人血血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)ELISA試劑盒
三.樣品收集、處理及保存
1).細胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2)細胞:用PBS反復洗滌細胞3次,調整細胞濃度達到104-106/ml 左右,通過反復凍融,使細胞破壞并放出細胞內成份,或者細胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。
3)血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。
4)血漿:應根據標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
5)體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6.)組織標本:切取組織標本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進行檢測。
樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
7)保存:如果樣品不能立即檢測,應將其分裝,-70 ℃保存,避免反復冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。血液標本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
人血血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)ELISA試劑盒
高值鉤鐮效應(HD-HOOK)
◎在二位點夾心ELISA中,其劑量反應曲線的高劑量(HIGH DOSE,HD)區(qū)段,線性走向不是呈平臺狀無限后延,而是向下彎曲狀,似一只鉤子或一把鐮刀(HOOK),MILES(1974)根據此現(xiàn)象寫實性地稱之為"HD-HOOK"效應。產生該現(xiàn)象的分子機理有"分子變構說"和"濃度效應"等推論。
◎一步法和二步法均存在, 只是前者出現(xiàn)的更早些,大多數(shù)是高值低吸光度,很少陰性結果。
人血血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)ELISA試劑盒
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