扁豆凝集素(LCA)ELISA試劑盒本試劑盒用于測定血清，血漿及相關液體樣本中含量。

實驗原理：

   本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中該產(chǎn)品水平。用純化的本產(chǎn)品抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入本產(chǎn)品抗原，再與HRP標記的本產(chǎn)品抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的本產(chǎn)品呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中該產(chǎn)品濃度。

試劑盒組成：

扁豆凝集素(LCA)ELISA試劑盒標本要求： 

1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融

2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

操作步驟：

• 標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設標準品孔10孔，在*、第二孔中分別加標準品100μl，然后在*、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為1200 ng/L，800 ng/L ，400 ng/L，200ng/L， 100 ng/L）。
• 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
• 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
• 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。
• 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
• 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
• 溫育：操作同3。
• 洗滌：操作同5。
• 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘. 
• 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
• 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。

注意事項：

• 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。
• 濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。
• 各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，使用排槍加樣。
• 請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
• 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
• 底物請避光保存。
• 嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
• 所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
• 本試劑不同批號組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準。

計算：

以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，    

在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD      

值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋      

倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD值計算出標      

準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值      

代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋      

倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。                                                               

試劑盒性能：

1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.95以上。

2.批內(nèi)與批見應分別小于9%和11%     

扁豆凝集素(LCA)ELISA試劑盒保存條件及有效期：

1.試劑盒保存；2-8℃。

2．有效期：6個月

扁豆凝集素(LCA)ELISA試劑盒其它產(chǎn)品P-1153-5    乳糖蛋白胨培養(yǎng)液    250g    用于腸道菌生化試驗（復發(fā)酵）（GB）    
P-1153    0.5%乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基    250g    用于腸道菌生化試驗（復發(fā)酵）    
原   料                
P-0004    蛋白胨(國產(chǎn))    250g    本品為動物蛋白胰酶消化產(chǎn)物，富含多肽，寡肽及游離氨基酸成分。為微生物提供有機氮源    
P-0006    牛肉浸出粉（國產(chǎn)）    250g    本品為牛肉經(jīng)胰酶輕度消化而制成的淺黃色粉末，富含糖類、有機氮、水溶性維生素及無機鹽    
P-0010    蛋白胨（進口）    250g    本品為動物蛋白胰酶消化產(chǎn)物，富含多肽，寡肽及游離氨基酸成分。為微生物提供有機氮源    
P-0011    胰酪蛋白胨    250g    本品為干酪素胰酶消化產(chǎn)物，富含色氨酸，適宜做靛基質(zhì)及糖發(fā)酵試驗。為微生物提供有機氮源    
P-0012    牛肉浸出粉（進口）    250g    本品為牛肉經(jīng)胰酶輕度消化而制成的淺黃色粉末，富含糖類、有機氮、水溶性維生素及無機鹽    
P-0013    細菌瓊脂粉（國產(chǎn)）    250g    本品為江蘺提取的藻膠，為瓊脂糖和瓊膠質(zhì)組成的長鏈多糖復合體    
P-0014    牛膽鹽    100g    為牛膽汁中提取的鈉鹽，含膽色素、膽汁酸鹽及各種無機離子    
P-0015    酸水解酪蛋白    250g    提供微生物生長所需生長因子，為培養(yǎng)基原材料    
P-0016    去氧膽酸鈉    100g    為動物膽汁深加工鈉鹽，有刺激性苦味，易吸濕    
P-0017    酵母浸出粉（國產(chǎn)）    250g    本品為酵母細胞的自溶物經(jīng)濃縮，噴霧干燥而成的粉狀物，酵母粉富含B族微生物，有機氮以及碳水化合物    
P-0018    大豆蛋白胨    250g    為大豆粉木瓜蛋白酶水解產(chǎn)物，富含多種碳水化合物，氮含量較高    
P-0020    細菌學瓊脂粉（進口）    250g    本品為石花菜提取的藻膠，為瓊脂糖和瓊膠質(zhì)組成的長鏈多糖復合體    
P-0021    玉米浸出粉    250g    培養(yǎng)基原料，為微生物提供豐富的營養(yǎng)成分    
P-0022    馬鈴薯浸出粉    250g    培養(yǎng)基原料，為微生物提供豐富的營養(yǎng)成分    
P-0029    酵母浸出粉（進口）    250g    本品為酵母細胞的自溶物經(jīng)濃縮，噴霧干燥而成的粉狀物，酵母粉富含B族微生物，有機氮以及碳水化合物    
P-0040    無水葡萄糖    250g    本品為微生物生長提供必需的碳源