛血清白蛋白    [9048-46-8]
Methyl red sodium salt 甲基紅鈉    [845-10-3]
Albumin, bovine, fraction V, cold alcohol isolation 牛血清白蛋白    [9048-46-8]
Albumin, bovine, fraction V, heat shock isolation pH 7.0 牛血清白蛋白    [9048-46-8]
Albumin, bovine, fraction V, heat shock isolation pH 7.0 牛血清白蛋白    [9048-46-8]
Albumin, bovine, fraction V, heat shock isolation pH 7.0 牛血清白蛋白    [9048-46-8]
Albumin, bovine, fraction V, heat shock isolation pH 7.0 牛血清白蛋白    [9048-46-8]
Albumin, bovine, fraction V, heat shock isolation pH 7.0 牛血清白蛋白    [9048-46-8]
小鼠分泌型磷脂酶A2（sPLA2)ELISA 試劑盒
小鼠總補體(CH50)ELISA 試劑盒
小鼠酸性粒細胞趨化因子(eotaxin)ELISA 試劑盒
小鼠毒蕈堿型乙酰*受體亞型M1（M-AChRM1)ELISA 試劑盒
小鼠毒蕈堿型乙酰*受體亞型M2(M-AChRM2)ELISA 試劑盒
小鼠粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)ELISA 試劑盒 
小鼠垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽(PACAP)ELISA 試劑盒 
小鼠抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)ELISA 試劑盒 
小鼠磷脂酰*(PS)ELISA 試劑盒 
小鼠*磷酸甘油酯(PC/CPG)ELISA 試劑盒 
小鼠β-防御素(β-DF)ELISA 試劑盒 
小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)ELISA 試劑盒 
小鼠神經(jīng)絲蛋白(NF)ELISA 試劑盒 
小鼠抗小核糖核蛋白/Sm抗體(snRNP/Sm)ELISA 試劑盒 
小鼠*/*蛋白磷酸酶(STK)ELISA 試劑盒 
小鼠抗紅細胞抗體(RBC)ELISA 試劑盒 
小鼠癌胚抗原(CEA/CD66)ELISA 試劑盒 
小鼠CD19分子(CD19)ELISA 試劑盒 
小鼠CD3分子(CD3)ELISA 試劑盒 
小鼠小扁豆素結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體3(AFP-L3)ELISA 試劑盒 
小鼠小扁豆素結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體2(AFP-L2)ELISA 試劑盒 
小鼠小扁豆素結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體1(AFP-L1)ELISA 試劑盒 
小鼠高鐵血紅蛋白(MHB)ELISA 試劑盒 
小鼠骨退化特異標志物(CTX-2)ELISA 試劑盒 
小鼠Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA 試劑盒 
小鼠少突膠質(zhì)細胞髓鞘糖蛋白抗體(OMgp-Ab)ELISA 試劑盒 
小鼠粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)ELISA 試劑盒 
小鼠垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽(PACAP)ELISA 試劑盒 
小鼠抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)ELISA 試劑盒 
小鼠磷脂酰*(PS)ELISA 試劑盒 
小鼠*磷酸甘油酯(PC/CPG)ELISA 試劑盒 
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小鼠*/*蛋白磷酸酶(STK)ELISA 試劑盒 
小鼠高鐵血紅蛋白(MHB)ELISA 試劑盒 
小鼠骨退化特異標志物(CTX-2)ELISA 試劑盒 
小鼠Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA 試劑盒 
小鼠少突膠質(zhì)細胞髓鞘糖蛋白抗體(OMgp-Ab)ELISA 試劑盒 
大鼠核因子κB抑制蛋白α(IKBα)ELISA 試劑盒 
小鼠抗核抗體(ANA)ELISA 試劑盒 
小鼠鑰孔蟲戚血藍蛋白(KLH)ELISA 試劑盒 
小鼠解整合素樣金屬蛋白酶9(ADAM9)ELISA 試劑盒 
小鼠氧化型*(GSSG)ELISA 試劑盒 
小鼠還原型*(GSH)ELISA 試劑盒 
小鼠c-fos ELISA 試劑盒 
小鼠c-jun ELISA 試劑盒 
小鼠抗透明帶抗體(aZP)ELISA 試劑盒 
小鼠粘蛋白/粘液素7(MUC7)ELISA 試劑盒