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PUC18質(zhì)粒

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更新時間:2017-12-05 15:50:28瀏覽次數(shù):245次

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PUC18質(zhì)粒
中文名稱:PUC18質(zhì)粒
其他中文名稱:PUC18 
產(chǎn)品規(guī)格: BR 
包裝: 20微克 
級別:BR
濃度:450ug/ml
性狀:液體或粉末。pUC18是適合于雙脫氧法DNA測序的載體,通常運用于重組dna的分子克隆中,首先我們制備大腸桿菌的感受態(tài)細(xì)胞(能接受外來重組的dna),這種感受態(tài)菌株必須不同外來DNA分子發(fā)生遺傳重組,通常是rec基因缺陷型的突變體,同時它們必須是限制系統(tǒng)缺陷或限制與修飾系統(tǒng)均缺陷的菌株,即具有具有這三種缺陷(rk mk rec ),同時對氨芐*敏感(ap)。puc18載體自身帶有抗氨芐*基因,而外源片段不具有,這樣只有帶有puc18的轉(zhuǎn)化子的菌株才能在氨芐*平板上存活,而外源片段自身環(huán)化的不能存活,這稱為抗性篩選。pUC18 上帶有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的調(diào)控序列和β-半乳糖苷酶N 端146 個氨基酸的編碼序列,在這個編碼區(qū)中插有一個多克隆位點,且不影響正常功能,DH5α感受態(tài)菌株帶有β-半乳糖苷酶C 端部分序列的編碼信息,當(dāng)puc18載體在正常情況下同感受態(tài)菌株融合后,互補表達具有酶活性的蛋白質(zhì),稱為α-互補現(xiàn)象,當(dāng)有外源片段插入多克隆位點后,互補現(xiàn)象消失,其形成的菌株顏色具有很大的差異,很容易鑒別,這種篩選方法稱為α-互補現(xiàn)象篩選。由上可見,puc18載體除了能重組導(dǎo)入外源片段外,在篩選表達過程中還具有重要的作用
用途:生化研究??寺⊥庠椿颉@胠ac promoter進行基因表達。使用M13 primers進行DNA測序。
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