雞抗*Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISA試劑盒
酶標(biāo)(ELISA,EIA)診斷試劑盒操作中出現(xiàn)的問題:現(xiàn)象、可能原因和解決辦法
1、 不同廠家生產(chǎn)的試劑盒因生產(chǎn)工藝和操作方法略有不同,務(wù)必按照所用試劑盒嚴(yán)格操作,否則容易產(chǎn)生檢測結(jié)果的不確定性.
2、 若不同批號試劑的不同組分(A液或酶工作液),或不同試劑的不同組分進行交叉使用,有可能出現(xiàn)顯色淺或本底高,花板等情形。
3、 加樣時樣品量誤差,對于陰或很陽的標(biāo)本影響不大,但對閾值附近的標(biāo)本影響*,建議校對加樣器。
4、 反應(yīng)時間的誤差,做大量標(biāo)本時,*孔和zui后一孔以及一些特殊標(biāo)本可能影響較大。
5、 由于滴瓶的精密性肯定不如加樣器,不排除不同滴頭滴量的誤差。另外滴加過程中是否產(chǎn)生氣泡、速度是否均勻,是否顫動等影響液量的因素均可導(dǎo)致以上情況。高標(biāo)準(zhǔn)要求時應(yīng)使用加樣器。
6、 閾值附近實際上是個灰區(qū)(gray scale),不能截然分為陰性、陽性,國外廠家均要求對這部分可疑標(biāo)本進行奇數(shù)次復(fù)檢,以次數(shù)多者為準(zhǔn),如一次陽兩次陰zui后判為陰,但實際上是否為陰不好說,只有判為可疑,臨床上可以讓患者過一段時間后再測。
7、 肉眼觀察稍顯色,酶標(biāo)儀打印為陰性的標(biāo)本在實際工作中是難以避免的,肉眼目測結(jié)果不可靠,應(yīng)以酶標(biāo)儀判讀為準(zhǔn)。
8、 由陰性變?yōu)閺婈栃栽蚨酁椴僮鬟^程中漏加試劑等有關(guān)。
9、 臨界值附近標(biāo)本波動為正?,F(xiàn)象,任何試劑均不可避免??梢钥紤]將標(biāo)本做奇數(shù)次復(fù)檢。
雞抗*Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISA試劑盒
結(jié)合物
結(jié)合物即酶標(biāo)記的抗體(或抗原),是ELISA中zui關(guān)鍵的試劑。良好的結(jié)合物應(yīng)該是既保有酶的催化活性,也保持了抗體(或抗原)的免疫活性。結(jié)合物中酶與抗體(或抗原)之間有恰當(dāng)?shù)姆肿颖壤诮Y(jié)合試劑中應(yīng)盡量不含有或少含有游離的(未結(jié)合的)酶或游離的抗體(或抗原)。此外,結(jié)合物尚要有良好的穩(wěn)定性。
雞抗*Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISA試劑盒
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